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胡为民

作品数:57 被引量:91H指数:5
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57 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
IL-12B基因多态性及血清表达水平与食管癌的关系
2015年
目的探讨白细胞介素(IL)-12B 3′UTR+16974(A/C)位点单核苷酸多态性(SNP)及其血清表达水平与食管癌的关系。方法随机选取2013年6月~2014年6月在四川省南充市中心医院就诊的食管癌患者52例为试验组,术后收取患者肿瘤组织和癌旁组织,提取其基因组DNA,针对IL-12B基因3′UTR+16974(A/C)SNP位点进行PCR,扩增产物测序,其中患者肿瘤组织DNA作为癌组织,癌旁3~5 cm组织DNA作为癌旁组织,分析IL-12B基因多态性与肿瘤发生的关系。选取同期健康体检者40例为对照组,同时收集患者和健康体检者血清,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测IL-12 p40和IL-12血清表达水平。结果癌组织AA、AC、CC基因型频率分别是23.08%、15.38%、61.54%,癌旁组织AA、AC、CC基因型频率分别是15.38%、38.46%、46.15%,差异有统计学意义(P〈0.05)。癌组织A、C等位基因频率分别为30.77%(32/104)、69.23%(72/104),癌旁组织A、C等位基因频率分别为34.62%(36/104)、65.38%(68/104),差异无统计学意义(P〉0.05)。试验组IL-12 p40和IL-12血清表达水平均明显高于对照组(P〈0.01)。结论 IL-12B 3′UTR+16974(A/C)位点CC基因型可能是食管癌的易感基因型,IL-12 p40和IL-12血清表达水平升高与食管癌发生有关。
彭丽娟杜经纬徐俊常晋霞胡为民潘万龙
关键词:食管癌白细胞介素-12多态性单核苷酸
重组杜氏利什曼原虫Pxn1、TryP、假定蛋白CAJ07026和GDPMP蛋白刺激BALB/c小鼠的免疫应答状态被引量:3
2017年
目的观察重组杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani)过氧化物还原酶1(peroxidoxin-1,Pxn1)、锥虫氧化还原过氧化物酶(tryparedoxin peroxidase,Try P)、假定蛋白CAJ07026(hypothetical protein CAJ07026.1,Hyp07026)和甘露糖-1-磷酸胍氨酸转移酶(GDP-mannose pyrophosphorylase,GDPMP)蛋白刺激BALB/c小鼠免疫应答状况。方法逆转录PCR(RT-PCR)分别扩增杜氏利什曼原虫Pxn1、Try P、Hyp07026和GDPMP编码基因,克隆入质粒p QE30,构建重组质粒p QE30-Pxn1、p QE30-Try P、p QE30-Hyp07026和p QE30-GDPMP,转化至大肠埃希菌,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。采用NTA-Ni盐凝胶层析柱,自然条件方式纯化重组蛋白rPxn1和rTry P,变性条件方式纯化重组蛋白rHyp07026和rGDPMP。25只BALB/c小鼠随机均分成5组,即rPxn1、rTry P、rHyp07026、rGDPMP免疫组及PBS对照组,免疫组小鼠分别以相应重组蛋白进行免疫,第1周免疫组小鼠皮下注射100μg相应的重组蛋白,隔周以50μg相应的重组蛋白加强免疫3次,对照组小鼠注射等量PBS。第3次加强免疫后1周,将各组小鼠脱颈处死,制备单个脾细胞,提取抗原刺激后小鼠脾细胞总RNA,用q RT-PCR微阵列检测抗原刺激后小鼠脾细胞内反映免疫应答的细胞因子转录水平表达谱。结果Pxn1、Try P、Hyp07026和GDPMP编码基因经PCR扩增,其产物大小分别为570、610、1 040和1 200 bp;经测序证实,与Gen Bank中的相关序列一致。重组质粒p QE30-Pxn1、p QE30-Try P、p QE30-Hyp07026和p QE30-GDPMP经IPTG诱导后均可在大肠埃希菌内高效表达,rGDPMP、rPXNT1、rTXNT和rHyp07026蛋白相对分子质量(Mr)分别为45 000、22 000、23 000和38 000。rGDPMP、rPXNT1、rTXNT和rHyp07026免疫小鼠的脾细胞内84个细胞因子基因的m RNA表达中,与PBS对照小鼠脾细胞比较,高水平表达的IL-1f6分别是对照组的96.22、271.54、108.51和250.15倍,IL-17f分别是对照组的105.54、35.71、53.38和53.57倍,IL-10分别是对照组的21.68、27.51、24.45�
敬保迁谢勇恩胡为民杨健王朝莉冯莉
关键词:杜氏利什曼原虫
COL9A2基因野生型与G143C、G884A突变型质粒构建及鉴定被引量:1
2018年
目的:构建IX型胶原α2(collagen type IX alpha 2 chain,COL9A2)基因野生型与G143C、G884A突变型质粒,为进一步研究COL9A2基因功能奠定基础。方法:应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、酶切、连接等技术,将COL9A2基因野生型、携带突变位点G143C与G884A的基因分别插入p UC57空质粒中,基因测序技术进行鉴定。结果:经酶切和基因测序证实COL9A2基因野生型与G143C、G884A突变型分别插入p UC57质粒中。结论:成功构建了p UC57-COL9A2基因野生型、p UC57-p. Gly48Ala和p UC57-p. Gly295Asp突变型质粒。
陈蓉罗家明张微胡为民杨健朱红
关键词:野生型突变型
补体C1s对食管鳞状细胞癌生物学行为的影响
2024年
目的:探究补体分子C1s对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移、黏附以及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:利用NCBI-GEO数据库分析ESCC组织和癌旁正常组织(ANTs)中C1S mRNA的表达;采用RT-qPCR和Western blot检测ESCC细胞系中C1s的表达;利用C1s小干扰RNA(siRNA)、C1s短发夹RNA(shRNA)或C1s过表达慢病毒对ESCC细胞进行C1s的敲低或过表达,CCK-8法检测细胞增殖,细胞划痕实验检测细胞迁移,细胞-基质黏附实验检测细胞黏附能力;Western blot检测基质金属蛋白酶MMP1和MMP13表达;裸鼠皮下成瘤实验检测C1s对裸鼠移植瘤生长的影响,免疫组织化学法检测移植瘤中CD34表达,分析肿瘤微血管的形成。结果:ESCC组织中C1S mRNA表达明显高于ANTs,敲低C1s可明显抑制ESCC细胞的增殖、迁移、细胞-基质黏附以及裸鼠移植瘤的生长,而过表达C1S则具有相反的效果;C1s敲低的ESCC细胞TE-1中MMP1和MMP13的表达降低;与对照组相比,C1s过表达组移植瘤中的微血管更加丰富。结论:C1s在ESCC组织中显著上调,并促进ESCC细胞的增殖、迁移、细胞-基质黏附以及裸鼠移植瘤的生长。C1s可能在ESCC发生发展中发挥重要作用。
任玲陈昱伶徐凤敏蒙春梅李倩倩胡为民
关键词:食管鳞状细胞癌增殖迁移
血浆网膜素与2型糖尿病的相关性
研究背景:随着社会经济的飞速发展,人们生活水平迅速提高,伴随人们饮食结构的改变,非感染性疾病已经逐渐威胁着人类健康,尤其是糖尿病患病率日益剧增。糖尿病发病后呈现病情进展快速、后果很严重的特点,对人们的健康造成了巨大的危害...
李雪璐孙娜严宗逊常晋霞胡为民
关键词:2型糖尿病酶联免疫吸附法
文献传递
T细胞协同抑制分子研究追踪及临床应用前景被引量:2
2009年
T细胞活化需要双信号:T细胞抗原受体(T cell antigen receptor,TCR)识别由抗原提呈细胞(antigen-presenting cell,APC)通过MHC分子提呈的抗原肽形成第一信号,T细胞与APC表面的协同刺激分子(co-stimulatory molecule)相互作用形成第二信号(协同刺激信号)。T细胞活化后,出现协同抑制分子(co-inhibitory molecule)的表达或上调,负性调节T细胞的功能。协同刺激分子和协同抑制分子来源于两个家族———B7:CD28家族和TNF:TNFR家族,它们在适当的时间和部位表达,为T细胞提供正性信号和负性信号,调控T细胞的活化、增殖、分化和功能成熟。协同抑制分子在T细胞的动态平衡中起重要的作用。在移植排斥反应和自身免疫性疾病中,T细胞向着过度活化方向发展,如果能够通过诱导协同抑制分子过表达加强抑制作用,将可能在新的高度,重新建立平衡关系;反之,在肿瘤、持续性病毒感染等疾病中,T细胞的功能可能被肿瘤或病毒感染细胞表达的协同抑制分子所抑制,通过阻断抑制信号,将有利于肿瘤的治疗。因此,以协同抑制分子为靶,为上述疾病的治疗提供了新的思路。人工制备的与协同抑制分子相关的药物,包括单克隆抗体、与免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)重链形成的融合蛋白,以及病毒表达载体,将为上述疾病的治疗提供手段。目前已有多种相关药物正处于临床实验阶段。本文就新发现的协同抑制分子、协同抑制分子的新认识作一追踪并介绍其临床应用前景。
胡为民
关键词:T细胞协同刺激分子肿瘤
表皮生长因子对食管鳞癌细胞Eca109细胞周期及其调控因子的影响被引量:1
2015年
目的:探讨表皮生长因子(EGF)对食管鳞癌细胞Eca109细胞周期及相关调控因子的影响。方法:20 ng/ml重组人EGF(rh EGF)作用于血清饥饿的Eca109细胞24 h,采用流式细胞术检测EGF对Eca109细胞周期的影响,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测p21CIP1/WAF1(p21)、p27KIP1(p27)mRNA的表达情况,Western blot检测p21、p27蛋白的表达情况。结果:EGF组和对照组G1期细胞所占比例分别为(54.90±0.82)%和(65.94±0.74)%(P<0.01);qRTPCR结果显示p21 mRNA表达水平EGF组明显高于对照组,p27 mRNA表达水平EGF组明显低于对照组(P<0.01);Western blot结果显示,p21蛋白表达水平EGF组明显高于对照组,p27蛋白表达水平EGF组明显低于对照组(P<0.01)。结论:EGF有利于Eca109细胞从G1期过渡到S期,促进细胞增殖,可能与调节p21、p27的mRNA和蛋白的表达相关。
李倩倩朱红王朝莉黎仕娟胡为民
关键词:表皮生长因子食管鳞癌ECA109细胞细胞周期P21CIP1/WAF1
人外周血单个核细胞与猪内皮细胞相互作用表达上调基因的鉴定
2003年
目的 探讨人外周血单个核细胞与猪内皮细胞相互作用后基因表达的变化。方法 人外周血单个核细胞 (PBMC)与猪内皮细胞系 PIEC共培养 18h,对照组为未共培养的 PBMC和 PIEC。合成两组细胞的 c DNA进行抑制消减杂交 (SSH)。共培养中上调的 c DNA用 p GEM- T Easy载体进行 T/ A克隆 ,然后测序。用 BL AST程序进行同源性分析。结果 经过 SSH和克隆 ,获得一包含 30 0克隆的消减文库。从文库中随机挑取 2 4个克隆进行测序 ,并在 Gen Bank中进行同源性比较。其中 4个为已知的人的基因片段 ,8个为猪的表达序列标记 (EST) ,9个片段与人的基因有高度的同源性 ,3个片段未检索到相匹配的同源性序列。
胡为民程惊秋李胜富卢晓风万琳李幼平
关键词:外周血单个核细胞内皮细胞抑制消减杂交异种移植
实验学教学体系与学科群教学体系改革的探索被引量:4
2009年
以实验教学中心独立行课的实验学教学体系改革,可强化学生基本技能的培养,突出设计性、综合性实验,有利于学生综合素质的培养,有利于开放性实验与学生课外科研活动的开展,有利于年轻教师业务素质的综合培养,有利于资源共享,其考核能反映学生的真实水平。单纯实验学教学体系导致部分教师重理论轻实验,导致一定的理论与实验脱节现象,不利于年轻教师的管理。学科群教学体系有利于教学管理,有利于教师的管理与培养,有利于学科建设。
杨宗琪杨继文胡为民张仁刚赵勇夏建平陶建华
关键词:实验学学科群教学体系
提问式教学在免疫学课堂中的应用被引量:5
2017年
免疫学理论性、系统性强,内容较难理解。因此,高效的教学方式对学好这门学科尤为重要。提问式教学可行性、开放性较好,是抓住学生注意力、培养学习兴趣、促进学生主动思考的重要方法。但教师在教学中对提问的设计、学生回答的分析引导、知识的串联总结和拓展课前准备不够充分,是提问式教学不能发挥最大作用的重要因素,只有充分做好这几个环节才能使其在课堂教学中达到最佳效果。
李倩倩钟雪梅胡为民
关键词:教学方法免疫学
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