罗小暖
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室建设项目计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 细胞自噬促进柯萨奇病毒B3复制的研究被引量：2
- 2019年
- 本研究探索柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)感染引起的自噬与病毒复制之间的关系。CVB3感染HeLa细胞,并在病毒感染后6 h、8 h和10 h时检测LC3-Ⅰ蛋白、LC3-Ⅱ蛋白和p62蛋白的表达水平。结果显示CVB3病毒感染促使LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,同时降低p62蛋白的表达。分别将自噬诱导剂雷帕霉素(Rapamy-cin)、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3MA)或溶酶体抑制剂阿洛司他丁(Aloxistatin,E46D)预处理HeLa细胞2 h,CVB3感染药物处理细胞并在病毒感染6 h后收集细胞、检测CVB3病毒VP1蛋白的表达。结果显示雷帕霉素和E64D促使CVB3病毒VP1蛋白表达增加,而3MA降低CVB3病毒VP1蛋白的表达。本研究得出结论 CVB3病毒感染诱导自噬进而促进病毒复制。
- 罗小暖宋娟宋芹芹夏冬史冰田刘宓夏志强王晓乐秘春景韩俊
- 关键词：自噬病毒复制
- 鼻病毒非结构蛋白2B诱导细胞发生内质网应激被引量：1
- 2015年
- 为探讨鼻病毒非结构蛋白2B诱导内质网应激和细胞凋亡的机制,本研究构建了鼻病毒非结构蛋白2B的真核表达载体p2B-GFP,通过转染BHK-21细胞检测相关标志蛋白的变化情况。结果显示,非结构蛋白2B定位表达于BHK-21细胞内质网,诱导内质网应激标志蛋白Grp78、CHOP的表达增加,并使活化转录因子6(ATF6)的转录活性增加,还诱导BHK-21细胞发生核浓缩而凋亡,使凋亡标志蛋白PARP发生降解而减少。结果提示,鼻病毒非结构蛋白2B可诱导细胞发生内质网应激,并经该途径诱导细胞凋亡。
- 迟苗苗宋娟宋芹芹于洁罗小暖张璐王欣玲韩俊
- 关键词：鼻病毒内质网应激凋亡
- 鼻病毒非结构蛋白2B引起细胞自噬产生的研究被引量：1
- 2019年
- 目的利用miniSOG标签观察鼻病毒非结构蛋白2B蛋白在细胞中定位及自噬体产生。方法将非结构蛋白2B和miniSOG进行融合表达构建pcDNA3.1-2B-miniSOG-flag质粒,将质粒转染HEK293细胞,在荧光显微镜下,2B-miniSOG阳性细胞进行固定、光氧化及超薄切片制备,电镜下观察2B-miniSOG蛋白在细胞中的定位及细胞超微结构变化,Westernblot(WB)检测LC3的表达。结果2B-miniSOG蛋白在荧光显微镜下发出绿色荧光,WB检出自噬标志性蛋白LC3-II表达增加。电镜下观察到蛋白定位于线粒体,细胞中出现大量囊泡样结构,可观察到自噬体和自噬溶酶体。结论鼻病毒非结构蛋白2B可引起细胞自噬发生。
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- 关键词：自噬
- 毒胡萝卜素通过ATF6途径促进柯萨奇病毒B3复制的初步研究
- 2019年
- 目的 探讨内质网应激诱导剂毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)对柯萨奇病毒B3(coxsachievirus B3,CV-B3)病毒复制的影响.方法 将10个MOI的病毒感染HeLa细胞后,在病毒的吸附和补液过程中加入0.25μmol/L的TG,分别在药物刺激的3 h、6 h和9 h收集病毒感染的样品.通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CV-B3病毒复制效率;分别使用0.25μmol/L、0.08μmol/L和0.025μmol/L的TG刺激CV-B3病毒感染细胞,通过噬斑形成试验进一步验证TG对病毒复制的影响;通过内质网应激3条通路的抑制剂分别作用于TG刺激的病毒感染细胞,通过qRT-PCR检测病毒量的变化.结果 qRT-PCR结果显示,TG刺激后,相对于对照,病毒量在3 h没有发生明显的变化;在病毒感染的6 h和9 h,病毒量分别增加了2.5倍和158.6倍.噬斑形成试验显示,TG作用后,病毒的噬斑明显增大.通过加入内质网应激的3条通路PERK、ATF6和IRE1的抑制剂GSK2656157、AEBSF和STF-083010发现,加入ATF6的抑制剂AEBSF 6 h后,病毒增加量下降了90%;AEBSF作用9 h后,病毒增加量下降了55%.结论 TG能够通过ATF6途径诱导内质网应激并有效的促进CV-B3病毒的复制.
- 宋芹芹罗小暖宋娟夏冬史冰田刘宓夏志强王文军曹天宇程恒顺韩俊
- 关键词：毒胡萝卜素内质网应激
- 安徽阜阳冬季手足口病患者合并病毒感染的调查研究被引量：2
- 2016年
- 目的 研究安徽阜阳2013年冬季手足几病患儿合并其他病毒感染情况.方法 根据手足口病病例诊断标准诊断收集2013年11月-2013年12月安徽阜阳手足口病住院病例及资料,采集患儿血清.使用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测血清标本中的细小病毒B19、I型单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒和副流感病毒的IgM抗体.整理分析患儿合并病毒感染情况.结果 2013年11月-2013年12月45份手足口病患儿血清腺病毒IgM阳性30例（67.7％）,呼吸道合胞病毒IgM阳性8例（17.8％）,细小病毒B19 IgM阳性8例（17.8％）,巨细胞病毒IgM阳性3例（6.7％）,单纯疱疹病毒IgM阳性l例（2.2％）,血清中未检测出现副流感病毒IgM抗体.同时发现多例合并两种以上病毒IgM阳性现象.结论 2013年阜阳地区冬季手足口病合并腺病毒、呼吸道合胞病毒和细小病毒B19等为主的感染.
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- 关键词：手足口病疾病传播腺病毒B19呼吸道合胞病毒
- 建立荧光定量PCR方法鉴定1例入境人员携带伊科普玛病毒基因
- 2017年
- 目的 建立用于检测伊科普玛病毒（Ekpoma virus,EKV）基因的实时荧光定量PCR（qPCR）的检测方法.方法 根据GenBank中EKV-1和EKV-2基因的保守序列,设计引物和探针,建立检测EKV-1和EKV-2基因的qPCR方法;使用建立的EKV-1和EKV-2病毒qPCR的检测方法,对1名入境人员携带伊科普玛病毒血清和全血样本的检测.结果 建立了检测EKV-1和EKV-2病毒Taqman探针的荧光定量qPCR检测方法,成功检测出1名安哥拉入境人员血清和全血样本中携带EKV-2基因.结论 建立的qPCR检测方法可用于血液标本中EKV-1和EKV-2的检测.
- 夏冬宋娟罗小暖宋芹芹王欣玲武桂珍韩俊
- 关键词：实时荧光定量PCR
