方征宇
- 作品数：12 被引量：28H指数：4
- 供职机构：深圳北京大学香港科技大学医学中心更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金深圳市基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种与类风湿性关节炎相关的环状RNA标志物及其应用
- 本发明属于生物医药技术领域，具体公开了一种环状RNA标志物在制备类风湿性关节炎检测试剂盒中的应用，环状RNA标志物为hsa_circ_0000137，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；滑膜组织和滑膜液中的hsa_c...
- 方征宇王庆文尹为华韦伟余光银韩馨乐林素雯吕姝妍
- 与老年痴呆症发病相关的细胞周期依赖性激酶5的单核苷酸多态性位点
- 本发明公开了与老年痴呆症发病相关的细胞周期依赖性激酶5的单核苷酸多态性位点。本发明所述基因位点是汉族人群中细胞周期依赖性激酶5的rs2069452和rs2069459。本发明通过聚合酶链式反应等方法检测47例患者及51例...
- 叶玉如万峻熊轶陈向军方征宇张巨峰关明于波
- 文献传递
- 白色念珠菌在动物感染模型中的研究进展被引量：5
- 2020年
- 白色念珠菌在临床上是一种重要的人体致病真菌,通常存在于人口腔、下呼吸道、肠道及阴道,一般可与宿主共生,不引起疾病;当宿主免疫功能异常或正常菌群失调时发生急性、亚急性或慢性感染,是最常见的真菌病之一。白色念珠菌可引起全身系统性感染、粘膜皮肤感染(包括口、咽和食道的口咽念珠菌病、念珠菌性食管炎、皮肤念珠菌病、阴道念珠菌病)、下呼吸道感染以及泌尿系统感染等。建立相关疾病的动物模型在研究宿主感染的免疫应答和真菌毒力机制、药物研发等方面扮演着重要作用,为临床治疗策略选择及基础研究提供了科学依据。
- 韩馨乐戴嘉婧郑雅丹钟福波林哲广江淑祺尹为华方征宇
- 关键词：白色念珠菌动物模型真菌感染
- 一种与类风湿性关节炎相关的环状RNA标志物及其应用
- 本发明属于生物医药技术领域，具体公开了一种环状RNA标志物在制备类风湿性关节炎检测试剂盒中的应用，环状RNA标志物为hsa_circ_0000137，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；滑膜组织和滑膜液中的hsa_c...
- 方征宇王庆文尹为华韦伟余光银韩馨乐林素雯吕姝妍
- 文献传递
- circZfp609在小鼠成肌细胞系C2C12细胞中表达及意义
- 2021年
- 目的探讨circZfp609在小鼠成肌细胞系C2C12细胞增殖和分化过程中的作用及意义。方法采用核质分离实验观察增殖期与分化期C2C12细胞circZfp609核质分布情况;增殖期与分化期C2C12细胞分别分为circZfp609敲低组、Zfp609敲低组和对照组,分别转染特异性敲低circZfp609的siRNA、特异性敲低Zfp609的siRNA和对照siRNA。采用实时荧光定量PCR法检测增殖期C2C12细胞circZfp609及Zfp609 mRNA相对表达量,采用CCK8法检测增殖期C2C12细胞的细胞增殖率;采用免疫荧光法观察分化期C2C12细胞肌细胞生成素(myogenin,MYOG)和肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)蛋白表达情况,采用Western blot法检测分化期C2C12细胞MYOG、MHC蛋白相对表达量。结果增殖期C2C12细胞质中circZfp609占52.75%,分化期C2C12细胞质中circZfp609占71.38%。增殖期C2C12细胞circZfp609敲低组circZfp609相对表达量(0.124±0.008)低于对照组(1.000±0.064)(t=59.262,P<0.001),Zfp609 mRNA相对表达量(1.269±0.173)与对照组(1.000±0.052)比较差异无统计学意义(t=2.533,P=0.131);Zfp609敲低组circZfp609相对表达量(1.063±0.138)与对照组(1.000±0.159)比较差异无统计学意义(t=0.931,P=0.442),Zfp609 mRNA相对表达量(0.580±0.062)低于对照组(1.000±0.121)(t=12.936,P=0.007)。增殖期C2C12细胞circZfp609敲低组培养第3、4天细胞增殖率[(62.93±14.35)%、(49.96±8.14)%]均低于对照组[(100.00±11.63)%、(100.00±16.76)%](t=11.431,P=0.002;t=8.245,P=0.003);Zfp609敲低组培养第2、3天细胞增殖率[(139.06±7.58)%、(157.12±13.50)%]均高于对照组[(100.00±9.25)%、(100.00±23.68)%](t=3.324,P=0.037;t=6.062,P=0.009),培养第4天细胞增殖率[(109.73±17.94)%]与对照组[(100.00±14.59)%]比较差异无统计学意义(t=0.834,P=0.465)。在C2C12细胞分化期,与对照组比较,circZfp609敲低组细胞MYOG、MHC蛋白表达增强,细胞纤维长度增长,极化明显,出现细胞融合;Zfp609敲低组细胞MYOG、MHC蛋白表达呈不同程度降低,细胞纤维�
- 黎满慧王海霞张伟方征宇
- 关键词：C2C12细胞增殖分化小鼠
- 人黑色素瘤细胞株顺铂耐药与DNA损伤修复基因及肿瘤干细胞相关基因的相关性被引量：6
- 2017年
- 目的探讨DNA损伤修复基因、肿瘤干细胞相关基因与人黑色素瘤(malignant melanoma,MM)细胞株顺铂(cisplatin,DDP)耐药的相关性。方法对数生长期人MM A375、M8、SK-Mel-19细胞株为对照组,采用浓度梯度递增法构建DDP耐药株(A375/DDP、M8/DDP和SK-Mel-19/DDP)为耐药组;采用MTS法检测2组MM细胞株DDP敏感性;采用实时荧光定量PCR法检测2组DNA损伤修复基因、肿瘤干细胞相关基因表达水平。结果A375/DDP、M8/DDP、SK-Mel-19/DDP细胞株耐药指数分别为4.33、4.08和3.14;耐药组M8/DDP细胞株ATM、ATR、BRCA1、BRCA2、ERCC5、MRE11A、POLD3、RAD50、XPA、XRCC4DNA损伤修复基因表达水平均高于对照组M8细胞株(P<0.05),A375与A375/DDP细胞株、SK-Mel-19与SK-Mel-19/DDP细胞株ATM等DNA损伤修复基因表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);耐药组A375/DDP细胞株EPCAM、NANOG、POU5F1、SOX2、TWIST1肿瘤干细胞相关基因表达水平均高于对照组A375细胞株(P<0.05);耐药组SK-Mel-19/DDP细胞株ALDH1A、NANOG、SOX2、TWIST1肿瘤干细胞相关基因表达水平均高于对照组SK-Mel-19细胞株(P<0.05);耐药组M8/DDP细胞株ALDH1A1、CD44、EPCAM、NANOG、POU5F1、PROM1、SOX2、TWIST1肿瘤干细胞相关基因表达水平与对照组M8细胞株比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论人MM A375、M8、SK-Mel-19细胞株均可产生DDP耐药,其机制可能与DNA损伤修复基因和肿瘤干细胞相关基因高表达有关。
- 李玉霞刘雅菁方征宇
- 关键词：黑色素瘤顺铂耐药DNA损伤修复基因
- 盐霉素对人黑色素瘤M21细胞增殖及自噬流的影响被引量：3
- 2018年
- 目的探讨盐霉素对人黑色素瘤M21细胞增殖及自噬流的影响。方法采用MTS法检测细胞生存率,计算半数抑制浓度IC_(50)值。观察给药后细胞形态学变化。采用流式细胞仪检测细胞的凋亡率。Western blot检测给药后M21细胞内自噬相关蛋白LC3B表达情况。透射电镜下观察给药后M21细胞内是否有自噬小体产生。Western blot和免疫荧光检测p62蛋白水平和定位变化。结果盐霉素对人黑色素瘤M21细胞具有明显的增殖抑制作用,IC_(50)值为(1.38±0.18)μM。给药后细胞增殖速度减慢,同时细胞中出现明显的空泡。盐霉素不能促进细胞发生凋亡,但能使细胞内LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ的比值逐渐增加。在透射电镜下观察到自噬小体的增多与堆积。盐霉素作用后p62蛋白水平些许升高,逐渐在胞质内聚集成团状,表明自噬流被抑制。结论盐霉素能够抑制人黑色素瘤M21细胞的增殖,其机制可能与诱导自噬小体增多、抑制自噬流有关。
- 刘雅菁刘国钰王树滨方征宇
- 关键词：黑色素瘤盐霉素自噬
- 深圳市医学科技计划项目立项结题情况及发展策略
- 2024年
- 目的总结分析医学科技计划项目开展的现状、存在的亮点及问题,提出相应的发展策略建议。方法本研究采用横断面研究设计,分析2016—2021年深圳市立项的医学科技计划1880项基本情况以及2016—2017年已结题558个项目的绩效产出数据。结果2016—2021年度医学科技计划项目共立项资助1880项,共依托97家单位,总资助金额累计10亿,增长百分比93.9%。基础研究专项占资助项目总数93.4%,资助总金额6.1亿,占总项目资助金额60.3%。医学科技计划中医疗卫生机构类项目总计1692项,其中基层机构及区级医疗机构(未定级、一级、二级)资助力度较小,立项比例为7.2%,资助金额仅占医疗卫生机构类总金额3.0%。2016—2017完成结题项目558项,绩效指标包括发表文章、培养人才、科技奖以及专利申请数量,总计培养人才762名,申请专利448项,专利授权184项,发表论文2061篇。结论医学科技计划项目加强规划临床研究专项,建立多层级临床研究中心体系,完善科技项目管理各个环节机制、分层分类管理,强化科技成果转化应用四方面的支撑,逐步转向临床研究新方向。
- 张玥谢杨晓虹卿艳维熊轶方征宇肖平吉萍
- 关键词：项目管理
- 北京大学临床研究所“三名工程”团队扶持深圳临床研究水平和生物医学伦理体系协同发展的现状与思考被引量：1
- 2020年
- 高质量的临床研究是推动生物医药技术和医疗水平发展、提升公众健康,建设“健康中国”的基础。深圳市人口基数大,经济发展水平较高,但医疗卫生水平一直在一线城市中处于相对落后的位置。深圳市临床研究起步较晚,与其他一线城市相比较在研的科研项目数量少、水平相对有限,多中心项目也往往只是以参与为主。但深圳市人口众多,有着独特的环境和人口特点(如平均年龄偏低、工作强度和精神压力较大、气候炎热湿润等),因此疾病谱存在着鲜明的地方特色。如何充分利用地方丰富的临床医疗资源,将其转变成临床研究资源,再通过临床研究提高医疗服务能力,是深圳地方卫生部门重点探索的方向。
- 方征宇李箫吉萍肖平武阳丰周丽萍方伟岗
- 羟氯喹通过核因子-κB信号通路抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞白细胞介素-6的表达被引量：7
- 2019年
- 目的探讨羟氯喹(HCQ)对活化的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)炎症因子白细胞介素(IL)-6表达的影响及分子机制研究。方法 RA-FLS细胞系MH7A细胞用10 ng/ml的肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导活化后,采用不同浓度的HCQ(2.5,5,10μmol/L)处理,使用MTS的方法检测细胞活力;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测培养液中IL-6的浓度,采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测IL-6 mRNA的表达水平。分子机制研究方面,采用蛋白质印迹法检测核因子(NF)-κB信号通路关键分子p-p65,p65蛋白的表达情况,qPCR检测NF-κB抑制剂对IL-6mRNA表达的影响。结果与空白对照组相比,TNF-α刺激MH7A后IL-6的分泌和mRNA表达显著升高(P<0.01),且p65磷酸化水平明显升高。用不同浓度的HCQ处理(2.5,5,10μmol/L)后,IL-6的分泌和mRNA表达均下降,呈浓度依赖性;同时p65蛋白的磷酸化水平明显降低,同样呈浓度依赖性。提前给予NF-κB激动剂佛波醇酯(PMA)预处理可逆转HCQ对MH7A细胞IL-6表达的抑制作用。结论 HCQ主要通过NF-κB信号通路抑制TNF-α诱导的MH7A细胞IL-6分泌和mRNA表达。
- 刘国钰郑雅丹戴嘉婧王庆文方征宇
- 关键词：羟氯喹成纤维样滑膜细胞白细胞介素6
