袁永泽
- 作品数：38 被引量：62H指数：4
- 供职机构：华中师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程医药卫生更多>>
- 水稻根部2-酮戊二酸感应蛋白OsGlnB的铵同化碳架结合特性
- 2017年
- 为了揭示2-酮戊二酸(2-OG)感应蛋白OsGlnB在水稻根部铵同化碳架调节中的功能,本文采用2-OG、草酰乙酸(OAA)或丙酮酸(PYR)营养液处理水稻(Oryza sativa L.cv.9311)幼苗,检测根部谷氨酰胺合成酶(GS)活性和OsGlnB基因转录量。克隆表达并分离纯化根部OsGlnB蛋白,采用同源模建、分子对接与等温滴定鉴定该信号蛋白与碳架效应物的相互作用。结果表明所选碳架分子中只有2-OG和OAA促使根部GS活性与OsGlnB基因转录量同步上升,2-OG与ATP含量也相应升高。同源模建与分子对接表明OsGlnB蛋白与ATP-Mg^(2+)形成的复合物能有效结合2-OG或OAA,但不能结合PYR。等温滴定证明2-OG与上述复合物的结合常数大于OAA,未检测到丙酮酸热效应,结果与分子对接结论一致。本研究说明碳架效应物结合2-OG感应蛋白是这类碳营养信号调节水稻根部铵同化的必要条件。
- 郭继林曹倩文袁永泽郑勇
- 关键词：水稻
- 革兰氏阳性菌HS-N10反硝化nos基因簇结构研究
- N2O是大气中重要的温室气体,其分子增温潜势高出CO2 100倍.大气N2O含量年增长率达到0.2％～0.3％,由此引发的环境危害备受关注.N2O生物转化是降低该温室气体含量的有效途径.细菌反硝化nos基因簇编码一氧化二...
- 陈元磊李丹丹陈湖星袁永泽熊丽刘德立
- 病原真菌玉米黑粉菌CYP51基因结构分析与功能研究
- 随着玉米杂交种的推广,连作玉米的增多,玉米黑粉病不断蔓延加重,局部地区已成为当前玉米生产上的严重病害区域,给农业增产增收带来一定困难。玉米黑粉病的主要病原菌——玉米黑粉菌(Ustilago maydis)是最重要的病原菌...
- 韩睿张华黎晨张青叶张劼袁永泽万坚肖文精刘德立
- 文献传递
- 一种新型有机磷降解酶的二异丙基氟磷酸酯水解特性研究被引量：6
- 2013年
- 有机磷降解酶是降解有机磷化合物(包括神经毒剂)的一类重要酶.本实验室克隆了铜绿假单胞菌HS-D38的有机磷降解酶基因opd(organophosphate degradation),并经定点突变与原核表达获得了一种新型重组有机磷降解酶OPD.本文研究了该重组有机磷降解酶OPD的分离纯化,及其降解有机磷神经毒剂模拟剂二异丙基氟磷酸酯(diisopropyl fluorophosphate,DFP)的性质.研究结果表明,重组有机磷水解酶OPD经Ni-NTA亲和色谱纯化后,比活力达到了218U/mg.该酶的最适温度为35℃,最适pH为8.0;金属离子Zn2+、Cr2+、Co2+对酶活性有激活作用.重组有机磷水解酶OPD对DFP的Km为1.05mmol.L-1,Vm为0.218mmol.L-1.min-1.
- 问县芳袁永泽习海玲钟近艺陈立坤王攀肖文精刘德立
- 关键词：酶学性质
- 鲤TYK2基因的克隆鉴定及组织表达分析被引量：4
- 2015年
- 两面神激酶(JAK,Janus kinase)是一类酪氨酸蛋白激酶(PTK,protein tyrosine kinase),迄今已发现有4个成员,即JAK1、JAK2、JAK3和TYK2(Tyrosine kinase 2),JAK分子具有7个独特的结构域,从C端到N端依次为JAK同源区1(JAK homology 1,JH1)-JH7[1]。细胞因子与相应受体结合后,JAK与受体偶联并发生酪氨酸磷酸化而激活,活化的JAK能催化受体上特定部位的酪氨酸残基磷酸化,形成信号转导和转录激活因子(Signal Transducer and Activator of Transcription,STAT)等含Src同源区2(SH2,
- 吴平高谦刘德立付友袁永泽文春根
- 关键词：JAK1基因克隆组织表达分析
- 纤维素酶产生菌HS-F9的筛选鉴定和产酶条件优化被引量：18
- 2010年
- 为了选育高产纤维素酶菌株,通过刚果红鉴别培养基以及滤纸条崩解实验测定,从牛粪堆肥中筛选到一株产纤维素酶的真菌HS-F9,根据菌株形态特性和18SrRNA基因序列分析,初步鉴定该菌为绿色木霉(Trichoderma viride).利用液体发酵培养产生纤维素酶,研究了碳源、氮源、培养时间、培养温度、培养基起始pH、接种量对菌株HS-F9产酶的影响.结果表明:产EG、CBH和FPA的最适碳源均为CMC-Na;EG和CBH在以蛋白胨为唯一氮源时酶活最高,FPase则在以黄豆粉为唯一氮源时酶活最高;产生EG、CBH和FPA的最适温度分别为30℃、30℃、33℃;最适起始pH为3.0、3.0和4.0;EG和FPase的最适接种量为2%,CBH最适接种量达到了8%;培养时间均以5～6d为宜.在最适条件下培养,该菌株EG、CBH和FPase的酶活分别达到了5275.3U/mL、8502.1U/mL和3619.1U/mL,是未优化前的1.42、1.35和1.32倍.
- 魏艳红熊鹰袁永泽郑扬忠胡柳如张华李风杨江科闫云君刘德立
- 关键词：纤维素酶菌株筛选产酶条件优化酶活性
- 生物化学研究型教学与创新人才培养的探索
- 生物化学是生命科学专业的一门极为重要的专业课。为了激发学生学习兴趣,更新教育观念,探索本科教学新模式,我们积极开展了生物化学研究型课堂教学改革。采用启发式、互动式、归纳比较分析法以及多媒体教学手段等措施,着力构建"研究型...
- 刘德立袁永泽熊丽丁书茂袁均林王玉凤
- 文献传递
- 假单胞菌HS-D36偏苯三酚1,2-双加氧酶克隆表达与催化特性研究
- 2015年
- 由pnpC编码的偏苯三酚1,2-双加氧酶(Hydroxyquinol 1,2-dioxygenase,PnpC)是微生物分解硝基芳香族类环境污染物的关键酶.本研究从对硝基苯酚(p-nitrophenol,PNP)降解菌HSD38(Pseudomonas sp.)中克隆pnpC基因,利用E.coli BL21(DE3)高效表达重组PnpC,通过亲和色谱纯化并分析其催化特性.实验结果表明:HS-D36的pnpC开放阅读框长度为873bp,编码290个氨基酸,酶蛋白相对分子量33KD;20℃、异丙基硫代-β-半乳糖苷(Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导可高效表达重组PnpC;重组酶经Ni-NTA亲和色谱一步分离可达到电泳纯;纯酶比活力9.3U/mg,纯化倍数37.2,活力收率23.8%;重组PnpC催化邻苯二酚开环反应的最适温度45℃、最适pH 5.0;Lineweaver-Burk双倒数作图表明PnpC对邻苯二酚降解的米氏常数(Km)为21.95mol/L、最大反应速度(Vmax)为2.68mol/(min·mg);Fe3+、Cu2+、Fe2+和Zn2+对该酶具激活作用,Ni 2+则显示抑制效应.
- 李景龙袁永泽李丹丹杨雪婷耿辉熊丽刘德立
- 关键词：对硝基苯酚表达纯化
- 新型好氧反硝化菌的分离鉴定及其在人工废水中的应用研究
- 本文从武汉市某纺织厂排污口采样,通过富集培养法筛选分离到一株高效好氧反硝化细菌HS-043。对该菌株在SC培养基中以及人工废水（AWW）中的反硝化能力进行了研究。研究结果表明:细菌HS-043能在12小时内将人工废水中的...
- 袁利玲杨俊忠许尚营倪砚李平袁永泽刘德立
- 关键词：好氧反硝化废水脱氮
- 文献传递
- 稻瘟菌MgCYP51B基因稀有密码子和mRNA二级结构分析与表达优化被引量：5
- 2014年
- 在大肠杆菌中异源表达稻瘟菌CYP51(P450-14DM,MgCYP51B)基因,通过对MgCYP51B进行跨膜区预测和同源模建分析,并截短稻瘟菌CYP51B基因,构建了9种不同的重组表达质粒以实现蛋白表达.结果表明:只有pET28-MgB-83在3种宿主菌中实现了表达,且在BL21(DE3)pLysS中表达量最大.通过对稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构进行分析,发现稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构稳定性对MgCYP51B蛋白的表达都有影响,适用于稀有密码子表达的Rossetta(DE3)并不适用于MgCYP51B基因的最优表达.同时只有翻译起始区二级结构自由能最低的pET28-MgB-83才能实现表达.本研究实现了稻瘟菌MgCYP51B基因在大肠杆菌中的异源表达,证实密码子的偏爱性和翻译起始区二级结构稳定性影响MgCYP51B蛋白表达.
- 齐婷刘婧李倩余金辉袁永泽刘德立
- 关键词：翻译起始区稀有密码子
