李春敏
- 作品数：7 被引量：26H指数：4
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CCl_4诱导肝纤维化小鼠模型中肝脏巨噬细胞及淋巴细胞亚群变化的初步分析被引量：2
- 2019年
- 目的研究CCl_4诱导肝纤维化小鼠模型中肝脏免疫细胞包括巨噬细胞、淋巴细胞亚群的变化。方法 C57BL/6小鼠给予CCl_4腹腔注射建立肝纤维化模型,通过HE和Masson染色评价小鼠肝损伤及纤维化程度。采集小鼠外周血清,检测肝功能指标和血脂水平。取小鼠肝脏制备单个核细胞悬液,用多色流式细胞术检测肝脏免疫细胞亚群的分布。结果实验组小鼠ALT、AST明显高于对照组,TG、LDL-C显著性升高,平均病理评分达到F3级。实验组小鼠库普弗细胞比例(13.33±1.91)%显著高于对照组(8.17±2.00)%,其中以CD11c+标记M1型库普弗细胞比例明显升高,而以CD206+标记M2型库普弗细胞无显著变化。实验组小鼠淋巴细胞中T细胞比例(20.17±4.07)%显著低于对照组(36.00±4.61)%;NKT细胞比例(8.71±1.37)%较对照组(23.41±3.38)%明显降低;而两组间NK细胞和B细胞比例均无明显变化。结论 CCl_4诱导小鼠肝纤维化模型中,肝脏内库普弗细胞的明显增加是以具有促炎效应的M1型巨噬细胞为主,而NKT细胞和T细胞比例则明显减少。M1型巨噬细胞对肝纤维化发展的作用需进一步深入探讨。
- 唐颖悦李静雷晓红李春敏曾民德茅益民
- 关键词：肝纤维化巨噬细胞
- 对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤和肝衰竭模型中线粒体基因组转录改变被引量：7
- 2016年
- 目的通过探索对乙酰氨基酚（APAP）诱导的急性肝损伤和急性肝衰竭模型中线粒体基因组转录水平的改变与疾病进展之间的关联,为AILI预后的预测提供新的生物标记。方法将90只小鼠随机分为3组：对照组、APAP导致的DILI组（AILI,300 mg/kg）和APAP导致的急性肝衰竭组（AILF,750 mg/kg）。禁食16 h后,腹腔注射体积相近的0.9%氯化钠溶液和不同剂量APAP,在0、1、3、6、12 h等不同时间点时,每组随机选取6只小鼠处死,留取小鼠的血浆和肝脏组织。检测每只小鼠ALT、AST、ROS变化水平;提取肝脏总RNA,采用RT-PCR技术检测线粒体基因组基因的转录水平。结果与对照组相比,腹腔注射APAP后,两组均可见转氨酶明显升高,AILI组在6-12 h时ALT达到峰值（5 000~10 000 U/L）;AILF组12 h时ALT水平超过10 000 U/L,明显高于AILI组（P〈0.05）。APAP处理后,两组小鼠均可见典型的3区微泡性脂肪变,AILF组可见典型的急性肝衰竭的大块性坏死。与对照组相比,AILI和AILF组肝脏中ROS从1 h开始,各时间点均可见显著升高,且1 h时,AILF组ROS的生成量约为AILI组的2.5倍（P〈0.05）。AILI组COX1在6 h时显著升高（P〈0.05）,而对照组和AILF组均未见显著升高。与对照组相比,3 h时,AILI组和AILF组可见CYTB、COX2和ATP8显著降低（P〈0.05）;6 h时,AILI组和AILF组COX1、ND1、ND5和ATP8转录水平显著降低（P〈0.05）;12 h时,AILI组和AILF组中NADH各亚基均可见显著降低（P〈0.05）。AILI组与AILF组相比,6 h时,AILF组中ATP6的转录水平显著低于AILI组和对照组（P〈0.05）;12 h时,AILF组的肝脏中CYTB、COX2、ATP8以及NADH的2、3、5和6亚基的转录水平显著低于AILI组（P〈0.05）。结论线粒体基因组除COX1在AILI组明显上调,其他存在明显改变的基因均出现降低趋势,且AILF组变化更明显。线粒体基因组转录水平改变对于预测AILI预后有潜在价值。
- 明雅南李春敏张静怡刘晓琳茅益民
- 关键词：对乙酰氨基酚肝损伤肝衰竭
- 非酒精性脂肪性肝病对肠道炎症及通透性的影响被引量：1
- 2017年
- 目的通过高脂饮食建立非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠模型,观察NAFLD大鼠是否也同时伴随存在肠道炎症,并探讨NAFLD对肠道通透性的影响。方法 24只雄性大鼠以1∶1比例随机接受标准饲料和高脂饲料喂食18周,分别建立对照组和NAFLD大鼠模型。通过大鼠肝脏病理切片HE染色和油红O染色验证模型的成立,根据大鼠结肠病理切片HE染色观察是否存在肠道炎症进行进一步分组分析。使用酶联免疫吸附测定血浆二胺氧化酶、D-乳酸水平和内毒素水平,检测肠道通透性改变情况。结果与对照组相比,12只NAFLD大鼠肝脏均呈大泡和小泡性脂肪变以及气球样变,其中发现有7只大鼠的肠道存在轻度炎症细胞浸润,组织学符合肠道炎症改变;NAFLD组中另5只大鼠未见组织学上肠道炎症改变;而在对照组中未见任何肠道炎症改变。与对照组相比,NAFLD大鼠血浆中二胺氧化酶和D-乳酸水平显著升高(P<0.05)。其中,NAFLD伴肠道炎症组大鼠的D-乳酸水平较NAFLD不伴肠道炎症组显著升高(P<0.05)。NAFLD伴肠道炎症组大鼠血浆中LBP水平明显高于对照组和NAFLD不伴肠道炎症组(均P<0.05)。结论 NAFLD可增加肠道炎症发生的风险,NAFLD导致肠道炎症时肠道通透性显著增加。
- 张静怡李春敏唐颖悦明雅南刘晓琳曾民德茅益民
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病肠道炎症通透性
- 对乙酰氨基酚诱导急性肝衰竭小鼠动物模型的建立被引量：4
- 2016年
- 目的通过腹腔注射高剂量对乙酰氨基酚(APAP)构建稳定的用于研究药物导致急性肝衰竭的动物模型。方法本研究首先进行生存率实验,取60只C57BL/6小鼠随机分为4组,每组15只,分别腹腔注射0.9%氯化钠溶液及不同剂量(300 mg/kg、500 mg/kg、750 mg/kg)APAP后,观察不同组别72 h内小鼠的精神、活动状态和生存率。根据生存率分析结果,另选取180只C57BL/6小鼠,随机分为3组,分别腹腔注射0.9%氯化钠溶液、低剂量(300 mg/kg)和高剂量(750 mg/kg)APAP,每组分别在0、1、3、6、12 h等时间点随机选取12只小鼠,留取血清和肝组织,验证小鼠的生化和组织学是否符合急性肝衰竭的表现。结果生存率实验结果显示,0.9%氯化钠溶液组、300 mg/kg以及500 mg/kg组72 h内无小鼠死亡;750 mg/kg组72 h死亡率为100%,推测750 mg/kg组可能为急性肝衰竭导致的死亡。生化和组织学验证实验结果发现,对照组各时间点转氨酶均无明显升高;APAP处理的两组动物模型ALT3 h时开始升高,6 h时低剂量组ALT升高达到峰值[(6766.5±2001.27)IU/L],而高剂量组ALT于12 h达到(11707.58±1882.45)U/L(P<0.01)。从HE病理染色来看,0.9%氯化钠溶液组各时间点肝脏形态结构正常。APAP处理的两组动物模型的肝组织学,主要表现为以中央静脉为中心的肝细胞变性坏死,并随时间延长,损伤范围逐渐扩大。低剂量组坏死周围界限清楚,汇管区肝细胞结构形态正常,12 h可见坏死区周围肝细胞增生表现。高剂量组表现为典型的急性大片状坏死特点,仅汇管区残存少量变性的肝细胞,细胞快速坏死后,留下空的网状纤维支架,肝窦淤积大量红细胞,未见肝细胞增生。HAI评分结果显示,高剂量组的HAI得分(7.33±1.5)显著高于低剂量组(5.25±2.26,P<0.05)。结论 C57BL/6小鼠腹腔注射高剂量APAP(750 mg/kg)后,生化和组织学改变与急性肝衰竭相似,本研究构建的动物模型对于探索APAP导致的AHF的发病及进�
- 明雅南李春敏张静怡刘晓琳茅益民
- 关键词：对乙酰氨基酚肝衰竭动物模型
- B细胞转录激活因子在非酒精性脂肪性肝炎中的表达及意义
- 2019年
- 目的通过构建蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饮食诱导非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠模型,研究B细胞转录激活因子(BATF)在肝脏中表达水平,并探讨其与NASH进展的关系。方法C57BL/6小鼠共14只,随机分为对照组7只,MCD组7只。对照组正常饮食,MCD组给予MCD饮食8周建立NASH模型,通过实时荧光定量PCR、免疫组化、流式细胞术检测肝脏巨噬细胞中BATF表达情况,探讨BATF表达水平与临床指标的关系。结果与对照组相比,MCD组肝脏BATF和促炎因子TNF-α和IL-1βmRNA表达水平明显上调,且MCD组的BATF集中表达于间质炎细胞的细胞核。MCD组小鼠F4/80+标记库普弗细胞比例显著高于对照组,其中以CD11c+标记M1型库普弗细胞为主。BATF表达水平与肝脏生化ALT、AST以及肝脏组织学NAS评分、脂肪变、小叶炎症、气球样变均呈显著正相关。结论BATF参与NASH进展,在预测NASH进展中可能具有潜在价值。
- 唐颖悦李静雷晓红李春敏曾民德茅益民
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎炎症因子生物标记物
- 非酒精性脂肪性肝病对肠道菌群多样性影响的初步研究被引量：7
- 2017年
- 目的通过高脂饮食建立非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠模型,观察NAFLD对肠道菌群多样性及群落组成的影响。方法建立NAFLD大鼠模型,通过大鼠肝脏病理切片HE染色验证NAFLD模型的成立,利用16sRNA测序技术对粪便肠道微生物进行检测分析,探讨NAFLD对肠道菌群多样性及群落组成的影响。结果肝脏组织学检查显示NAFLD组大鼠肝脏脂肪变明显,提示NAFLD动物模型建立成功。对照组Shannon多样性指数显著高于NAFLD组(P<0.05)。提示对照组的肠道微生物多样性显著丰富于NAFLD组。在门水平的变化情况提示,与对照组相比,NAFLD组中厚壁菌门和变形菌门的相对丰度较高(均P<0.05),而拟杆菌门的相对丰度则较低(P<0.05)。在科水平的变化情况提示,正常对照组以毛螺菌科、瘤胃球菌科、拟杆菌科_S24-7为优势菌科,而NAFLD组则以毛螺菌科、瘤胃球菌科为优势菌科。与对照组相比,NAFLD组中的毛螺菌科、拟杆菌科、脱硫弧菌科、氨基酸球菌科、Christensenellaceae菌科等相对含量较高(均P<0.05),而拟杆菌科_S24-7、普雷沃氏菌科、乳杆菌科等相对含量较低(均P<0.05)。结论 NAFLD可降低肠道菌群的多样性,并且显著改变肠道菌群的组成和含量。
- 张静怡唐颖悦李春敏明雅南唐洁婷曾民德茅益民
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病肠道菌群多样性
- 药物诱导的自身免疫性肝炎研究进展被引量：5
- 2016年
- 药物诱导的自身免疫性肝炎是由药物诱发的自身免疫反应所介导的肝损伤，由于与特发性自身免疫性肝炎的临床特征相似，临床上鉴别诊断往往非常困难。深入了解药物诱导的自身免疫性肝炎的发生情况、发病机制、所涉及的相关药物、风险因素、临床和组织学特点等，有助于更好地正确诊断和治疗本病。
- 李春敏张静怡唐颖悦茅益民
