周双宬
- 作品数：4 被引量：34H指数：2
- 供职机构：复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部／卫生部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目南京医科大学科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氧化苦参碱在鸭原代肝细胞中抗鸭乙肝病毒(DHBV)作用的研究被引量：24
- 2006年
- 通过建立鸭原代肝细胞-DHBV感染模型研究氧化苦参碱抗DHBV的作用。分别在DHBV感染前、感染同时以及感染后给药，利用打点杂交、Southern印迹核酸杂交和荧光定量PCR方法分别检测培养细胞上清及细胞内病毒核酸，观察氧化苦参碱在病毒感染的各个环节所起的抗病毒作用。实验结果显示：1mg／mL氧化苦参碱处理细胞后，鸭原代肝细胞培养上清及细胞内的DHBV核酸明显低于病毒感染对照组，病毒抑制率达91．6％；在病毒感染同时加药对病毒的抑制率可达98．5％；感染后持续用药能使不同培养天数的鸭肝细胞内的DHBV核酸降低60．5％～96．6％；氧化苦参碱与DHBV共孵育后，可以使病毒感染力下降69．6％。结果说明氧化苦参碱可以在DHBV感染鸭原代肝细胞的多个环节，包括病毒吸附、进入细胞及细胞内复制等方面发挥抗病毒作用。
- 许斌周双宬黄玉仙瞿涤
- 关键词：鸭乙肝病毒氧化苦参碱抗病毒作用
- 鸭膜联蛋白2cDNA的克隆表达及抗体制备
- 2012年
- 目的克隆樱桃谷鸭膜联蛋白2（AnnexinA2）并制备抗体，用于鸭AnnexinA2蛋白的表达分析。方法采用RT-PCR方法从鸭肝脏组织中克隆鸭AnnexinA2eDNA序列，将该cDNA序列亚克隆到原核表达载体pET-28a（＋），构建重组原核表达载体pET-28a（＋）．AnnexinA2。异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导AnnexinA2重组质粒原核表达，应用镍柱纯化AnnexinA2融合蛋白。腹腔注射AnnexinA2融合蛋白免疫小鼠，采用免疫印迹鉴定小鼠抗鸭AnnexinA2多克隆抗体并检测鸭原代肝细胞在培养12、24、72h以及120hAnnexinA2蛋白表达情况。结果成功构建了原核表达载体pET-28a（＋）．AnnexinA2，经NcoI和XhoI双酶切，琼脂糖凝胶电泳显示5369bp和1020bp条带，重组质粒测序结果显示重组序列正确。IPTG诱导重组质粒表达产生相对分子质量为36000的可溶性融合蛋白。AnnexinA2融合蛋白免疫小鼠，获得的抗血清1：2000稀释经免疫印迹仍能检测到靶蛋白，获得的小鼠抗鸭AnnexinA2多克隆抗体可应用于鸭原代肝细胞表达检测，AnnexinA2蛋白在鸭原代肝细胞培养12、24、72h以及120h均有表达。结论制备了小鼠抗鸭AnnexinA2多克隆抗体，可为探讨AnnexinA2影响鸭乙型肝炎病毒感染分子机制提供实验依据。
- 赵艳丰闫梁许斌贲海静杨金华周双宬瞿涤
- 关键词：多克隆抗体肝炎病毒乙型
- 独立生长因子1在内毒素耐受小鼠肺组织中的作用研究
- 2007年
- 目的:研究独立生长因子1(Gfi1)在内毒素耐受小鼠接受大剂量内毒素(LPS)刺激后的表达。方法:74只C57BL/6小鼠随机分两组,对照组用0．9%NaCl注射后用大剂量LPS刺激,内毒素耐受组用小剂量LPS预处理后用大剂量LPS刺激。比较两组小鼠存活率,各时间点肺组织病理。用ELISA法检测肺组织TNF-α,RT-PCR检测肺组织Gfi1 mRNA,免疫组化法检测肺组织Gfi1蛋白表达。结果:内毒素耐受组小鼠存活率高,肺组织炎症反应轻,LPS刺激后TNF-α水平未见上升;LPS刺激后2h,6h小鼠肺组织Gfi1的mRNA表达较对照组高(P＜0．01);LPS刺激后6h、12h免疫组化显示小鼠肺组织Gfi1表达比对照组高(P＜0．01)。结论:内毒素耐受时,大剂量内毒素引起的肺部炎症反应较轻可能与肺部Gfi1高表达有关。
- 祝敏芳瞿介明张辉军周双宬张静董生福
- 关键词：内毒素耐受脂多糖
- 瘦素的生物学功能被引量：10
- 2004年
- 瘦素的发现是基于对肥胖基因的研究 ,最初使它受关注的是它减少动物摄食和降低体内脂肪沉积的作用。然而近年来对它的一系列研究已远远超出了这个单一的领域 ,瘦素对肝肾等全身多种重要器官生理的活动、整体水平的糖脂代谢甚至机体生长发育的调控作用被陆续发现。虽然其中仍有许多机制待阐明 ,但各种研究成果不断。本文主要归纳介绍瘦素调节脂肪代谢的基本作用及其对骨骼、神经、消化、心血管以及内分泌系统的调控作用的一些较重要的研究发现 ,并对其机制作初步探讨。
- 周双宬徐王景达迟亚云张熙王磊左伋
