李洁
- 作品数:6 被引量:16H指数:3
- 供职机构:常熟理工学院生物与食品工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金苏州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鸡生长激素的原核表达、纯化及活性研究被引量:2
- 2016年
- 鸡生长激素(cGH)是由脑垂体前叶合成并分泌的一种重要的多肽类激素,对于鸡的生长发育具有至关重要的调控作用。为实现cGH的原核表达,将其序列插入原核表达载体pET-30a(+)中,构建重组表达质粒pET-30a-cGH,并转化大肠杆菌BL21(DE3),挑选阳性菌落液体培养IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测显示,诱导产物在25 ku处含有与预期大小一致的蛋白条带;通过镍柱纯化,得到了较高纯度的cGH重组蛋白;用纯化得到的cGH重组蛋白处理鸡肝癌LMH细胞,检测其IGF-Ⅰ基因mRNA水平上调,证明所得到cGH蛋白具有生物学活性。研究结果为进一步研究cGH的结构、功能和生产应用奠定了基础。
- 何赛周欢庆陈昱希李洁郁建锋顾志良
- 关键词:生长激素原核表达蛋白纯化活性研究
- 鸡HNF1α蛋白在大肠杆菌中的表达及其纯化
- 1引言肝细胞核因子1α是肝脏富集转录因子家族成员之一,调控众多的肝脏特异性基因.HNF1α在肝脏中参与糖脂代谢的研究工作对于禽类的遗传育种、饲养繁殖等方面都有着重要意义.因此,本研究以大肠杆菌系统表达鸡HNF1α重组蛋白...
- 郁建锋张芸李洁张燕萍顾志良
- 关键词:重组蛋白包涵体纯化
- 鹅VNN1基因的克隆及组织表达分析被引量:4
- 2018年
- [目的]Vanin是一种泛酰巯基乙胺酶,在脂类代谢中发挥重要作用。本试验目的是扩增鹅Vanin基因亚型(VNN1)基因的c DNA序列,检测VNN1基因在鹅不同组织中m RNA水平的表达规律。[方法]以太湖鹅(Anser anser)肝脏总RNA为模板,采用RT-PCR和快速扩增c DNA末端(RACE)方法克隆鹅VNN1基因全长c DNA序列,并运用多种生物信息学软件对其进行分析,应用实时荧光定量PCR(q PCR)技术检测VNN1基因在不同组织的表达情况。[结果]序列分析表明:鹅VNN1基因(Gen Bank登录号:KY399733)c DNA全长1 924 bp,包含1 476 bp的开放阅读框,35 bp的5'UTR和417 bp的3'UTR,共编码491个氨基酸。经预测鹅VNN1基因编码的蛋白质由7 646个原子组成,相对分子质量为54 870.61,理论等电点为5.23,是不稳定蛋白。在线预测发现鹅与鸭的VNN1蛋白三级结构呈现高度相似的螺旋和折叠。序列分析表明,鹅与绿头鸭的VNN1基因核苷酸及氨基酸同源性较高。系统进化树分析表明,鹅与绿头鸭亲缘关系较近。q PCR结果表明,鹅VNN1基因在肝脏的表达量显著高于小肠、肾、脾和肺(P<0.01)。[结论]获得鹅VNN1基因的全长c DNA序列,该基因在肝脏中高表达。
- 李洁李洁郁建锋郁建锋姚文
- 泛酰巯基乙胺酶(Vanin-1)基因的研究进展被引量:6
- 2018年
- Vanin-1(VNN1)是泛酰巯基乙胺酶家族的一个成员,它是一类泛酰巯基乙胺的水解酶,能催化辅酶A(Co A)和酰基载体蛋白的异化途径中D-泛酰巯基乙胺的水解。Vanin有3种同源基因,分别是Vanin-1、Vanin-2和Vanin-3,其中Vanin-1是3种同源基因中研究最多的一种,它除了对底物的催化作用外,在糖脂代谢、免疫、肿瘤形成等生命过程中发挥十分重要的作用。本文就该基因的研究进展进行综述。
- 王中亮李洁姚文姚文
- 关键词:脂类代谢生物学功能