路国栋
- 作品数：10 被引量：11H指数：3
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- 甜叶菊甜菊醇糖苷增甜肥料及其制备方法
- 本发明公开了一种甜叶菊甜菊醇糖苷增甜肥料及其制备方法，该增甜肥料由以下质量百分比的原料制备而成：甜叶菊干叶10.0％，甜叶菊提取后叶渣20.0％，凹凸棒土70.0％。本发明以甜叶菊为原料，利用其叶片、茎段等组织中富含的多...
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- 文献传递
- 一种利用马蔺DFR基因获得基因转化植物的方法
- 本发明提供了一种表达马蔺DFR基因的重组表达载体，以及包含该重组表达载体的宿主细胞、基因转化的植物细胞和植株，以及它们在培育合成蓝色花青素的植物方面的应用，尤其是培育新花色或新果色的植物品种方面的应用，特别是培育蓝色花卉...
- 张虹陈任虎娟路国栋刘慧
- 赤霞珠葡萄果实苹果酸生物合成关键转录因子的筛选与鉴定被引量：3
- 2020年
- 该研究以宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄种植区栽培面积最大的‘赤霞珠’为材料,在前期完成从果实形成至成熟不同发育时期的转录组测序以及关键有机酸含量测定基础上,进一步通过转录因子结合位点预测、差异表达基因分析、加权基因共表达网络关联分析(WGCNA),逐步筛选出与‘赤霞珠’果实苹果酸生物合成相关功能基因特异结合的、影响苹果酸生物合成的相应转录因子,并对其进行qRT-PCR验证,以揭示这些关键功能基因及其关键转录因子在葡萄不同种植区、果实不同发育时期存在的相互调控作用机制,为以后培育优质酿酒葡萄提供新的理论依据与思路。结果表明:(1)GC/MS分析发现,‘赤霞珠’果实在4个发育时期的延胡索酸和苹果酸含量变化趋势基本一致,两种酸含量均从果实硬果期到绿果期逐步升至最高(3.63和626.53μg/g),之后缓慢下降,经转色期到成熟期后逐渐降至最低(2.14和244.26μg/g),而草酰乙酸的变化趋势却相反,在硬果期含量最高(315.54μg/g),经绿果期、转色期到成熟期逐渐降至最低值(126.11μg/g)。(2)‘赤霞珠’果实发育时期样本转录组测序共获得可能与苹果酸生物合成途径12种功能基因结合的转录因子6411个,其中延胡索酸水化酶(FH)的3个功能基因有86个转录因子,苹果酸脱氢酶(MDH)的10个功能基因有717个转录因子。(3)转录组测序数据及其与有机酸含量WGCNA关联结果的Veen分析确定了‘赤霞珠’果实成熟过程中与苹果酸生物合成相关度最高的3个FH基因(VIT_14s0060g01700、VIT_13s0019g03330、VIT_07s0005g00880)、2个MDH基因(VIT_10s0003g01000、VIT_13s0019g05250)及相应的18个关键转录因子。(4)qRT-PCR验证及相关性分析表明,FH基因VIT_13s0019g03330与其转录因子VIT_01s0011g06200、VIT_08s0056g01230以及MDH基因VIT_13s0019g05250与其转录因子VIT_06s0004g04960、VIT_10s0003g02070的表达水平与苹果酸的积累存在显
- 袁春春郎思睿路国栋林哲张虹张虹
- 关键词：酿酒葡萄赤霞珠苹果酸转录因子
- 一种利用马蔺DFR基因获得基因转化植物的方法
- 本发明提供了一种表达马蔺DFR基因的重组表达载体，以及包含该重组表达载体的宿主细胞、基因转化的植物细胞和植株，以及它们在培育合成蓝色花青素的植物方面的应用，尤其是培育新花色或新果色的植物品种方面的应用，特别是培育蓝色花卉...
- 张虹陈任虎娟路国栋刘慧
- 利用流式细胞仪鉴定植物倍性的研讨被引量：3
- 2020年
- 为建立一套利用流式细胞仪快速鉴定多种植物倍性的通用型方法,以黑果枸杞(L.ruthenicum)和甜叶菊(S.rebaudiana)不同倍性植株为实验材料,通过比较不同细胞裂解液解离效果、染色液作用效果、植株培养条件,应用流式细胞仪对不同倍性植株细胞核DNA进行检测。结果表明,使用Nuclei Extraction Buffer,DAPI染色液,处理两种植物试管苗,获得的细胞裂解液经BD流式细胞仪检测,样本细胞核DNA成峰集中,细胞核及细胞碎片少。利用此方法进行倍性鉴定,具有简便、快捷、高效的特点,可在短时间内处理大量样本,且实验重复性好,也为利用流式细胞仪鉴定其他物种的不同倍性植物样品提供了依据。
- 张虹路国栋路国栋林哲赵帅陈任
- 关键词：流式细胞仪倍性鉴定
- 一种农杆菌介导的甜叶菊遗传转化方法
- 本发明提供了一种农杆菌介导的甜叶菊遗传转化方法，该方法采用了特定配方的筛选培养基，不仅能够适用于甜叶菊转基因抗性愈伤组织的抗性筛选和诱导培养，还能够适用于后续的抗性愈伤组织分化出芽的过程，获得了较佳的抗性愈伤组织出芽率，...
- 张虹陈任虎娟路国栋刘慧
- 利用微型离心管提取分析天然橡胶主要成分聚异戊二烯方法的建立
- 2023年
- 为建立一种快速、准确的从少量样品中提取、分析天然橡胶主要成分聚异戊二烯含量的方法,在已采用索氏提取器提取的基础上,进一步探讨采用2 mL微型离心管的方法提取分析材料(0.5 g以下)中的聚异戊二烯含量。从分别利用微型离心管与索氏提取器提取4种样品分析材料,即顺式聚异戊二烯标准品、多汁乳菇子实体、杠柳枝条、杜仲果翅的提取得率和分子量分布看,2种提取方法的差别不大,再通过每次提取时利用顺式聚异戊二烯标准品建立标准曲线校正,采用2 mL微型离心管微量提取分析测定植物植株、组织材料或真菌子实体、菌丝体中的顺式或反式-1、4-聚异戊二烯橡胶含量的方法可行、结果可信。
- 张君雍婧姣路国栋路国栋张虹郎思睿张虹
- 关键词：天然橡胶聚异戊二烯提取得率分子量分布
- 甜菊醇糖苷生物合成关键基因的导入和鉴定分析
- 2023年
- 甜叶菊(Stevia rebaudiana Bertoni)生产的甜菊醇糖苷因具有高甜度、低热能、不参与人体内代谢兼具保健功能等特点,被誉为最有发展前途的新糖源。从甜叶菊叶片克隆了甜菊醇糖苷生物合成途径中的关键基因SrUGT85C2、SrUGT91D2m和SrUGT76G1,构建植物基因过量表达载体,以单独或组合的形式将这些基因导入到甜叶菊中,获得转基因植株。与野生型对照植株相比,单独导入SrUGT85C2的转基因植株中甜菊醇单糖苷含量提高,总糖苷、莱包迪苷A含量及占比没有明显变化;单独导入SrUGT91D2m的转基因植株中甜菊醇单糖苷含量显著降低,而甜菊醇双糖苷含量显著增加;单独导入SrUGT76G1的转基因植株中,总糖苷含量显著提高,莱包迪苷A含量达到10%以上,比对照提高了2倍,而甜菊糖苷含量减少了一半。3个基因组合同时导入的转基因甜叶菊植株与单独导入SrUGT76G1的转基因甜叶菊植株类似,其总糖苷、莱包迪苷A含量及其占比均显著提高。这些结果为以后通过分子生物学技术来调控甜菊醇糖苷生物合成关键基因的表达,培育莱包迪苷A含量高的高品质甜叶菊新品系提供了理论依据和技术方法。
- 张君张虹张虹路国栋张芮郎思睿路国栋
- 关键词：甜叶菊基因转化
- 酿酒葡萄赤霞珠果实苹果酸生物合成关键基因的功能鉴定被引量：3
- 2020年
- 针对近些年来葡萄果实有机酸含量受全球气候变暖影响而严重不足,酿造的葡萄酒风味和口感欠佳等问题,以宁夏地区栽培面积最多的赤霞珠(Cabernet Sauvignon)酿酒葡萄品种为材料,从果实形成至成熟4个生长时期(每个时期2次采样)的果实中提取RNA进行转录组测序,同时对同一时期的果实中与苹果酸生物合成关系密切的8种有机酸进行测定,通过基因表达量与有机酸含量的关联分析,筛选出影响赤霞珠果实中苹果酸生物合成途径的8种关键基因,并对其进行分离克隆、原核细胞表达和体外酶活性检测,从而确定各个关键基因及其同源基因的序列变化和功能差异,为今后酿酒葡萄有机酸含量的遗传调控、优质酿酒葡萄的培育提供帮助。
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- 关键词：酿酒葡萄赤霞珠基因功能
- 杠柳顺式-1,4-聚异戊二烯生物合成关键基因PsIPPI和PsCPT的克隆及功能分析被引量：2
- 2022年
- 天然橡胶是事关国计民生和国家安全的重要战略物资,其主要成分为顺式-1,4-聚异戊二烯,主要产自巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)。由于受到该树种热带生长特性限制,我国适合种植的区域有限,产能严重不足,开发新的天然橡胶资源已成为迫切需要解决的问题。杠柳(Periploca sepium)乳管分泌的乳汁含有顺式-1,4-聚异戊二烯,非常适用于我国作为天然橡胶生产的替代植物。通过对杠柳树枝(包括皮、枝、叶)进行转录组测序,成功克隆了两个对顺式-1,4-聚异戊二烯生物合成起关键作用的基因PsIPPI和PsCPT,即异戊烯基二磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase, IPPI)和顺式-异戊二烯基转移酶(cis-prenyltransferase, CPT)基因;以杠柳茎段为外植体,通过农杆菌介导的转化,将这两个基因以单独或组合形式在杠柳植物体内过表达,结果发现其基因相对表达量最高可增加200倍以上,但单独过表达PsIPPI的转基因植株,其聚异戊二烯含量和分子量分布没有明显变化;单独过表达PsCPT的转基因植株,其聚异戊二烯含量增加了约5倍,且高分子部分的比例提升了约1.6倍;同时过表达PsIPPI和PsCPT的转基因植株,其聚异戊二烯含量增加了5~6倍,高分子部分的比例提升了约2倍。本研究对杠柳顺式-1,4-聚异戊二烯生物合成关键基因的功能做了初步分析,证实利用部分关键基因的过表达可以提高杠柳的天然橡胶产量和高分子量的比例。随着对杠柳有关顺式-1,4-聚异戊二烯生物合成机制、编码各种酶系的关键基因的不断挖掘,可望将杠柳培育成为生产天然橡胶的替代植物,为解决我国天然橡胶贫乏的工业瓶颈和丰富橡胶资源提供技术支撑。
- 路国栋刘祥刘祥张君张虹郎思睿张虹
- 关键词：杠柳聚异戊二烯
