罗莉
- 作品数：4 被引量：22H指数：3
- 供职机构：成都学院(成都大学)四川抗菌素工业研究所更多>>
- 发文基金：“重大新药创制”科技重大专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 包涵体变复性技术研究进展被引量：13
- 2012年
- 现代生物技术的迅猛发展使大规模表达异源重组蛋白成为现实，这极大地促进了蛋白类产品的开发，尤其是重组蛋白药物的研发。日前非糖基化的重组蛋白表达多采用火肠杆菌的原核表达系统，该系统的突出特点是表达产物多以包涵体形式存在。与蛋白可溶性表达相比，包涵体具有产量高、蛋白稳定、容易纯化等优点，对毒性蛋白制备尤其适宜。因此，采用包涵体形式己成为规模制备重组蛋白产品的主要途径之一。
- 罗莉李坤王保成王明蓉
- 关键词：包涵体变复性原核表达系统现代生物技术重组蛋白表达可溶性表达
- 功能性包涵体的研究进展被引量：6
- 2013年
- 利用原核系统表达外源重组蛋白的一个特点是表达蛋白多以包涵体形式存在。在过去人们一直认为包涵体是错误折叠、无生物活性的蛋白,需要经过变复性的过程重新获得有生物活性、可溶的蛋白,因而变复性条件的摸索迄今仍然是该领域的难点。但近几年的研究表明包涵体并非都是无生物活性的,功能性包涵体(或者称为非传统意义包涵体)概念的提出是该领域的一个重大研究进展。由于功能性包涵体本身具有生物活性,可在非变性条件下提取,目前已经在生命科学的基础研究、生物制药、生物材料、生物催化等领域展现出良好的应用前景。重点从功能性包涵体的定义、形成机理、提取条件等近期研究进展进行综述,以期为原核细胞表达和工业生产重组蛋白药物提供新的思路。
- 罗莉何勇智张勇侠王明蓉
- 关键词：生物活性
- 重组sTNFR1蛋白包涵体洗涤方法的研究被引量：3
- 2013年
- 目的:包涵体在变复性前通常需要用洗涤液多次重复洗涤以除去杂质,这种洗涤方式往往造成包涵体收率低或洗涤时间长或纯度不高,直接影响到重组蛋白产品最终的产量和质量。通过对sTNFR1包涵体的洗涤条件进行优化,以期指导该品种的工业化生产。方法:首先采用由脱氧胆酸钠和尿素组成的两因素五水平的析因设计,以洗涤后目的蛋白的含量为评价指标,进行方差分析,选出最优组合;通过对方差结果的分析提出不同于重复洗涤的分步洗涤方式,选出较优的分步洗涤方式;然后放大洗涤样品量,验证重复洗涤和分步洗涤的结果;另外,针对不同发酵批次和产量的样品,进一步验证比较重复洗涤和分步洗涤的效果。结果:重复洗涤的方差结果表明单独使用脱氧胆酸钠或尿素洗涤的产量优于两者的联合使用,但其纯度低于两者的联合使用,其中1mol/L尿素洗涤3次(W3组合)获得的目的产量最高;分步洗涤中2%脱氧胆酸钠洗涤第一次,2%脱氧胆酸钠+2mol/L尿素洗涤第二次的洗涤方式(FW6组合)既能有效提高目的蛋白纯度,又节约了时间,是较优的组合方式;同一发酵水平(约20%目的产量)不同规模样品(3g和50g)分别经过W3和FW6洗涤后,蛋白纯度提高到约26%和31%,且后者的目的收率高于前者,表明分步洗涤优于重复洗涤;针对不同发酵水平的样品(约10%和60%目的产量),分步洗涤的效果也优于重复洗涤,但对于低发酵水平的样品,分步洗涤对其纯度的提高更明显。结论:通过对该包涵体洗涤条件的摸索,找到一种较重复洗涤更有效的分步洗涤方法,既提高了目的纯度又节约了洗涤时间,为包涵体的洗涤提供了一种新的思路。
- 罗莉秦娇荣王明蓉
- 关键词：包涵体尿素
- 重组sTNFR1蛋白药物的变复性工艺研究
- 目的：本研究采用sTNFR1基因的胞外截短区蛋白开发新型TNF抑制剂，该重组蛋白通过大肠杆菌原核系统进行高效表达，其产物以传统包涵体（不溶的、无生物活性）形式存在，因而需要经过变复性的过程以恢复其生物活性。本论文意在通过...
- 罗莉
- 关键词：包涵体复性
- 文献传递
