侯波
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：广西医科大学研究生学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划广西医学科学实验中心开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 敲除GLRX3基因对鼻咽癌细胞生物学的影响被引量：2
- 2013年
- 目的建立稳定敲除GLRX3(glutaredoxin 3)基因的鼻咽癌细胞株,探索GLRX3基因在鼻咽癌细胞中的生物学功能。方法构建人GLRX3基因的shRNA逆转录病毒载体,将其转染入鼻咽癌细胞株HONE1中,筛选、建立稳定敲除GLRX3基因的HONE1细胞株。采用实时荧光定量PCR法验证筛选细胞中GLRX3基因的转录水平,通过克隆形成实验和划痕实验检测敲除GLRX3基因后鼻咽癌细胞克隆形成能力及迁移运动能力,评价敲除GLRX3基因后鼻咽癌细胞生物学行为的改变情况。结果成功构建的4个GLRX3 shRNA-pBINNS2质粒载体均可抑制GLRX3基因的转录表达。敲除GLRX3基因的HONE1细胞的克隆形成能力及迁移运动能力均降低。结论敲除GLRX3基因可抑制鼻咽癌细胞的恶性生物学行为,GLRX3可能是鼻咽癌候选的癌基因。
- 由金萍肖雪侯波赵蔚田芳云周晓莹莫立根张哲黄光武
- 关键词：鼻咽肿瘤RNA干扰SHRNA逆转录病毒载体
- 人CYB5R2基因真核表达载体的构建
- 2011年
- 目的构建人CYB5R2基因真核表达载体,并观察其在人鼻咽癌细胞HONE1中的表达。方法根据表达载体pCMV-Tag3A上的多克隆位点和CYB5R2基因CDS序列设计引物,应用RT-PCR从人睾丸cDNA中克隆出CYB5R2的CDS,并进行TA克隆。对经PCR、双酶切和双向测序验证正确的质粒,进行CDS目的片段的回收,将其连接于pCMV-Tag3A载体的多克隆位点内构建真核载体,然后进行PCR、双酶切和双向测序验证。脂质体法转染鼻咽癌细胞HONE1细胞,荧光显微镜观察和RT-PCR验证该基因的表达。结果 PCR、双酶切和双向测序结果显示pCMV-Tag3-CYB5R2-CDS真核表达载体构建成功,荧光显微镜和RT-PCR的结果显示该重组质粒在HONE1细胞中正确表达。结论成功构建了pCMV-Tag3-CYB5R2-CDS真核表达载体,并在鼻咽癌细胞HONE1中表达,为进一步验证其抑癌作用及探索其抑癌机制做准备。
- 余娜娜杜春平肖雪侯波黄光武张哲
- 关键词：鼻咽癌真核表达载体
