张艳红
- 作品数:4 被引量:6H指数:1
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人源性Rab38荧光融合蛋白表达载体的构建及功能鉴定
- 2016年
- 目的构建人源性Rab38与EGFP融合蛋白表达载体pEGFP-Rab38,观察Rab38在人黑素细胞瘤细胞系A375中的细胞定位情况,为进一步研究Rab38在黑素代谢中的作用提供实验依据。方法收集A375细胞,提取总RNA并逆转录成cDNA。特异性引物PCR扩增Rab38片段并插入pEGFP-C3载体,随后转化至感受态大肠杆菌DH5α中,挑取单克隆菌落进行鉴定。将鉴定正确的重组表达载体转染A375细胞,检测细胞中Rab38和Tyrp1(酪氨酸酶相关蛋白1)的表达并观察Rab38的亚细胞定位。结果 pEGFP-Rab38重组质粒经菌液PCR、双酶切和测序鉴定正确;转染A375细胞后,激光共聚焦显微镜观察到Rab38定位于胞浆中,且大量聚集于细胞核周围;实时定量PCR和Western blot可检测出细胞中EGFP-Rab38融合蛋白的表达,且细胞中Tyrp1的表达明显升高。结论融合蛋白表达载体pEGFP-Rab38成功构建,观察了Rab38在细胞中的定位并初步研究了其对黑素合成关键蛋白Tyrp1的影响,为进一步研究Rab38在黑素代谢中的作用奠定了良好的基础。
- 李宏文刘晓丽张艳红邓云华张彩娥
- 关键词:重组质粒亚细胞定位
- 柯萨奇病毒致儿童急性苔藓痘疮样糠疹一例被引量:1
- 2016年
- 患儿男,6岁。就诊前1个月,无明显诱因背部出现散在暗红色鳞屑性斑丘疹、伴瘙痒,搔抓后破溃、疼痛明显,在当地医院按毛囊炎给予治疗,皮损无明显好转,且出现发热,最高达40.0℃,皮损渐加重,泛发全身,当地医院行血尿常规、粪常规+潜血、肺炎支原体抗体、风湿免疫全套、类风湿因子均未见异常,病毒性肝炎相关检查未见异常。
- 张艳红张晓燕陈辉朱琰胡伟董盈盈邓云华刘冬先
- 关键词:柯萨奇病毒肺炎支原体抗体苔藓急性儿童类风湿因子病毒性肝炎
- 依托考昔致固定性药疹国内首报及文献复习被引量:5
- 2015年
- 报道1例依托考昔致固定型药疹患者,男,43岁。因眼内眦、唇部、颊黏膜及龟头红斑、水疱、糜烂,伴痛痒12 h就诊。查体见双眼内眦皮肤小片淡红斑;双唇见大片水肿性红斑或紫红斑,少许水疱,口腔颊黏膜见小片状水肿性红斑;龟头部见大片红斑、糜烂和渗液。既往有3次口服依托考昔后均出现过类似皮损病史。据此诊断为固定型药疹(依托考昔所致)。患者停用依托考昔,经抗过敏与对症治疗后皮损逐渐消退,局部遗留持久性色素沉着斑。警示临床医师应注意依托考昔所致固定型药疹的皮肤不良反应。
- 董盈盈陈岚段铱胡伟张艳红邓云华陈兴平
- 关键词:药疹
- 人源性Rab32荧光融合蛋白表达载体的构建及鉴定
- 2016年
- 目的构建人源性Rab32荧光融合蛋白表达载体p EGFP-Rab32,并观察Rab32在人黑素细胞瘤细胞系A375中细胞定位情况。方法收集并提取A375细胞中的总RNA,反转录成c DNA,以特异性引物扩增Rab32片段,经Xho I和Kpn I双酶切聚合酶链反应(PCR)产物和p EGFP-C3表达载体,酶切产物经胶回收、连接后转化至感受态大肠杆菌DH5a中,挑取单克隆菌落进行菌液PCR鉴定、酶切鉴定和测序分析,以确定表达载体构建正确。将构建的重组质粒转染A375细胞,Western blot检测细胞中Rab32表达水平,激光共聚焦显微镜观察其细胞定位。结果p EGFP-Rab32重组质粒经菌落PCR、双酶切和测序鉴定构建正确,转染A375细胞后,Western blot可检测出细胞中p EGFP-Rab32融合蛋白的表达,激光共聚焦显微镜观察到Rab32定位于细胞质中,且大量聚集于细胞核周围。结论p EGFP-Rab32融合蛋白表达载体成功构建,并观察了Rab32在细胞中的定位,为进一步研究Rab32在黑素代谢中的作用奠定了良好的基础。
- 李宏文张艳红邓云华张彩娥
- 关键词:融合蛋白细胞定位