李雪明
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：北京农学院动物科学技术学院更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 伪狂犬病病毒野毒感染快速检测方法的比较
- 引言猪的伪狂犬病是由伪狂犬病病毒(PRV)引起的一种严重危害养猪业的传染病,接种PRV-gE基因缺失疫苗和淘汰PRV野毒感染猪是防控该病的主要手段.可用于PRV野毒感染的快速检测方法主要有抗体检测与PCR技术,活体检测组...
- 王俊李雪明周双海
- 伪狂犬病病毒gE基因荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用
- 为建立一种快速检测伪狂犬病病毒(PRV)野毒的荧光定量PCR方法.根据PRV-gE基因序列设计1对特异性引物,构建含有PRV-gE基因片段的重组质粒,以系列稀释后的重组质粒作为模板来建立定量检测PRV-gE的SYBR G...
- 于红欣李雪明杨红杰王俊周双海
- 关键词：伪狂犬病病毒GE基因荧光定量聚合酶链反应
- 文献传递
- 猪群伪狂犬病病毒野毒感染快速检测方法的比较
- 为比较猪群伪狂犬病病毒野毒感染的快速检测方法,53头5~6月龄肥育猪的血清和扁桃体,用ELISA方法检测血清PRV-gE抗体,用常规PCR方法和荧光定量PCR方法检测血清与扁桃体中的PRV-gE核酸,比较分析猪群PRV野...
- 周双海李雪明于红欣杨红杰王俊
- 关键词：伪狂犬病病毒野毒感染扁桃体血清
- 文献传递
- 伪狂犬病病毒野毒感染快速检测方法的比较
- 2016年
- 【目的】对猪群伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染的快速检测方法进行比较。【方法】采集肥育猪的血清和扁桃体,用ELISA方法检测血清中PRV-gE蛋白抗体,用常规PCR方法和荧光定量PCR方法检测血清与扁桃体中的PRV-gE基因,比较分析猪群PRV野毒感染情况。【结果】结果显示,荧光定量PCR方法对血清与扁桃体中的PRV-gE基因的检出率均高于常规PCR方法,gE基因在扁桃体中的检出率高于血清,而gE蛋白抗体检出率高于gE基因检出率。【结论】PRV-gE蛋白抗体检测敏感性高于gE基因检测,荧光定量PCR对gE基因的检测敏感性高于常规PCR,gE基因在扁桃体中的检测敏感性高于血清,为猪群PRV野毒感染快速检测方法的选用提供了试验依据。
- 杨红杰李雪明于红欣邹战明杨倩周双海
- 关键词：伪狂犬病病毒野毒感染血清扁桃体
- 伪狂犬病病毒gE基因荧光定量PCR检测方法的建立被引量：5
- 2015年
- 伪狂犬病病毒(PRV)野毒有gE基因,而其疫苗毒株无gE基因,这为检测有无PRV野毒感染提供参考。用PCR方法扩增PRV的gE基因片段,构建含有PRV gE基因片段的重组质粒。以系列稀释后的重组质粒作为模板,应用SYBR GreenⅠ来进行检测PRV gE基因的实时荧光定量PCR扩增。结果显示:在(6.9×107~6.9×101)copies/μL范围内,相邻扩增曲线之间间距均匀,所有产物具有单一整齐的熔解曲线峰,标准曲线具有优良的线性关系。该方法最低可准确检测69copies/μL的核酸模板,重复性试验的变异系数小于2%,对PRV-gE基因缺失疫苗毒株和常见猪源DNA病毒的检测结果均为阴性,对临床样品的检出率高于常规PCR方法。研究结果表明,建立了1种特异性强、灵敏度高、重复性好的检测PRV gE基因的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,可用于PRV野毒感染的定量检测。
- 李雪明于红欣杨红杰王俊王俊
- 关键词：伪狂犬病病毒GE基因荧光定量PCR
