伍志
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：华中师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 指状青霉MFS转运蛋白基因Pdmfs2的克隆及功能研究
- 指状青霉（Penicillium digitatum）是柑橘类水果的主要致病真菌，在采摘后的加工、贮藏、运输和销售过程中引起绿霉病而造成巨大损失。甾醇14α-脱甲基化酶抑制剂(DMIs)具有良好的杀真菌效果，但是抗药性菌...
- 伍志
- 关键词：转运蛋白基因克隆
- 文献传递
- 指状青霉cyt b_5和cyt b_5r基因克隆及与cyp51A的共表达
- 2016年
- 为探究指状青霉细胞色素b5(Cyt b5)与细胞色素b5还原酶(Cyt b5r)在细胞色素P450 CYP51A电子传递方面的功用,研究了指状青霉CYP51A与Cyt b5-Cyt b5r共表达机制;并检测了其对于cyp51A基因表达水平的影响。通过转录组分析筛选并PCR克隆获得了cyt b5与cyt b5r基因,分别命名为HS-Pdcyt b5和HS-Pdcyt b5r。以多基因串联克隆载体p PICZαA为骨架构建了指状青霉共表达质粒ppbr A(p PIC-Pdcyp51A-cyt b5-cyt b5r);电转化法将重组质粒ppbr A导入毕赤酵母X-33中。q RT-PCR分析结果显示,CYP51A与Cyt b5-Cyt b5r共表达后,其基因表达水平升高54%-97%,并维持较长时间(48-72 h)。表明Cyt b5-Cyt b5r系统可将电子高效转移给CYP51A,从而增强cyp51A基因的转录表达。从指状青霉中克隆表达HS-Pd Cyt b5和HS-Pd Cyt b5r蛋白,并通过共表达的方式研究cyp51A基因的功能尚为首次报道。
- 秦婷婷耿辉王胜强牛玉慧伍志刘德立
- 关键词：共表达细胞色素B5
- 柑橘青霉菌CYP51B基因和上游调控区克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2016年
- 【目的】克隆柑橘青霉菌(意大利青霉菌,Penicillium italicum)CYP51的同源基因,并对基因序列进行生物信息学分析。【方法】通过PCR及染色体步移技术得到基因的完整序列及上下游调控序列。通过生物信息学手段对基因的结构进行分析:使用NNPP分析软件预测转录起始位点,并利用TFSEARCH1.3软件分析转录因子结合位点。利用SWISS-MODEL在线软件对蛋白进行同源模建。【结果】克隆得到了意大利青霉菌CYP51的同源基因,命名为Pi CYP51B。获得的Pi CYP51B及上下游调控区序列总长为3 496 bp,包括上游910 bp和下游834 bp的序列。Pi CYP51B基因的开放阅读框全长1 575 bp,编码524个氨基酸。该基因含有3个分别为74、51、52 bp的内含子,分别位于247 bp与320 bp之间,519 bp与569 bp之间,1 635 bp与1 686 bp之间。Pi CYP51B 5′上游调控区序列的总长为579 bp。生物信息学分析结果显示:转录起始位点位于上游458 bp处;上游调控区不仅包含启动子的核心结构序列TATA盒(位于-25 bp处),也包含多个转录因子结合位点,如Abd-B、ADR1、AP-4、GATA-1、Cdx A、Clox和Oct-1等。在上游调控序列中嘌呤含量高,而且从+387 bp处开始存在4个连续高嘌呤含量的热激转录因子特异性结合位点(HSF);在+106 bp处开始存在3个连续的Cdx A转录因子结合位点。选用人CYP51晶体结构(PDB ID:3LD6)为模板,利用SWISS-MODEL在线软件构建了意大利青霉菌CYP51B蛋白的结构模型。【结论】克隆了意大利青霉Pi CYP51B基因,其上游含有多个热激应答转录因子特异性结合位点(HSF)表明其参与逆境应答。该基因作为意大利青霉菌CYP51的同源基因,可能与青霉菌对真菌药物的抗药性密切相关。
- 牛玉慧刘婧齐婷伍志秦婷婷李青钟靖然张恒王崇武袁永泽刘德立
- 关键词：PI同源模建
- 柑橘指状青霉的抗药性机制及生物防治技术研究
- 柑橘是我国主要的经济果树作物,长期以来,由指状青霉（Penicillium digitatum）引起的柑桔绿霉病是柑橘采后加工、运输和贮存过程中的主要侵染性真菌病害,造成严重的经济损失。因此,探究有效的指状青霉防治方法势...
- 牛玉慧张廷富王胜强刘婧伍志秦婷婷袁永泽刘德立
- 关键词：抗药机制生物防治
- 文献传递
