耿辉
- 作品数:28 被引量:32H指数:4
- 供职机构:华中师范大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学环境科学与工程农业科学更多>>
- 嗜温性脂肪酶基因HS-L16的克隆表达及多拷贝载体的构建
- 脂肪酶(Lipase,EC3.1.1.3),是一类催化三脂酰甘油酯水解为甘油和脂肪酸的水解酶。是一类可以催化三酰基甘油酯水解、氨解、转酯、酯化等反应的蛋白质酶类。既可以在水相中,也可以在异相系统(油水界面)作用。嗜温性脂...
- 李娜余金辉朱德锐张凯董佳慧揭瑞耿辉熊丽刘德立
- 关键词:微生物脂肪酶毕赤酵母
- 文献传递
- 质谱离子通道微型无尘声波清洗装置
- 质谱离子通道微型无尘声波清洗装置,包括中空的连接管,所述连接管上侧螺纹连接有套管,所述套管上侧开有插槽,所述插槽上侧连接有调节杆,所述调节杆下侧设置有锁紧结构,所述调节杆上侧固定连接有固定杆。本实用新型有效地解决了仪器部...
- 万建汪兵耿辉李兵万翠红
- 基础生物化学实验教学改革与实践初探
- 从教学内容和实验考核标准两方面,对高等院校生物化学实验课程进行了改革和探索,旨在培养学生的创新能力、综合分析能力和独立开展科学研究的能力.
- 熊丽刘德立丁书茂耿辉杨旭王玉凤
- 关键词:教学改革
- 师生互动式教学模式在《分子生物学》教学的实践与思考
- 本文在《分子生物学》教学过程中,对师生互动式教学模式进行了探索和实践,通过对理论、实验课程及考评体系的创新,培养了学生的自主学习能力和创新能力,使《分子生物学》这门课在减时不减量的情况下得以保质完成.
- 耿辉熊丽刘德立丁书茂杨旭王玉凤
- 关键词:教学模式师生互动
- 自身反应性MZ-B细胞功能探究
- B细胞免疫耐受失调与自身免疫性疾病的发生、发展和转归密切相关.许多自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮的特征性病变是自身反应性B细胞过度活化产生的大量自身抗体.活化的B细胞不仅分泌抗体发挥调理作用、激活补体、介...
- 韩冬王瑞玲耿辉
- 关键词:类风湿性关节炎
- 指状青霉cyt b_5和cyt b_5r基因克隆及与cyp51A的共表达
- 2016年
- 为探究指状青霉细胞色素b5(Cyt b5)与细胞色素b5还原酶(Cyt b5r)在细胞色素P450 CYP51A电子传递方面的功用,研究了指状青霉CYP51A与Cyt b5-Cyt b5r共表达机制;并检测了其对于cyp51A基因表达水平的影响。通过转录组分析筛选并PCR克隆获得了cyt b5与cyt b5r基因,分别命名为HS-Pdcyt b5和HS-Pdcyt b5r。以多基因串联克隆载体p PICZαA为骨架构建了指状青霉共表达质粒ppbr A(p PIC-Pdcyp51A-cyt b5-cyt b5r);电转化法将重组质粒ppbr A导入毕赤酵母X-33中。q RT-PCR分析结果显示,CYP51A与Cyt b5-Cyt b5r共表达后,其基因表达水平升高54%-97%,并维持较长时间(48-72 h)。表明Cyt b5-Cyt b5r系统可将电子高效转移给CYP51A,从而增强cyp51A基因的转录表达。从指状青霉中克隆表达HS-Pd Cyt b5和HS-Pd Cyt b5r蛋白,并通过共表达的方式研究cyp51A基因的功能尚为首次报道。
- 秦婷婷耿辉王胜强牛玉慧伍志刘德立
- 关键词:共表达细胞色素B5
- 稻瘟菌CYP51克隆和可溶性表达研究
- 稻瘟病由子囊菌Magnaporthe grisea引起的,是广泛发生在世界各稻区的最重要水稻病害,也是限制水稻高产稳产的主要因素。细胞色素P450甾醇14α-去甲基化酶(CYP51)是真菌细胞膜麦角甾醇生物合成过程中的一...
- 李倩王金龙齐婷何木青耿辉熊丽刘德立
- 文献传递
- 假单胞菌HS-D36偏苯三酚1,2-双加氧酶克隆表达与催化特性研究
- 2015年
- 由pnpC编码的偏苯三酚1,2-双加氧酶(Hydroxyquinol 1,2-dioxygenase,PnpC)是微生物分解硝基芳香族类环境污染物的关键酶.本研究从对硝基苯酚(p-nitrophenol,PNP)降解菌HSD38(Pseudomonas sp.)中克隆pnpC基因,利用E.coli BL21(DE3)高效表达重组PnpC,通过亲和色谱纯化并分析其催化特性.实验结果表明:HS-D36的pnpC开放阅读框长度为873bp,编码290个氨基酸,酶蛋白相对分子量33KD;20℃、异丙基硫代-β-半乳糖苷(Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导可高效表达重组PnpC;重组酶经Ni-NTA亲和色谱一步分离可达到电泳纯;纯酶比活力9.3U/mg,纯化倍数37.2,活力收率23.8%;重组PnpC催化邻苯二酚开环反应的最适温度45℃、最适pH 5.0;Lineweaver-Burk双倒数作图表明PnpC对邻苯二酚降解的米氏常数(Km)为21.95mol/L、最大反应速度(Vmax)为2.68mol/(min·mg);Fe3+、Cu2+、Fe2+和Zn2+对该酶具激活作用,Ni 2+则显示抑制效应.
- 李景龙袁永泽李丹丹杨雪婷耿辉熊丽刘德立
- 关键词:对硝基苯酚表达纯化
- 柑橘致病青霉菌的分离与分子鉴定
- 青霉病和绿霉病是柑橘类水果采后贮存转运过程中的主要病害,对果农造成重大损失。引起柑橘青霉病和绿霉病的病菌分别为意大利青霉和指状青霉。此外,还有多种其它青霉菌能够引起柑橘病害。本实验主要开展了柑橘采后致病青霉菌分离鉴定的研...
- 齐婷李倩王金龙李逸莫小研耿辉袁永泽熊丽刘德立
- 文献传递
- HS-D36偏苯三酚1、2-双加氧酶基因的克隆表达与催化特性研究
- 对硝基酚(PNP)是甲基对硫磷、对硫磷等多种有机磷农药降解的中间产物,是重要的环境污染物。微生物酶技术降解PNP具有高效、彻底、无二次污染等优点,对于PNP环境污染修复以及有机磷农药彻底矿化具有重要意义。微生物代谢PNP...
- 杨雪婷袁永泽楼梦张宁宁耿辉熊丽刘德立
- 关键词:基因克隆
- 文献传递