王玲
- 作品数:3 被引量:15H指数:2
- 供职机构:四川农业大学园艺学院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 利用VIGS技术研究草莓FaMYB5的功能被引量:12
- 2017年
- 以‘丰香’草莓(Fragaria×ananassa‘Toyonaka’)为材料,采用病毒诱导的基因沉默技术(Virus-induced Gene Silencing,VIGS)对果实中类黄酮化合物代谢相关转录因子基因FaMYB5进行沉默,并对沉默后果实类黄酮化合物代谢途径相关的结构基因和其他转录因子基因表达量进行半定量RT-PCR及RT-qPCR分析。并分别采用HPLC和香草醛—硫酸比色法对沉默后果实中花青素苷和原花青素含量进行测定。成功构建了pTRV2-FaMYB5的VIGS沉默载体,并建立了草莓果实VIGS沉默体系,FaMYB5基因沉默效率达60%;FaMYB5基因沉默处理与阴性对照相比,草莓类黄酮化合物代谢途径相关结构基因和转录因子表达量均发生改变,其中FaMYB9、FaLAR、FaDFR、FaANR表达量显著增加,从而导致果实中原花青素含量增加;而花青素合成相关基因FaANS的表达量减少1/2,FaMYB10表达量变化并不显著。此外,bHLH家族的转录因子基因FabHLH3和FabHLH3Δ随着FaMYB5的沉默表达量显著下降,而FaGL3显著升高。结果进一步证明FaMYB5转录因子对草莓类黄酮化合物代谢途径中的原花青素合成途径起负调控作用。
- 王玲汤浩茹王小蓉陈清江雷雨林源秀
- 关键词:草莓VIGS
- 草莓MYB类转录因子FaMYB5基因的克隆与表达分析被引量:3
- 2016年
- 以丰香草莓(Fragaria×ananassa cv.Toyonaka)为试材,通过同源克隆技术获得FaMYB5基因全长编码序列,运用生物学软件对该序列进行相关生物信息学分析,同时采用实时荧光定量PCR方法对FaMYB5基因在果实不同发育阶段的表达模式进行研究。FaMYB5基因的cDNA全长为822 bp,编码273个氨基酸,蛋白质分子量为29.159 ku,等电点为5.709,与森林草莓的Fv MYB5同源性达95.7%。实时荧光定量PCR分析显示,随着果实发育成熟,FaMYB5基因的表达逐渐上升。在果实的小绿期(SG),FaMYB5基因的表达量最低。但是在白果期(WT)出现1个降低的峰值,其表达量略高于小绿期,草莓果实开始转红时其表达量又逐渐上升,在果实全红期(FR)达到最大。结果获得了丰香草莓MYB类转录因子FaMYB5基因的cDNA全长,其表达存在差异。
- 冯琛王玲汤浩茹肖婕
- 关键词:草莓转录因子基因克隆
- VIGS介导的草莓FaMYB5功能分析
- FaMYB5是从草莓果实中分离鉴定的新的R3类MYB转录因子成员,研究已证明其可能参加了草莓类黄酮化合物合成代谢的负调控,但具体作用机理以及该因子与已知的其他类黄酮调控因子之间的相互关系仍缺乏研究。深入分析该负调控因子与...
- 王玲江雷雨林源秀陈清王小蓉汤浩茹
- 关键词:草莓VIGS负调控