于梁
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:吉林大学更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金国家林业公益性行业科研专项国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:化学工程生物学理学更多>>
- 来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因的合成与融合表达
- 2014年
- 将来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因用大肠杆菌中的丰沛密码子替换,利用化学和基于聚合酶链反应(PCR)技术的酶促方法进行基因全合成,利用pET-32a构建重组表达载体pET-dan,转化进E.coil BL21(DE3)中进行融合表达.经SDS-PAGE电泳、Western-blot检测和活性测定发现,D-ANase可在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白可达到菌体总蛋白的69.2%,密码子优化后基因构建的工程菌发酵活性为96 U/mL,重组蛋白经超声细胞破碎及Ni2+柱亲和层析纯化,比活可达1692.3 U/mg,纯度可达95%以上.
- 侯欣彤董媛林瑞东于梁任媛媛李剑光高朝辉滕利荣
- 关键词:基因合成
- 同时利用戊糖己糖产乙醇E.coli工程菌的构建
- 地球上每年植物光合作用的生物量可达1145亿t,其中大部分为木质纤维素类。利用酸解或酶解的方法将木质纤维素转化为还原性糖会产生大量的五碳糖(D-木糖和L-阿拉伯糖)和六碳糖(葡萄糖、半乳糖和甘露糖),其中六碳糖约占2/3...
- 于梁
- 关键词:大肠杆菌戊糖己糖乙醇基因工程菌