马永华
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 环孢素A对肝细胞中磷酸化AKT蛋白表达的影响被引量：2
- 2016年
- 目的观察环孢素A(cyclosporin A,Cs A)对肝细胞磷酸化AKT(phosphorylated AKT,P-AKT)表达的影响,探讨Cs A导致胰岛素抵抗的机制。方法本研究分两部分:(1)体外研究:用不同浓度Cs A(0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L)作用于人肝细胞(HL7702细胞)48 h,用Western blot方法检测P-AKT蛋白的表达水平。(2)体内研究(动物实验):建立环孢素A诱发的大鼠糖尿病模型,用免疫组化方法分析P-AKT蛋白在糖尿病大鼠肝细胞中的表达水平。结果 (1)各浓度(0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L)Cs A组与对照组相比,HL7702肝细胞中的PAKT蛋白的表达呈现逐渐下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01、P<0.01)。(2)环孢素A引起大鼠血糖升高,在服用环孢素A的第5个月,大鼠平均血糖为9.28 mmol/L,说明环孢素A诱导的糖尿病大鼠模型建立成功,糖尿病大鼠肝细胞中P-AKT蛋白的表达明显低于服药前和正常对照组(P<0.05)。结论服用治疗剂量的环孢素A导致大鼠血糖升高,环孢素A抑制大鼠肝细胞中P-AKT的表达,环孢素A抑制人肝细胞HL7702中P-AKT的表达,提示影响PI3K/AKT信号通路可能是环孢素A导致胰岛素抵抗的机制之一。
- 杨柳刘晓军王宏宇曹永马永华徐春
- 关键词：环孢素A移植后糖尿病AKTP-AKT
- FK506对人肝HL-7702细胞中Akt表达的影响被引量：4
- 2017年
- 目的观察他克莫司(FK506)对人肝HL-7702细胞系胰岛素信号通路关键位点Akt表达的影响,以探究FK506诱导血糖升高的分子机制。方法选用处于对数生长期的人肝HL-7702细胞系,分为3个处理组和1个对照组。处理组分别用不同浓度的FK506(0.1、1、5 mg/L)处理24 h,对照组用等量培养基培养24 h。采用蛋白质免疫印迹法(western blot)检测各组Akt蛋白的表达量及其磷酸化水平,同时采用蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)活性测定试剂盒测定PP2A活性。结果各组Akt的表达水平及磷酸化位点p-Akt(Ser473)水平无明显变化,另一磷酸化位点p-Akt(Thr308)水平(F=5.657,P=0.022)差异有统计学意义;当FK506浓度为5 mg/L时与对照组相比显著升高,差异有统计学意义(P=0.037),随着FK506浓度的升高,PP2A活性有一定程度升高,但差异无统计学意义(F=0.857,P=0.501)。结论 FK506引起HL-7702细胞中Akt磷酸化水平升高,这一变化可能与PP2A无关。
- 李浩言张雪梅安军张韶峰王宏宇高飞马永华徐春
- 关键词：AKT他克莫司胰岛素抵抗
- 他克莫司对大鼠肝脏蛋白磷酸酶2A表达的影响
- 2017年
- 目的通过建立他克莫司(FK-506)诱导的糖尿病大鼠模型,探讨FK-506对大鼠肝脏蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)表达的影响。方法将40只雄性SD大鼠(体重80~100 g/只)随机分成FK-506组和对照组,每组20只。FK-506组给予FK-506灌胃,剂量为4 mg/(kg·d);对照组给予等量饮用水。每月测量大鼠的空腹血糖及FK-506血药浓度,连续测量5个月。5个月后空腹状态下乙醚麻醉处死大鼠,心尖穿刺取血测量大鼠空腹血清胰岛素水平,并计算稳态模式评估胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-insulin resistance index,HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(insulin secretion index,ISI),用免疫组化方法检测大鼠肝脏组织中PP2A的表达。使用SPSS 17.0软件对数据进行统计分析。结果给药3个月后FK-506组血糖平均浓度为(8.07±0.84)mmol/L,有80%(16/20)的大鼠血糖浓度大于7 mmol/L,高于对照组的(5.27±0.38)mmol/L;5个月后FK-506组所有大鼠血糖浓度大于7 mmol/L。FK-506组大鼠的HOMA-IR高于对照组(t=47.80,P<0.05),ISI低于对照组(t=37.70,P<0.05)。FK-506组的PP2A在肝组织细胞浆内的表达水平高于对照组(χ2=19.80,P<0.05)。结论 FK-506可成功诱导大鼠糖尿病模型。在FK-506诱导的糖尿病大鼠肝脏中,PP2A表达明显增高,这可能是FK-506升糖的作用机制之一。
- 王得恩陈充抒王宏宇马永华徐春
- 关键词：他克莫司蛋白磷酸酶2A胰岛素抵抗
