陈小莹
- 作品数：13 被引量：40H指数：4
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 化疗性卵巢早衰动物模型及患者血清miR-21的水平变化
- 目的：通过检测化疗性卵巢早衰(chemotherapy-induced premature ovarian failure,CIPOF)大鼠动物模型及患者血清microRNA-21(miR-21)的水平,探讨miR-21...
- 付霞霏何援利王雪峰陈小莹李欣然王清
- 关键词：卵巢早衰化疗MIR-21
- 化疗性卵巢功能早衰动物模型及患者血清miR-21水平的变化被引量：4
- 2016年
- 目的检测化疗性卵巢功能早衰(CIPOF)大鼠动物模型及患者血清micro RNA-21(mi R-21)的水平,探讨mi R-21与CIPOF的发生是否存在相关性。方法采用腹腔注射环磷酰胺建立CIPOF动物模型,在建模后第1、15天尾静脉采血,QT-PCR法检测血清mi R-21水平,同时检测雌二醇(E2)及卵泡刺激素(FSH)水平、卵巢结构,并行相关性分析。收集2014年1月-2015年6月就诊的CIPOF患者30例,以及健康体检的育龄女性30例作为对照,检测血清mi R-21水平,同时与其他检测指标[黄体生成素(LH)、E2、FSH、泌乳素(PRL)]进行相关性分析。结果 CIPOF动物模型及患者血清mi R-21水平分别较对照组明显降低,差异有统计学意义(t=15.467,P=0.000;t=10.197,P=0.000)。动物模型中mi R-21分别与E2,始基、初级、次级及窦状卵泡数目呈正相关(r=0.750,P=0.000;r=0.403,P=0.006;r=0.704,P=0.000;r=0.783,P=0.000;r=0.849,P=0.000),与FSH呈负相关(r=–0.801,P=0.000)。临床患者中mi R-21与E2呈正相关(r=0.817,P=0.000),与FSH、LH呈负相关(r=–0.771,P=0.000;r=–0.784,P=0.000),与PRL无相关性(r=0.204,P=0.207)。结论在CIPOF动物模型及患者血清中mi R-21水平降低,与卵巢功能下降呈正相关,提示mi R-21可能参与CIPOF的发病过程,有望成为防治CIPOF的新靶点。
- 付霞霏何援利王雪峰陈小莹李欣然王清
- 关键词：微RNAS疾病模型
- 过表达miR-21的骨髓间充质干细胞对化疗性卵巢早衰的修复作用被引量：8
- 2019年
- 目的探讨过表达miR-21的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对化疗性卵巢早衰大鼠模型的修复作用。方法构建miR-21慢病毒表达载体(LV-miR-21),转染BMSCs构建miR-21-BMSCs。实验分为5组:正常组、模型组、miR-21组、BMSCs组、miR-21-BMSCs组,每组20只大鼠。大鼠腹腔内注射环磷酰胺(CTX)构建化疗性卵巢早衰大鼠模型。正常组及模型组大鼠双侧卵巢注射生理盐水,其余3组分别注射LV-miR-21、BMSCs、miR-21-BMSCs。检测各组大鼠动情周期、雌二醇(E_2)及卵泡刺激素(FSH)水平、卵巢重量及各级卵泡计数、卵巢颗粒细胞凋亡率。结果正常组大鼠动情周期不变,其余4组注射CTX后均出现动情周期紊乱,其中miR-21-BMSCs组恢复动情周期的大鼠数量明显多于其余3组。在注射CTX后30、45、60d,miR-21-BMSCs组卵巢重量及各级卵泡计数明显高于模型组、miR-21及BMSCs组(P<0.05);各组大鼠基础E_2、FSH水平差异无统计学意义,正常组大鼠E_2、FSH在实验期间无明显改变,其余4组大鼠E_2浓度下降、FSH浓度升高,miR-21-BMSCs组激素水平与miR-21组及BMSCs组相比差异均有统计学意义[E_2:F_(30d)=43.10,F_(45d)=43.57,F_(60d)=44.98,P<0.05;FSH:F_(30d)=14.71,F_(45d)=13.16,F_(60d)=15.20,P<0.05)];与模型组、miR-21组、BMSCs组相比,miR-21-BMSCs组颗粒细胞凋亡率明显下降(F_(15d)=27.20,F_(30d)=23.60,F_(45d)=21.80,F_(60d)=21.20,P<0.05)。结论 miR-21能增强BMSCs对化疗性卵巢早衰的治疗作用,显著减轻卵巢结构及功能损伤。
- 汪庆如陈小莹李欣然王清付霞霏
- 关键词：MIR-21骨髓间充质干细胞卵巢早衰卵巢颗粒细胞
- miR-21调控PTEN及PDCD4基因治疗化疗性卵巢早衰
- 目的：研究miR-21在化疗性卵巢早衰大鼠模型中的治疗作用及其机制.方法：将大鼠随机分配为空白对照组、模型组、空载组及miR-21组,通过腹腔注射环磷酰胺(CTX)建立化疗所致卵巢早衰大鼠模型,建模后往miR-21组大鼠...
- 李欣然何援利王雪峰彭冬先陈小莹王清付霞霏
- 过表达miR-21的骨髓间充质干细胞在化疗性卵巢早衰大鼠模型中的治疗潜能及机制被引量：6
- 2018年
- 目的:探讨过表达miR-21的BMMSCs对化疗性卵巢早衰的治疗作用及可能机制。方法:采用分子生物学方法构建miR-21慢病毒表达载体(LV-miR-21)。使用LV-miR-21转染体外分离培养的大鼠BMMSCs,获得过表达miR-21的BMMSCs(miR-21-BMMSCs)。建立化疗性卵巢早衰大鼠模型,双侧卵巢注射miR-21-BMMSCs,分别于注射后第15天、30天、45天、60天分批处死大鼠。采用阴道涂片测定动情周期,卵巢称重,HE染色进行卵泡计数,化学发光法测定性激素水平,TUNEL法测定卵巢颗粒细胞凋亡率,qRT-PCR、Western blot法检测miR-21及PTEN、PDCD4的mRNA及蛋白水平。结果:双侧卵巢注射miR-21-BMMSCs后,化疗诱导的POF大鼠动情周期恢复率、卵巢重量、各级卵泡数和E2水平增加,而FSH水平及卵巢颗粒细胞凋亡率下降。此外,miR-21表达水平的上升伴随PTEN、PDCD4 mRNA及蛋白水平的下降。结论:过表达miR-21的BMMSCs能更有效地治疗化疗性卵巢早衰,可能与其调控靶基因PTEN、PDCD4密切相关。
- 李欣然何援利王雪峰彭冬先陈小莹王清付霞霏
- 关键词：MICRORNA-21骨髓间充质干细胞卵巢颗粒细胞卵巢早衰化疗
- CM-Dil标记示踪间充质干细胞可行性的体外试验被引量：1
- 2018年
- 目的探讨氯苯甲酰氨-1,1′双十八烷基-3,3′,3′,3′-四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐(CM-Dil)体外标记骨髓间充质干细胞的可行性。方法分离培养并鉴定大鼠骨髓间充质干细胞,分别用1、2、4μg/mL的CM-Dil标记间充质干细胞,观察标记后15min、24h、48h、72h、传5代、传8代的标记率;用流式细胞仪检测标记前后细胞周期的变化;用细胞计数Kit-8(CCK8)法检测细胞增殖能力。结果采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞CD44、CD29表达阳性,CD34、CD45表达阴性。1、2、4μg/mL CM-Dil标记15min后标记率分别为(31.60±1.25)%、(88.73±1.79)%、(96.89±1.31)%,差异有统计学意义(F=1 757.21,P=0.000);4组间生长曲线趋势大致相同,且4组间G1期、S期及G2/M期细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 4μg/mL CM-Dil细胞标记率高,无细胞毒性,可作为一种高效而稳定的体外标记间充质干细胞的方法。
- 陈小莹李欣然王清付霞霏
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 间充质干细胞过表达miR-21对卵巢颗粒细胞凋亡的影响被引量：5
- 2018年
- 目的探讨过表达miR-21的骨髓间充质干细胞(BMMSCs)对卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法构建miR-21慢病毒表达载体(LV-miR-21),转染BMMSCs获得稳定表达miR-21的BMMSCs(miR-21-BMMSCs)。培养Wistar大鼠卵巢颗粒细胞,实验分为5组:正常组、磷酰胺氮芥(PM)组、miR-21组、BMMSCs组、miR-21-BMMSCs组。正常组为颗粒细胞不加药,PM组加入30μmol/L的磷酰胺氮芥,miR-21组加入PM诱导颗粒细胞凋亡后转染LV-miR-21,BMMSCs组、miR-21-BMMSCs颗粒细胞培养基中加入PM 24h后分别与BMMSCs、miR-21-BMMSCs以1:1比例共培养。48h后采用流式细胞仪检测颗粒细胞凋亡情况,qRT-PCR法检测miR-21、程序性死亡因子4(PDCD4)、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)mRNA的表达量,Western blotting检测PTEN、PDCD4蛋白表达水平。结果正常组、PM组、miR-21组、BMMSCs组、miR-21-BMMSCs组的细胞凋亡率分别为10.4%±1.8%、33.4%±4.2%、27.0%±2.5%、28.0%±2.0%、19.6%±1.5%,5组间比较差异有统计学意义(F=59.35,P=0.00),其中miR-21-BMMSCs组细胞凋亡率明显低于miR-21组、BMMSCs组,但仍高于正常组。miR-21-BMMSCs组miR-21的表达量(4.0310±0.2314)明显升高,而PTEN、PDCD4的mRNA和蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。结论 BMMSCs过表达miR-21可明显减少卵巢颗粒细胞的凋亡,其机制可能与对靶基因PTEN、PDCD4的调控作用有关。
- 王清陈小莹李欣然汪庆如付霞霏
- 关键词：MIR-21化学治疗卵巢功能早衰细胞凋亡
- miR-21调控PTEN及PDCD4基因治疗化疗性卵巢早衰被引量：11
- 2017年
- 目的:探讨miR-21在化疗性卵巢早衰大鼠模型中的治疗潜能及其可能机制。方法:体外构建miR-21慢病毒载体(LV-miR-21)。将大鼠随机分为空白对照组、模型组、空载组及miR-21组,通过腹腔注射环磷酰胺(CTX)建立化疗所致卵巢早衰大鼠模型。建模后往miR-21组大鼠双侧卵巢注射LV-miR-21,注射后第1、15、30、45、60天分批处死大鼠。阴道脱落细胞涂片检测大鼠动情周期;化学发光法与免疫放射法测定性激素水平;进行卵巢称重、计数各级卵泡数;TUNEL法测定卵巢组织颗粒细胞凋亡率;qRT-PCR、Western blot法检测miR-21靶基因PTEN、PDCD的mRNA及蛋白水平。结果:体外成功构建miR-21慢病毒载体。实验结束时,miR-21组有64%(16/25)大鼠恢复规律动情周期。注射后第15、30、45、60天,miR-21组的E_2水平、卵巢颗粒细胞凋亡率均高于模型组和空载组(P=0.000),FSH水平以及PTEN、PDCD4的mRNA、蛋白表达较相应时间点的模型组和空载组显著下降(P=0.000)。注射后第30、45、60天,miR-21组的卵巢重量显著高于模型组和空载组,但仍低于空白对照组;注射后第45、60天,miR-21组各级卵泡数均多于模型组和空载组(P=0.000);结论:miR-21在化疗诱导卵巢早衰大鼠模型中具有治疗潜能,其具体作用机制可能与下调靶基因PTEN、PDCD4有关。
- 李欣然何援利王雪峰彭冬先陈小莹王清付霞霏
- 关键词：MICRORNA-21卵巢早衰卵巢颗粒细胞PTENPDCD4
- 单纯激素替代治疗卵巢早衰成功自然妊娠1例被引量：1
- 2016年
- 患者,女,27岁,因月经周期缩短3月余,于2014年9月13日在本院门诊就诊。患者既往月经规律,初潮13岁,3~4 d/28~30 d,经量中等。2014年6月无明显诱因出现月经周期缩短,缩短至15 d,月经量无明显改变,无痛经,无明显潮热、烦躁、失眠等不适。患者既往无腮腺炎病史,无手术、放疗、化疗史,家族史无特殊。
- 陈小莹付霞霏何援利
- 关键词：激素替代治疗自然妊娠卵巢早衰经量环丙孕酮
- 慢病毒介导的miR-21对化疗所致大鼠卵巢早衰的治疗作用被引量：4
- 2017年
- 目的探讨miR-21在化疗所致的卵巢早衰大鼠模型中的治疗潜能。方法采用分子生物学方法成功构建慢病毒介导的miR-21(LV-miR-21)载体。100只成年雌性Wistar大鼠随机分为:空白对照组、模型组、空载组以及miR-21组,每组25只。后3组采用环磷酰胺(CTX)腹腔注射构建化疗所致卵巢早衰大鼠模型,空载组及miR-21组于建模后分别在双侧卵巢注射空载体及LV-miR-21,空白对照组则注射生理盐水。于注射后第1、15、30、45、60天分批处死大鼠,留取血及卵巢标本。通过阴道脱落细胞涂片检测大鼠动情周期。采用化学发光法、放射免疫法检测雌二醇(E2)及卵泡刺激素(FSG)水平;测定卵巢重量、进行卵泡计数;采用TUNEL法测定卵巢颗粒细胞凋亡率。结果注射完成后15~30d、30~45d及45~60d,miR-21组分别有8、5、3只大鼠恢复规律的动情周期;注射完成后第15、30、45、60天,miR-21组的E2浓度高于模型组、空载组,而FSH浓度低于模型组及空载组(P=0.000);注射完成后第30、45、60天,miR-21组卵巢重量大于模型组及空载组(P=0.000);注射完成后第45、60天,miR-21组各级卵泡数目均高于模型组和空载组,但仍低于空白对照组(P=0.000);注射完成后第15、30、45、60天,miR-21组卵巢颗粒细胞凋亡率低于模型组和空载组(P=0.000)。结论上调miR-21能够部分修复CTX损伤的卵巢结构及功能。
- 李欣然何援利王雪峰彭冬先陈小莹王清付霞霏
- 关键词：MICRORNA-21卵巢早衰慢病毒颗粒细胞
