张腾飞
- 作品数：27 被引量：127H指数：6
- 供职机构：上海第二医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 干扰素-γ基因转导前后人肝癌细胞HepG1表型变化及基因表达图谱差异的研究被引量：4
- 2001年
- 目的：比较人肝癌细胞经干扰素（ＩＦＮ）－γ基因转导前后细胞表型及基因表达图谱的差异。方法：①用扫描电镜、流式细胞仪等方法观察ＩＦＮ－γ基因转导前后人肝癌细胞ＨｅｐＧ１表型的变化；③应用微阵列膜片分别与未转导及转导了ＩＦＮ－γ基因的ＨｅｐＧ１ ｍＲＮＡ进行杂交，同时设一转导空白载体ＬＸＳＮ的ＨｅｐＧ１ ｍＲＮＡ与膜片杂交作为对照，比较杂交信号，获得表达差异的基因。结果：①ＩＦＮ－γ基因转导的ＨｅｐＧ１细胞生长速度减慢，表面绒毛结构数量增多，绒毛变细、变长，ＨＬＡⅠ类和Ⅱ类分子表达增高；②ＩＦＮ－γ基因转导后，ＨｅｐＧ１细胞有多种基因的表达发生变化，其中一些基因较未转导ＩＦＮ－γ时表达增高，一些较未转导ＩＦＮ－γ时表达减低。表达发生变化的基因主要为与细胞周期和细胞凋亡相关的基因。结论：ＩＦＮ－γ基因修饰ＨｅｐＧ１细胞后使细胞表型发生变化，并且在基因表达上也发生改变。运用微阵列技术为进一步了解这些基因的相互关系及其与肿瘤生物学行为的关系奠定了基础，也可为优化肿瘤免疫基因治疗提供线索。
- 蒋小陵杨劲松张腾飞陈诗书
- 关键词：肝肿瘤基因转导基因治疗
- 细胞因子基因导入人肿瘤细胞的方法及鉴定被引量：4
- 1997年
- 从人外周血单核细胞中抽提总RNA为模板，分别用5’含EcoRⅠ、3’含BamHⅠ限制性酶切位点的细胞因子基因特异引物合成合信号肽全长IL－2、γ－IFN及α－TNFcDNA．然后将这些细胞因子cDNA分别重组入含筛选标记基因Neo的逆转录病毒载体LXSN中．采用磷酸钙共沉淀法转染逆转录病毒包装细胞系PA317．分别收集到含IFN－γ、TNF－α和IL－2基因的缺陷型逆转录病毒上清及只具空白载体质粒pLXSN的病毒上清这四种病毒颗粒用于导入人肝癌、胃癌细胞，可获得单克隆化的细胞因子基因修饰株PCR，Southern，RT－PCR及Northern杂交证明，有相应细胞因子及筛选标记基因的转入和表达生物活性分析也证实各基因修饰株细胞培养上清液中有一定活性的相应细胞因子．
- 张腾飞陈诗书
- 关键词：肿瘤细胞因子基因导入癌细胞基因治疗
- ^(60)Co辐射后IL-2基因修饰肿瘤细胞生物学行为的改变被引量：4
- 2000年
- 目的研究IL - 2基因修饰人肿瘤细胞生物学行为是否因辐射而发生变化。 方法分别从细胞形态结构、MHC分子表达、整合的基因IL - 2基因是否丢失、能否保持mRNA表达、能否分泌表达生物活性的IL - 2等方面进行了实验。结果未见整合的IL - 2基因丢失 ,能表达IL - 2mRNA且在一定时间内持续分泌具有生物活性的IL - 2 ;细胞膜表面MHC分子无明显改变 ;细胞形态结构无明显变化。结论经60 Co辐射修饰的肿瘤细胞致瘤性消失 ,但在一定时间内能分泌IL - 2 ,这为开展基因工程“瘤苗”的临床应用提供了依据。
- 徐荣婷张腾飞胡亮历兴君杨红英陈诗书
- 关键词：IL-2基因瘤苗致瘤性
- 基因修饰人肝癌和胃癌“瘤苗”及实验性肿瘤联合基因治疗被引量：1
- 2004年
- 恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定.治疗策略也不下十余种,但何种策略为佳尚无定论.目前采用的策略多数为单一基因治疗,而肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的.本研究建立一种细胞因子基因工程人肝癌和胃癌细胞"瘤苗",用于经手术切除的肝癌或胃癌患者,消灭微小残存癌细胞,并预防复发转移;或用于无手术指征的患者或手术后复发患者的辅助性治疗措施.探索多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究.首先克隆一系列的治疗基因,构建不同载体及调控元件;然后进行不同基因的联合治疗作用,并与放射治疗相结合;最后还筛选新的肿瘤治疗候选基因,旨在为临床提供更有效的肿瘤基因治疗策略和方案.
- 陈诗书钱关祥夏爱娣张腾飞钱书兵魏道严徐荣婷胡亮王克敏程枫于丽莉杨红英许伟榕唐展云朱敏
- 关键词：瘤苗人肝癌实验性肿瘤联合基因基因修饰
- γ-干扰素基因的导入及删除对人肿瘤细胞HLA-Ⅰ、Ⅱ类抗原表达的影响被引量：8
- 1999年
- 目的：制备有效的细胞因子基因修饰的肿瘤细胞作为“瘤苗”。方法：用缺陷型逆转录病毒作为载体将人γ－干扰素（ＩＦ－γ）含信号肽ｃＤＮＡ转导入人胃癌细胞株ＭＫＮ、４５，经Ｇ４１８筛选后得－ＩＦＮ－γ基因修饰株ＭＫＮ－４５－ＩＦＮ。ＰＣＲ方法测得有标记基因ＮｅｏＲ及ＩＦＮ－γ基因的存在，但经３个月连续传代培养后，ＰＣＲ仅能检测到ＮｅｏＲ基因，而未检出ＩＦＮ－γ基因、ＨＬＡ－Ⅰ、Ⅱ类单抗间接免疫荧光法流式细胞仪测定了上述相应时期ＩＦＮ－γ基因修饰肿瘤细胞ＨＬＡ－Ｉ、Ⅱ类抗原的表达。结果：随着ＩＦＮ－γ基因在染色体中被删除，ＨＬＡ－Ⅰ、Ⅱ类的表达又恢复至与ＭＫＮ－４５相同的水平。结论：为确保ＩＦＮ－γ基因的作用，应不断检测其基因的存在。
- 张腾飞陈诗书
- 关键词：Γ-干扰素基因
- hTNF-α基因转导的小鼠肝癌细胞株H22的某些生物学行为
- 1999年
- 目的：为制备有效的细胞因子基因修饰瘤苗，观察人肿瘤坏死因子α（ｈＴＮＦ－α）基因修饰前后是否有生物学行为的改变。方法：将含信号肽的ｈＴＮＦ－α ｃＤＮＡ基因用逆转录病毒载体导入小鼠肝癌细胞株Ｈ２２中，用Ｇ４１８筛选、克隆和扩增。经分子生物学方法和细胞生物学方法对基因修饰的正确性、表达和分泌进行了鉴定。结果：ｈＴＮＦ－α基因整合至Ｈ２２细胞基因组ＤＮＡ中，未发生重排，并表达外源ｈＴＮＦ－α。ｈＴＮＦ－α基因修饰的肿瘤细胞表面形态有很大的变化。有些经ｈＴＮＦ－α基因修饰的Ｈ２２克隆，Ｈ－２Ｉ类抗原表达增强，提高肿瘤细胞免疫原性，间接诱导机体抗肿瘤免疫。结论：为进一步选择较好的Ｈ２２－ｈＴＮＦ－α克隆进行动物体内试验打下基础。
- 孙欲晓张腾飞陈诗书
- 关键词：瘤苗人肿瘤坏死因子Α免疫原性
- 细胞因子基因转导的人肿瘤细胞免疫原性及致瘤性研究
- 1995年
- 用鼠抗人XHLA-A，B，C单抗W6／32及HLA-DR单抗HB55与细胞因子基因修饰肿瘤细胞结合，PAFITC兔抗鼠k为二抗，间接免疫荧光法流式细胞仪测定了HLA-Ⅰ，Ⅱ类抗原表达．与未修饰及空白载体修饰肿瘤细胞相比，基因修饰肿瘤细胞的HLA-Ⅰ，Ⅱ类抗原表达有明显增加，其中IFN-γ作用最强，
- 张腾飞陈诗书
- 关键词：细胞因子抗原表达人肿瘤细胞致瘤性基因修饰基因转导
- TNF-α基因修饰瘤苗的抗肿瘤作用研究被引量：3
- 1997年
- 本实验观察比较了H22肿瘤细胞TNF一x基因修饰前后的体内致瘤性及经照射后作为瘤苗的治疗作用.结果表明在实验剂量范围内,H22-TNF-x细胞较H22原肿瘤细胞致瘤性下降,且经照射后作为瘤苗对一定剂量的原肿瘤细胞有治疗作用.为基因修饰瘤苗的进一步研究打下基础.
- 孙欲晓张腾飞陈诗书
- 关键词：瘤苗Α-肿瘤坏死因子致瘤性免疫原性
- 基因修饰肿瘤细胞的研究进展被引量：3
- 1994年
- 基因修饰肿瘤细胞的研究进展（文献综述）上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室人类基因治疗中心（上海２０００２５）张腾飞，陈诗书综述近年来Ｔ细胞识别抗原的分子基础及控制Ｔ细胞活化和特异性杀伤功能的各种途径已有了较多的了解。因此，我们现在可以制定一些...
- 张腾飞陈诗书
- 关键词：基因修饰肿瘤细胞
- 细胞因子基因转导的人肿瘤细胞免疫原性及致瘤性研究被引量：12
- 1996年
- 用鼠抗人ＨＬＡ－Ａ，Ｂ，Ｃ单抗Ｗ６／３２及ＨＬＡ－ＤＲ单抗ＨＢ５５与细胞因子基因修饰肿瘤细胞结合，以ＦＩＴＣ－免抗鼠Ｉｇ为二抗，间接免疫荧光法流式细胞仪测定了ＨＬＡ－Ⅰ、Ⅱ类抗原表达，与未修饰及空白载体修饰肿瘤细胞相比，基因修饰肿瘤细胞的ＨＬＡＩ－Ⅰ、Ⅱ类抗原表达有明显增加，其中ＩＰＮ－γ作用最强，分别将基因修饰及未修饰肿瘤细胞接３×１０６细胞／２００μｌ／只接种于Ｂａｌｂ／Ｃ棵鼠右前肢皮下，逐周观察接种肿瘤细胞的生长。结果表明，细胞因子基因修饰肿瘤细胞的致瘤性都有显著下降甚至消失，这为“细胞因子基因工程疫苗”的临床应用提供了一定的依据。
- 张腾飞陈诗书
- 关键词：细胞因子基因HLA-DR免疫疗法
