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一株奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌噬菌体的分离鉴定及其生物学特性的研究被引量：5: 2015年; 本研究旨在分离鉴定奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌噬菌体,并研究其生物学特性。利用双层琼脂噬菌斑法从生活污水中分离金黄色葡萄球菌噬菌体;通过核酸酶处理分析核酸类型;采用负染法电镜观察噬菌体的形态和大小;同时测定其最佳感染复数、一步生长曲线和裂解谱。结果显示,本研究分离到1株烈性金黄色葡萄球菌dsDNA噬菌体,命名为噬菌体SAGD1。该噬菌体头部呈二十面体,直径约98nm,有一带伸缩尾鞘的长尾,大小约14nm×200nm,属于肌尾噬菌体科。该噬菌体的最佳感染复数为0.01;感染宿主菌潜伏期约20min,裂解期约30min,裂解量为80。且该噬菌体能裂解1株表皮葡萄球菌及35株金黄色葡萄球菌。结果表明,本研究分离的烈性噬菌体具有金黄色葡萄球菌生物抑菌剂的应用潜力。; 范锦戴申晓晨马若瑶冯嘉琪麦凯杰曾志良马静云; 关键词：金黄色葡萄球菌噬菌体生物学特性

猪流行性腹泻病毒COE基因的原核表达及其表达产物的生物活性分析被引量：2: 2015年; 为了获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)COE基因在原核表达载体pET-32a(+)中的表达产物,并检测表达产物的生物活性,根据猪流行性腹泻病毒COE基因的全序列设计引物,以pCMV-PEDVCOE质粒作为模板,通过PCR扩增得到COE基因编码区的序列,将其克隆至含有6×His tag的原核表达载体pET-32a(+)中进行诱导表达。表达产物经SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定,并用Ni-NTA亲和层析柱纯化,以此纯化产物为包被抗原建立了ELISA检测方法,并用该方法对39份感染PEDV猪血清进行了检测。结果显示,COE基因在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,获得与预期分子质量相符的融合蛋白条带。经Western-blot检测,该蛋白能与Anti-PEDV单克隆抗体发生特异性反应。该融合蛋白纯化、复性后的质量浓度为0.7mg/mL。采用以融合COE蛋白为包被抗原建立的ELISA对39份PEDV感染猪血清的检测结果都为阳性,说明该融合蛋白具备作为包被抗原建立ELISA抗体检测方法的潜力。; 磨健悦孙宝丽魏钟艳曾喜多曾志良谢青梅毕英佐马静云; 关键词：猪流行性腹泻病毒原核表达生物活性

金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶SA5的原核表达及其活性研究: 引言金黄色葡萄球菌是环境中普遍存在的革兰氏阳性菌,致病能力强,在畜牧行业中,金黄色葡萄球菌是引起仔猪腹泻、伤口感染及奶牛乳腺炎的主要致病菌之一,近年来随着抗生素的使用日益增多,金黄色葡萄球菌的耐药性也不断增强,同时人们对...; 曾志良伍绮雯赵晓亚孙宝丽马静云

猪IL-2和IFNγ基因重组乳酸菌的构建、表达及其口服免疫佐剂应用: 引言细胞因子（cytokine,CK）对机体的免疫调节和健康具有重要作用,随着研究的深入,其被认为是具有光明前景的新型免疫佐剂。乳酸菌作为重要的益生菌,对其研究目前也己不仅局限于益生作用和作为外源表达系统使用,其活载体功...; 曾喜多赵晓亚伍绮雯曾志良孙宝丽马静云

一株金黄色葡萄球菌噬菌体的分离及其裂解酶的原核表达: 采用对生活污水的浓缩和富集,通过双层平板法,从生活污水中分离纯化得到一株猪源致病性金黄色葡萄球菌的烈性噬菌体,经过测定,该噬菌体最佳感染复数为0.01,效价为10~9PFU/ml。提取该噬菌体的基因组,尝试通过不同金黄色...; 曾志良伍绮文赵晓亚孙宝丽毕英佐马静云; 关键词：噬菌体裂解酶耐药菌原核表达; 文献传递

一株金黄色葡萄球菌噬菌体的分离鉴定及生物学特性研究: 引言金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种普遍存在于自然界中的革兰氏阳性条件致病菌,能引起仔猪腹泻、伤口感染、奶牛乳腺炎、鸡金黄色葡萄球菌病等疾病,对畜牧业危害较大。畜禽养殖中抗生素的滥用,使...; 范锦戴申晓晨马若瑶冯嘉琪麦凯杰曾志良马静云; 文献传递

副猪嗜血杆菌纳米PCR检测方法的建立被引量：4: 2015年; 为了建立副猪嗜血杆菌(HPs)的高效纳米PCR检测技术,根据文献合成了1对针对HPs的16S rRNA基因的特异性引物,并对纳米PCR的反应条件进行优化。然后用建立的纳米PCR检测HPs、大肠杆菌、肠炎沙门菌、金黄色葡萄球菌及猪链球菌2型等猪源细菌以验证该纳米PCR的特异性,同时比较该纳米PCR与普通PCR的灵敏度。特异性试验结果表明,只有HPs能够扩增出822bp的目的片段,其他细菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果显示,建立的纳米PCR的敏感性比普通PCR高10倍,最低可检出4.19×10-6 ng/μL的HPs基因组DNA。结果表明,本研究建立的基于16S rRNA基因的HPs纳米PCR具有较好的特异性和较高的灵敏度,是一种高效、快速的检测方法,可为副猪嗜血杆菌病的防控和检验检疫提供技术支撑。; 范锦戴陈慧敏马保华罗敏瑜曾志良马静云; 关键词：副猪嗜血杆菌 16SRRNA基因

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曾志良