张露
- 作品数：7 被引量：38H指数：2
- 供职机构：杭州师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 褐飞虱可溶性海藻糖酶的分子特性及dsRNA抑制表达分析被引量：2
- 2017年
- 为探究不同昆虫可溶性海藻糖酶的潜在功能,在获得褐飞虱2个可溶性海藻糖酶NlTRE1-1和NlTRE1-2的cDNA全长序列的基础上,采用生物信息学相关软件分析其序列特征以及二级、三级结构等分子特性及生理功能,同时构建不同昆虫海藻糖酶的系统进化树,进一步采用RNAi技术分析单个海藻糖酶基因抑制效果.结果显示,褐飞虱可溶性海藻糖酶NlTRE1-1和NlTRE1-2蛋白相似性高,其蛋白质二级和三级结构均类似,二级结构中含有相似比例的α螺旋、β-折叠和无规卷曲;系统进化树分析表明褐飞虱海藻糖酶与大豆蚜、豌豆蚜和灰飞虱等昆虫的TRE1具有较近的亲缘关系;且两个褐飞虱特异性TRE1-1和TRE1-2的dsRNA注射后48h,本基因的表达极显著下降.研究结果为以抑制海藻糖酶基因表达来进行的害虫防治技术奠定基础.
- 陈坚毅张露王莎莎丁艳娟赵丽娜王世贵唐斌
- 关键词：褐飞虱QRT-PCR
- 一种几丁质代谢调控基因NlTPS、编码蛋白、载体、工程菌及其应用
- 本发明公开了一种几丁质代谢调控基因NlTPS、编码蛋白、载体、工程菌及其应用，所述基因NlTPS核苷酸序列为下列之一：a、SEQ.ID.NO.1或SEQ.ID.NO.2；b、与SEQ.ID.NO.1或SEQ.ID.NO....
- 唐斌杨萌萌沈祺达张露王世贵
- 文献传递
- 一种几丁质代谢调控基因、编码蛋白、载体、工程菌及其应用
- 本发明公开了一种几丁质代谢调控基因、编码蛋白、载体、工程菌及其应用，所述基因核苷酸序列为a、SEQ.ID.NO.1所示的核苷酸序列；b、与SEQ.ID.NO.1所示的核苷酸序列互补的序列；本发明NlTRE1‑2能够调控昆...
- 张露陈坚毅王莎莎赵丽娜唐斌王世贵
- 文献传递
- 浙江临安大明山常见蝴蝶资源种类调查与分析
- 2017年
- 大明山位于浙江杭州临安市,拥有比较丰富的动植物资源。该次调查分别于2014—2016年每年7月上旬,在临安大明山地区的山岭、溪水、果园、农田等地共采集193只蝴蝶,隶属7科。其中以蛱蝶科(Nymphalidae)为主要科,共24种90只,凤蝶科(Papilionidae)11种23只,眼蝶科(Satyridae)11种25只,粉蝶科(Pieridae)5种47只,其他科蝴蝶7种8只,其中包括1只国家二级保护蝴蝶箭环蝶。分析2014—2016年大明山鳞翅目昆虫蝴蝶主要常见种和观赏价值高的种,以及3年间各科蝴蝶种类和数量的动态变化,为大明山的物种多样性保护及蝴蝶资源的开发和保护提供了基础数据和科学依据。
- 王莎莎陈坚毅张露王世贵唐斌
- 关键词：蝴蝶资源蛱蝶凤蝶
- 一种几丁质代谢调控基因NlTPS、编码蛋白、载体、工程菌及其应用
- 本发明公开了一种几丁质代谢调控基因NlTPS、编码蛋白、载体、工程菌及其应用，所述基因NlTPS核苷酸序列为下列之一：a、SEQ.ID.NO.1或SEQ.ID.NO.2；b、与SEQ.ID.NO.1或SEQ.ID.NO....
- 唐斌杨萌萌沈祺达张露王世贵
- 文献传递
- 褐飞虱海藻糖酶基因在表皮几丁质代谢中的调控作用被引量：21
- 2017年
- 【目的】昆虫海藻糖酶能够调控几丁质代谢并控制蜕皮过程。本研究通过TRE表达被抑制后,检测褐飞虱(Nilaparvata lugens)蜕皮状况、几丁质含量及几丁质合成酶(chitin synthase,CHS)和几丁质酶(chitinase,Cht)基因表达情况,探究不同的海藻糖酶(trehalase,TRE)在褐飞虱表皮中对几丁质代谢的调控作用。【方法】采用RNAi技术,以实验室饲养种群褐飞虱为材料,通过向其体内注射双链RNA(dsRNA)分别抑制单个海藻糖酶基因或同时抑制多个海藻糖酶基因,注射48 h后通过Trizol法提取褐飞虱总RNA,反转录试剂盒合成第一链DNA后采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测该基因的表达情况,确定RNAi效果。氢氧化钾法测定48 h褐飞虱整体几丁质含量变化并对蜕皮困难虫体进行拍照;最后采用qRT-PCR检测褐飞虱CHS和Cht在mRNA水平上的相对表达量变化,分析TRE在调控几丁质代谢中的作用。【结果】与注射dsGFP相比较,其余各注射组褐飞虱整体几丁质含量显著下降,其中dsTRE1混合注射组与Validamycin注射组呈极显著下降,同时褐飞虱出现蜕皮困难等现象。qRT-PCR检测结果显示单个TRE的dsRNA注射后该基因的表达被抑制,但是部分TRE的表达有互补性上升。其中TRE1-2和TRE2在各注射组处理下表达均下降,dsTRE1s对TRE2的表达也有抑制效果,整体上dsTRE1混合注射组和海藻糖酶抑制剂Validamycin抑制效果明显;dsTRE注射组抑制CHS表达效果不明显,Validamycin能够显著降低CHS1和CHS1a在表皮中的表达,且2种dsTRE1注射后CHS1表达在上升,dsTRE1-2注射后表皮中的CHS1a的表达上升;Cht1和Cht8在dsTRE各注射组及Validamycin处理中表达下降或显著下降,dsTRE1-1注射后Cht2和Cht5表达显著上升;dsTRE1-2注射后Cht1、Cht6和Cht8表达下降,Cht2和Cht4表达显著上升;dsTRE2处理组中Cht1、Cht8和Cht10表达下降而Cht9表达显著上升;dsTRE1s注射后,Cht1和Cht5表达显著下降,而Cht9表达显著上升;V
- 张露朱世城郑好沈祺达王世贵唐斌
- 关键词：褐飞虱RNAI海藻糖酶表皮
- 海藻糖代谢及其调控昆虫几丁质合成研究进展被引量：23
- 2018年
- 海藻糖为一种非还原性糖,广泛存在于细菌、藻类、真菌、植物和无脊椎动物中。海藻糖被称为昆虫"血糖",源于该糖为昆虫血淋巴中的主要糖类物质,在昆虫生长、发育、蜕皮等正常生理活动中有着重要的作用。昆虫的海藻糖先由海藻糖合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)生成海藻糖-6-磷酸,然后通过海藻糖磷酸脂酶(trehalose-6-phosphate phosphatase,TPP)最终合成海藻糖,在能量需求时通过海藻糖酶(trehalase,TRE)降解为葡萄糖,用于能量供给。几丁质为昆虫表皮、中肠围食膜和气管系统的主要组成成分,昆虫在发育过程中需要蜕掉旧表皮,形成新的表皮,该过程一直是害虫控制的重要靶标途径。海藻糖酶为昆虫几丁质合成途径的第一个酶,在几丁质合成通路中有着重要的功能。那么海藻糖代谢又是如何调控几丁质合成途径来控制昆虫的蜕皮及几丁质代谢的呢?随着国内外海藻糖代谢相关基因功能研究的深入开展,研究结果表明昆虫海藻糖供给在几丁质合成中具有重要的作用,海藻糖酶分为可溶性和膜结合型两类,可溶性TRE和TPS在不同昆虫种类中具有多个同源基因,表明昆虫海藻糖代谢进化途径多样化。其次,海藻糖代谢直接调控几丁质合成途径,不论是海藻糖合成酶还是海藻糖酶基因的低表达,均能控制海藻糖使其供给不平衡,从而导致几丁质合成途径受阻,特别是几丁质合成酶基因表达降低而造成几丁质含量下降,该调控作用可进一步引起昆虫蜕皮困难、翅发育畸形等,甚至大量死亡。再次,海藻糖酶抑制剂能够抑制可溶性和膜结合型两类海藻糖酶活性、引起几丁质合成通路相关基因及几丁质酶基因表达的显著下降,导致几丁质含量显著降低,产生高比例的昆虫个体死亡。这些结果充分表明,一旦昆虫海藻糖代谢的供给平衡被打破,会直接影响到昆虫的几丁质合成乃至昆虫
- 唐斌张露熊旭萍汪慧娟王世贵
- 关键词：海藻糖合成酶海藻糖酶RNA干扰
