李慧
- 作品数：11 被引量：8H指数：2
- 供职机构：大连海洋大学更多>>
- 发文基金：国家海洋公益性行业科研专项大连市科技计划项目辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程理学更多>>
- 红鳍东方鲀白介素15的原核表达及其活性测定被引量：2
- 2015年
- 为了开发红鳍东方鲀Takifugu rubripes免疫基因及其重组表达,生产重组免疫因子蛋白,通过提取红鳍东方鲀肾脏组织总RNA,利用RT-PCR技术扩增得到白介素15(interleukin15,IL15)基因序列,将IL15成熟肽序列与原核表达载体p ET-32a(+)连接,成功构建重组表达载体(重组子)p ET-32a(+)-IL15,并将其重组子转化至Escheria coli BL21(DE3)感受态细胞中获得重组表达IL15的基因工程菌,再经IPTG诱导,p ET-32a(+)-IL15在BL21中得到了融合表达。结果表明:通过对表达产物的纯化和Western Blotting检测,红鳍东方鲀IL15在大肠杆菌中的表达量较高,蛋白浓度为294.6μg/m L;用MTT法对该蛋白进行活性鉴定显示,加入稀释10倍和100倍的重组红鳍东方鲀IL15蛋白时,CTLL-2细胞的增殖率相对较高,分别为71%和73%。研究表明,重组红鳍东方鲀IL15蛋白具有体外促进CTLL-2细胞增值的能力。
- 孙赛红马普李慧孙鹤孔德荣李凤华仇雪梅姜志强刘海映刘圣聪王秀利
- 关键词：红鳍东方鲀白介素-15原核表达活性鉴定
- 刺参C型凝集素(AJL)基因的克隆及原核表达分析被引量：3
- 2015年
- 为了开发海参免疫基因,生产重组免疫因子蛋白,利用cDNA末端快速扩增技术(Rapid-amplification of cDNA ends,RACE)获得了刺参凝集素基因(Apostichopus japonicus Lectin,AJL)的编码区序列(Coding sequence,CDS),CDS的长度为492 bp,编码163个氨基酸,其中成熟肽由143个氨基酸组成。将成熟肽的基因克隆并连接至载体p ET-32a(+)中,成功构建了原核表达的重组体p ET-32a(+)-AJL,进一步将重组体转化至大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,经诱导表达、分离纯化,获得了融合表达蛋白。本研究结果为进一步研究重组刺参C型凝集素在刺参健康养殖上的应用奠定了基础。
- 薛壮李慧孙鹤孔德荣马普周玮仇雪梅刘洋王秀利
- 关键词：刺参凝集素基因克隆原核表达
- 海洋微塑料降解酶的制备及其降解性能的研究
- 由于微塑料体积小，传播范围广(主要在水资源体系内传播)，没有有效的治理与控制手段，造成水体中微塑料不断积累，成为新的环境污染问题。目前国内外针对微塑料污染造成的危害，在积极寻找治理与控制的方法和技术，其中通过生物降解微塑...
- 李慧
- 关键词：海洋污染对苯二甲酸
- 利用两种酶协同作用降解PET塑料的方法
- 本发明公开一种利用两种酶协同作用降解PET塑料的方法，将PET塑料放入PETase酶和MHETase酶的混合酶液中，在30℃温度下降解反应48h，所述PETase酶和MHETase酶的酶活力单位比为3：1。可将PET塑料...
- 孔亮李慧余冲杜灿王东旭
- 文献传递
- 仿刺参凝集素基因、重组融合蛋白及制备方法
- 本发明公开一种仿刺参凝集素基因，核苷酸序列如SEQ？ID？NO：1？所示，仿刺参凝集素基因的重组融合蛋白，氨基酸序列如SEQ？ID？NO：2所示。仿刺参凝集素基因的制备方法是：提取仿刺参体壁总RNA；cDNA第一条链的合...
- 王秀利薛壮李慧周玮仇雪梅
- 文献传递
- 制备重组红鳍东方鲀IFN‑γ蛋白的基因及方法
- 本发明公开一种制备重组红鳍东方鲀IFN‑γ蛋白的基因及方法，所述基因的DNA序列如SEQ ID NO:1所示。方法依次按照如下步骤进行：将DNA序列如SEQ ID NO:1所示的基因克隆入真核表达质粒pPICZαA上，得...
- 王秀利孔德荣李慧孙鹤刘海映仇雪梅
- 文献传递
- 红鳍东方鲀干扰素γ基因的原核表达被引量：3
- 2015年
- 旨在探究一种简单高效的获取重组红鳍东方鲀IFNγ蛋白的方法。提取红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)肾脏组织的总RNA,并以其为模板进行RT-PCR扩增干扰素γ(IFNγ)基因序列。将IFNγ成熟肽序列与表达载体p ET-32a(+)相连,成功构建了重组表达载体PET-32a-IFNγ。将其转化入E.coli BL21(DE3)感受态细胞后获得了重组表达IFNγ的基因工程菌。经IPTG诱导,p ET-32a-IFNγ在BL21中得到了表达。通过对表达产物的纯化和Western blotting检测,结果显示红鳍东方鲀IFNγ基因在大肠杆菌中的表达准确,且目的蛋白表达量较高。
- 马普孙赛红王玉芳李慧刘海映姜志强仇雪梅刘洋张涛王秀利
- 关键词：红鳍东方鲀干扰素Γ原核表达
- 红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)干扰素调节因子2基因的克隆及原核表达
- 2016年
- 干扰素调节因子(Interferon regulatory factor,IRF)是一种多功能的转录因子。采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和c DNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了红鳍东方鲀干扰素调节因子2(Interferon regulatory factor 2,IRF2)基因的全长c DNA。该基因全长为1 552 bp,其中5'非编码区(5'-UTR)187 bp,3'非编码区(3'-UTR)429 bp,编码区(CDS)为936 bp,共编码311个氨基酸。将IRF2的编码区序列连接到原核表达载体p ET32a(+),成功构建了重组体p ET32a(+)-IRF2。将重组体p ET32a(+)-IRF2转入大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,获得了重组表达IRF2的基因工程菌。经IPTG诱导,p ET32a(+)-IRF2在BL21中得到了融合表达。通过对表达产物的纯化和Western blotting检测,结果显示红鳍东方鲀IRF2基因在大肠杆菌中的表达效果较高,目的蛋白准确。
- 孙赛红马普孙鹤孔德荣李慧仇雪梅姜志强刘海映刘洋刘圣聪孟雪松王秀利
- 关键词：红鳍东方鲀原核表达
- 重组刺参(Apostichopus japonicus)凝集素的表达与活性分析
- 海参（Sea Cucumber）是我国重要的海水养殖物种，具有重要的经济价值。由于海参的营养价值和药用价值，海参产业在亚洲国家迅猛发展。然而，海参很容易被多种细菌、寄生虫和病毒感染，例如，细菌感染导致的腐皮综合征会引起海...
- 李慧
- 关键词：C型凝集素生物活性
- 真核表达制备重组红鳍东方鲀白介素2蛋白的基因及方法
- 本发明公开一种可高效表达且表达产物具有明显生物学活性的真核表达制备重组红鳍东方鲀白介素2的基因及制备方法，依次按照如下步骤进行：将SEQ ID NO:1所示的基因克隆入原核表达载体pPICZαA上，构建真核表达质粒pPI...
- 王秀利孙鹤李慧孔德荣刘海映仇雪梅
- 文献传递
