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鸡生长激素重组蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法: 本发明公开了一种鸡生长激素重组蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法，包括以下步骤：(1)从鸡垂体中提取总RNA并做反转录PCR得到其cDNA，以cDNA为模板，PCR得到鸡生长激素的基因片段；(2)利用毕赤酵母构建重组表达载...; 郁建锋顾志良何赛张艳萍金泽楷周欢庆姚丽娟; 文献传递

人Irisin重组蛋白的表达、分离纯化及活性鉴定: 人Irisin最新发现的一种新的肌肉因子，是蛋白水解酶剪切Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白5（fibronectin typeⅢ domain-containing protein5，FNDC5）之后所形成的可分泌的多肽片段。I...; 何赛; 关键词：重组蛋白表达毕赤酵母大肠杆菌分离纯化生物学活性; 文献传递

一种人重组Irisin蛋白及其制备方法和应用: 本发明公开了一种人Irisin重组蛋白的DNA序列。本发明还公开了一种人Irisin重组蛋白。本发明还公开了人Irisin重组蛋白的DNA序列的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌。本发明还公开一种转基因重组菌。本...; 顾志良何赛郁建锋金泽楷张燕萍; 文献传递

鸡生长激素的原核表达、纯化及活性研究被引量：2: 2016年; 鸡生长激素(cGH)是由脑垂体前叶合成并分泌的一种重要的多肽类激素,对于鸡的生长发育具有至关重要的调控作用。为实现cGH的原核表达,将其序列插入原核表达载体pET-30a(+)中,构建重组表达质粒pET-30a-cGH,并转化大肠杆菌BL21(DE3),挑选阳性菌落液体培养IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测显示,诱导产物在25 ku处含有与预期大小一致的蛋白条带;通过镍柱纯化,得到了较高纯度的cGH重组蛋白;用纯化得到的cGH重组蛋白处理鸡肝癌LMH细胞,检测其IGF-Ⅰ基因mRNA水平上调,证明所得到cGH蛋白具有生物学活性。研究结果为进一步研究cGH的结构、功能和生产应用奠定了基础。; 何赛周欢庆陈昱希李洁郁建锋顾志良; 关键词：生长激素原核表达蛋白纯化活性研究

一种人重组Irisin蛋白在毕赤酵母中的表达和纯化方法: 本发明公开了一种人Irisin重组蛋白的DNA序列。本发明还公开了一种人Irisin重组蛋白。本发明还公开了人Irisin重组蛋白的DNA序列的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌。本发明还公开一种转基因重组菌。本...; 顾志良何赛郁建锋韩曜平张燕萍; 文献传递

鸡生长激素在毕赤酵母中的表达、纯化和活性鉴定: 2016年; 生长激素(growth hormone,GH)与受体结合调节靶细胞的功能在机体的生长发育及代谢过程中起着极其重要的作用。为获得高纯度具有生物学活性的鸡生长激素(chicken growth hormone,cGH),试验将C端融合了6个组氨酸的cGH成熟片段基因序列克隆入毕赤酵母表达载体pPIC9K中,使用电转法将重组质粒导入毕赤酵母GS115,以1%的甲醇诱导重组菌(GS115-pPIC9K-cGH)96h,表达大小约为25ku的目的蛋白cGH,经Ni离子亲和层析和聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶层析获得95%以上的cGH重组蛋白。实时荧光定量检测结果表明,纯化的cGH重组蛋白可刺激鸡肝癌细胞LMH内的胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-like growth factorⅠ,IGF-Ⅰ)基因的mRNA表达上调,表明所发酵纯化的重组蛋白cGH具有生物学活性,这为其结构和功能的研究及生产应用奠定了基础。; 郁建锋何赛金泽楷周欢庆董小敏龚道清顾志良; 关键词：鸡生长激素毕赤酵母纯化生物学活性

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何赛