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杨金华

作品数：1 被引量：0H指数：0
供职机构：复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部／卫生部重点实验室更多>>
发文基金：国际科技合作与交流专项项目南京医科大学科技发展基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇多克隆
  • 1篇多克隆抗体
  • 1篇乙型
  • 1篇联蛋白
  • 1篇膜联蛋白
  • 1篇抗体
  • 1篇抗体制备
  • 1篇克隆
  • 1篇克隆表达
  • 1篇肝炎
  • 1篇肝炎病毒
  • 1篇病毒

机构

  • 1篇南京医科大学...
  • 1篇复旦大学上海...

作者

  • 1篇闫梁
  • 1篇贲海静
  • 1篇瞿涤
  • 1篇赵艳丰
  • 1篇许斌
  • 1篇周双宬
  • 1篇杨金华

传媒

  • 1篇中华生物医学...

年份

  • 1篇2012
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
鸭膜联蛋白2cDNA的克隆表达及抗体制备
2012年
目的克隆樱桃谷鸭膜联蛋白2（AnnexinA2）并制备抗体，用于鸭AnnexinA2蛋白的表达分析。方法采用RT-PCR方法从鸭肝脏组织中克隆鸭AnnexinA2eDNA序列，将该cDNA序列亚克隆到原核表达载体pET-28a（＋），构建重组原核表达载体pET-28a（＋）．AnnexinA2。异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导AnnexinA2重组质粒原核表达，应用镍柱纯化AnnexinA2融合蛋白。腹腔注射AnnexinA2融合蛋白免疫小鼠，采用免疫印迹鉴定小鼠抗鸭AnnexinA2多克隆抗体并检测鸭原代肝细胞在培养12、24、72h以及120hAnnexinA2蛋白表达情况。结果成功构建了原核表达载体pET-28a（＋）．AnnexinA2，经NcoI和XhoI双酶切，琼脂糖凝胶电泳显示5369bp和1020bp条带，重组质粒测序结果显示重组序列正确。IPTG诱导重组质粒表达产生相对分子质量为36000的可溶性融合蛋白。AnnexinA2融合蛋白免疫小鼠，获得的抗血清1：2000稀释经免疫印迹仍能检测到靶蛋白，获得的小鼠抗鸭AnnexinA2多克隆抗体可应用于鸭原代肝细胞表达检测，AnnexinA2蛋白在鸭原代肝细胞培养12、24、72h以及120h均有表达。结论制备了小鼠抗鸭AnnexinA2多克隆抗体，可为探讨AnnexinA2影响鸭乙型肝炎病毒感染分子机制提供实验依据。
赵艳丰闫梁许斌贲海静杨金华周双宬瞿涤
关键词：多克隆抗体肝炎病毒乙型
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