许尧
- 作品数：5 被引量：10H指数：1
- 供职机构：郑州大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 杜氏盐藻环盒子1互作蛋白的筛选及功能初探
- 环盒子1(Ring-box l, RBX1)是SCF-E3泛素-蛋白连接酶复合体中的指环亚基，通过靶向降解不同的底物蛋白而发挥调节多种细胞生物学过程的作用。泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome s...
- 许尧
- 关键词：杜氏盐藻肿瘤发生
- 文献传递
- 杜氏盐藻FLA8基因全长的克隆及鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的:获得FLA8基因cDNA序列。方法:根据衣藻、小球藻等驱动蛋白-2亚基的氨基酸高度保守序列GYNGTIF、NEDPKDA设计一对简并引物,采用RT-PCR及3’RACE和5’RACE的方法扩增杜氏盐藻FLA8基因的全长。结果:克隆得到的杜氏盐藻FLA8基因cDNA全长序列为2612bp,序列分析显示其包括90bp的5’UTR、167bp的3’UTR以及2355bp的开放阅读框,其编码784个氨基酸残基,蛋白质的理论等电点为6.65,相对分子质量为85097。氨基酸序列同源性分析显示其与其他物种有较高的同源性:团藻(98%)、衣藻(99%)、小球藻(92%)。结论:得到杜氏盐藻驱动蛋白-2亚基FLA8的基因全长。
- 李俊平刘岷毛丽红石科李靓许尧薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻
- Ets2 siRNA转染对EC9706细胞增殖、侵袭、周期和凋亡的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨Ets2 siRNA转染对EC9706细胞增殖、侵袭能力、周期和凋亡的影响。方法:利用Western blot检测正常食管上皮细胞系Het-1A和食管鳞状细胞癌细胞系(EC1、Eca109、EC9706)中Ets2蛋白的表达。将EC9706细胞分为4组:阴性对照组、空白对照组、转染试剂对照组和Ets2 siRNA组,处理48 h后,采用Ed U荧光标记法和CCK-8法检测4组细胞增殖率和增殖抑制率,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,Western blot检测E-cadherin、Caspase-3和Bcl-2蛋白的表达情况,流式细胞仪检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染法检测早期细胞凋亡。结果:与Het-1A细胞相比,EC1、Eca109和EC9706细胞中Ets2蛋白的表达量增加(F=1 177.764,P<0.001),且EC9706细胞中增加最为显著。转染后,与阴性对照组相比,Ets2 siRNA组细胞增殖率降低、增殖抑制率升高(F=64.733和144.741,P<0.05),侵袭能力减弱(F=104.065,P<0.001),细胞周期无明显变化(P>0.05),早期凋亡细胞增加(F=37.986,P<0.001),E-cadherin蛋白和Caspase-3蛋白表达增加(F=62.223和81.015,P<0.05),而Bcl-2蛋白表达减少(F=104.439,P<0.001)。结论:Ets2下调后能有效抑制EC9706细胞增殖,降低侵袭能力,诱导凋亡;Ets2可能成为食管鳞状细胞癌的有效治疗靶点。
- 杨露张楠楠张彦婷李庆华许尧朱相展薛乐勋关方霞
- 关键词：增殖细胞周期凋亡EC9706细胞
- 中药材蛤蚧的特异性PCR鉴定被引量：8
- 2012年
- 以线粒体Cytb、COI、12SrRNA、16SrRNA基因序列为基础,探讨特异性PCR技术鉴定蛤蚧及伪品的可行性。本研究以所扩增的16条COI序列为引物设计依据序列设计了1对位点特异性引物COISF,COISR,同时从Gen-Bank上下载30条序列,设计了CytbSF,CytbSR;16S rRNASF,16S rRNASR;12S rRNASF,12S rRNASR另外3对位点特异性引物,因此共用4对位点特异性引物分别扩增蛤蚧及伪品实验样本。结果表明在复性温度为65℃时,4对引物都出现了理想的结果,即蛤蚧正品出现了扩增条带,而伪品没有扩增条带。同时对市售的蛤蚧商品进行了检测,在所供的7号标本中,有4号为蛤蚧正品,其余3号为蛤蚧伪品。本研究所设计的位点特异性引物可快捷、准确的鉴定蛤蚧及伪品,且在药检工作中具有极大的应用前景。
- 顾海丰夏云徐永莉谷颖乐许尧李力曾晓茂
- 关键词：特异性引物分子鉴定
- 杜氏盐藻环盒子1相互作用蛋白的酵母双杂交法筛选
- 2015年
- 目的:构建杜氏盐藻环盒子1(RBX1)的酵母双杂交诱饵载体p GBKT7-RBX1,筛选与RBX1相互作用的蛋白。方法:采用PCR技术扩增杜氏盐藻RBX1的开放阅读框,测序分析后插入酵母表达质粒,构建诱饵载体p GBKT7-RBX1。将酶切鉴定正确的诱饵载体用PEG/Li Ac法分别转化到酵母菌Y187和AH109中,通过表型筛选检测RBX1对酵母菌有无自激活和毒性作用。转化诱饵质粒的Y187与文库菌AH109杂交,待三叶草形状的合子形成后用营养缺陷型培养基和α-半乳糖苷酶活性实验筛选阳性克隆并测序。结果:成功构建了p GBKT7-RBX1,它对Y187和AH109两种酵母菌既无自激活又无毒性作用。杂交后筛选得到两个阳性克隆,阳性克隆1与莱茵衣藻和拟南芥中氧化还原酶铁硫蛋白亚基的同源性为38%和39%,阳性克隆2与莱茵衣藻中转化抑制剂蛋白的同源性为57%。结论:诱饵载体p GBKT7-RBX1可用于酵母双杂交。成功筛选得到两个阳性克隆,可能是与RBX1相互作用的蛋白。
- 许尧张楠楠张彦婷李庆华杨露朱相展薛乐勋关方霞
- 关键词：酵母双杂交杜氏盐藻诱饵载体自激活
