朱明
- 作品数：15 被引量：37H指数：3
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- 高糖预处理内皮细胞条件培养基对脐带间充质干细胞增殖和凋亡的影响
- 为了探讨体外高糖诱发内皮细胞损伤而继发性对人脐带间充质干细胞(humanumbilical cord-derived mesenchymal stem cell,hUC-MSC)增殖和凋亡的影响及其机制,该研究采用酶消化...
- 徐祥李循龙皎月朱明邢伟黄宏
- 关键词：人脐静脉内皮细胞人脐带间充质干细胞
- Akt/mTOR信号通路介导低浓度过氧化氢对小鼠表皮干细胞的促增殖作用
- 2015年
- 目的:探讨低浓度过氧化氢(H_2O_2)对小鼠表皮干细胞(mESCs)体外促增殖作用及其机制。方法:以酶消化法分离培养mESCs。免疫荧光技术鉴定第3代mESCsβ1整合素和角蛋白19(K19)表达,流式细胞术鉴定CD34的表达;以不同低浓度H_2O_2(0、25、50、100、150和200μmol/L)处理mESCs 48 h和72h。同时,另一组实验中在用不同浓度H_2O_2刺激的同时加入或不加入雷帕霉素(50 ng/ml)培养48 h。甲氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;Western Blot法检测H_2O_2刺激小鼠mESCs 48 h Akt/mTOR信号通路关键蛋白mTOR、Akt、P70s6k、e IF4E、4E-BP1、p-mTOR、p-Akt、p-P70s6k、p-eIF4E、p-4E-BP1和细胞增殖相关蛋白Cyclin D1、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:免疫荧光技术检测分离培养的mESCs细胞100%表达β1整合素和K19;流式细胞术检测99.8%的mESCs表达CD34;MTT检测结果显示,48 h和72 h时25μmol/L和50μmol/L的H_2O_2可以有效地促进mESCs的增殖(P<0.05),而雷帕霉素能拮抗这一效应;但当H_2O_2浓度为200μmol/L时,则显著抑制mESCs增殖(P<0.05);免疫印迹结果显示低浓度H_2O_2处理mESCs 48 h后,Akt/mTOR信号通路关键蛋白mTOR、Akt、eIF4E、4E-BP1水平及其磷酸化水平(p-mTOR、p-eIF4E、p-4E-BP1)显著增加(P<0.05或P<0.01),当H_2O_2浓度为200μmol/L时则抑制其表达(P<0.05或P<0.01)。此外,50μmol/L的H_2O_2能上调细胞周期蛋白Cyclin D1和PCNA的表达,而雷帕霉素能拮抗这一作用。结论:低浓度的H_2O_2对mESCs有明显的促增殖作用,并且能激活Akt/mTOR通路。而低浓度H_2O_2对mESCs的促增殖作用至少部分是通过活化Akt/mTOR信号通路介导的。
- 亓俊华聂刚吴梅刘晓萍陈民佳朱明袁培松张娅宋昱庆郭韡邢伟李向云罗东林黄宏徐祥
- 关键词：表皮干细胞过氧化氢
- 姜黄素抗肾纤维化的分子生物学机制实验研究被引量：8
- 2016年
- 目的探讨姜黄素抗肾纤维化的分子生物学机制，为临床治疗提供可靠的实验依据。方法以人肾小管上皮细胞（HKC）为研究对象，采用不同浓度的姜黄素（0、0．780、1．563、3．125、6．250、12．500、25．000、50．000和100．000p．mol／L）刺激HKC72h，倒置相差显微镜下观察细胞形态变化，并应用MTT比色法检测姜黄素对HKC生长的影响；应用不同浓度TGF-β1（0、1、5、10ng／mL）单独或联合姜黄素（6．250、12．500、25．000、50．000μmol／L和100．000μmol／L）共同刺激HKC细胞72h，观察细胞形态变化，应用逆转录PCR（RT-PCR）检测TGF-β1、骨形态发生蛋白-7（BMP-7）和Ⅰ型胶原基因表达变化。结果HKC贴壁生长，呈铺路石样外观。姜黄素刺激对细胞形态无影响；TGF-β1刺激能明显促进细胞由上皮样形态向纤维样细胞形态转化，且发生形态转变的细胞数量和TGF-β1基因表达呈TGF-β1浓度依赖性增加（P〈0．05，P〈0．01）；MTT结果显示：姜黄素在3．125-25．000μmol／L浓度范围内，能显著促进HKC增殖（P〈0．05，P〈0．01）；姜黄素能对抗TGF-β1诱导的细胞形态转变，以12．500-50．000μmol／L的姜黄素作用最明显，同时，下调TGF-β1基因和蛋白的表达，相反上调BMP-7基因和蛋白表达，并伴随着Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达下降（P〈0．05，P〈0．01）。结论姜黄素能促进HKC增殖并维持其表型，能对抗TGF-β1诱导的HKc向梭形细胞转化，抑制细胞上皮TGF-β1和Ⅰ型胶原的表达，而促进BMP-7表达。
- 朱方强陈民佳朱明徐祥赵洪雯刘宏余荣杰吴雄飞黄宏
- 关键词：肾疾病姜黄素骨形态发生蛋白-7
- 蛋白激酶B／哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路关键蛋白在糖尿病大鼠皮肤组织和创面组织中的表达研究被引量：2
- 2016年
- 目的探讨糖尿病大鼠皮肤组织和创面组织中蛋白激酶B／哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Akt／mTOR）信号通路关键蛋白的表达变化，并探讨相关机制。方法选取7～8周龄SD大鼠78只，按照随机数字表法分为糖尿病组和非糖尿病组，每组39只。糖尿病组大鼠一次性快速腹腔注射20mg／mL链脲佐菌素液（65mg／kg，采用柠檬酸缓冲液配制），建立糖尿病模型；非糖尿病组大鼠同法注射等量的柠檬酸缓冲液。于注射后1～8周2组每周各取3只大鼠，于背部切取约1．0cm×1．0cm的全层皮肤，行HE染色观测表皮厚度。注射后1周，2组各取15只大鼠同前取皮造成全层皮肤缺损，于伤后即刻及1、3、5、7d每组各取3只大鼠处死，伤后即刻每只大鼠沿创缘切取1块皮肤组织、伤后1～7d每只大鼠切取创面组织，取一部分组织采用蛋白质印迹法检测皮肤组织及创面组织中的Akt、磷酸化Akt、mTOR、磷酸化mTOR的蛋白表达水平；取剩余组织行免疫荧光染色，观察皮肤组织及创面组织中的磷酸化Akt与波形蛋白表达。对数据行析因设计方差分析、多重t检验。结果（1）注射后1、2周，2组大鼠表皮厚度相似（t值分别为0．25、1．33，P值均大于0．05）；与非糖尿病组比较，注射后3周起糖尿病组大鼠表皮厚度明显变薄（t值为4．44～9．71，P〈0．05或P〈0．01）。（2）与伤后即刻皮肤组织比较，非糖尿病组大鼠伤后1～7d创面组织Akt、磷酸化Akt、roTOR（伤后3d除外）及磷酸化mTOR蛋白表达水平明显升高，t值为3．75～21．44，P〈0．05或P〈0．01。与伤后即刻皮肤组织比较，糖尿病组大鼠伤后1～7d创面组织中Akt、roTOR蛋白表达水平（伤后ldmTOR除外）无明显变化（t值为0．03～2．32，P值均大于0．05）；伤后1～7d创面组织中磷酸化Akt（伤后1d除外）、磷酸化roTOR蛋白表达水平均明显升高（t值为3．79～8．11，P〈0．
- 黄宏邱伟朱明张娅崔文慧邢伟李向云安天琛陈民佳郭韡徐祥
- 关键词：皮肤
- 间充质干细胞治疗皮肤创伤的研究进展被引量：5
- 2015年
- 间充质干细胞因具有易于分离培养获得、低免疫源性、多向分化潜能及旁分泌功能等特征,而被越来越多地用于组织再生与创伤修复研究,并显现了广阔的应用前景。间充质干细胞治疗皮肤创伤的研究已开展了十余年,无论动物模型或是临床病人,均显示了不错的疗效。然而,该治疗仍面临很多问题和挑战,离转化为临床常规治疗手段尚有距离。该文拟对间充质干细胞在皮肤创伤修复中的作用及其机制和提高疗效的手段等方面作一综述,并探讨面临的问题和未来的研究方向。
- 朱明肖南黄宏徐祥
- 关键词：间充质干细胞皮肤创伤创伤修复
- 低浓度H_2O_2预处理增强小鼠BMSCs抗氧化应激损伤能力被引量：2
- 2017年
- 目的探讨PI3K/Akt/m TOR信号通路介导的低浓度过氧化氢(H_2O_2)预处理增强骨髓间充质干细胞(BMSCs)抗氧化应激损伤的作用及机制。方法通过差速贴壁法分离培养小鼠BMSCs。BMSCs经或不经低浓度(50μmol/L)H_2O_2预处理12 h,再暴露于不同高浓度H_2O_2(200、250、300和500μmol/L)刺激24 h后,流式细胞术检测BMSCs凋亡;低浓度H_2O_2预处理12 h再暴露于300μmol/L H_2O_224 h后,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3和cleaved-caspase-3的表达以及对PI3K/Akt/m TOR信号通路的影响。结果 H_2O_2呈浓度依赖性诱导BMSCs凋亡,50μmol/L H_2O_2预处理可降低200~500μmol/L诱导的BMSCs凋亡率,以及能降低300μmol/L诱导的促凋亡蛋白Bax和cleaved-caspase-3的上调和抗凋亡蛋白Bcl-2及磷酸化Akt和m TOR蛋白的表达的下调(P<0.05,P<0.01);PI3K抑制剂LY294002可明显地阻断H_2O_2预处理引起的上述变化。结论低浓度H_2O_2预处理通过活化PI3K/Akt/m TOR信号通路增强骨髓间充质干细胞的抗氧化应激损伤能力。
- 宋昱庆陈民佳李战朱明邱伟黄宏徐祥
- 关键词：骨髓间充质干细胞氧化应激损伤预处理
- 干细胞预处理及其保护机制的研究进展被引量：1
- 2017年
- 干细胞移植治疗为临床疾病治疗开辟了新的天地,极具前景和希望,并取得了不错进展,然而,目前这一技术的应用却面临两大瓶颈问题:移植干细胞靶向性差和到达损伤部位存活率低下,严重阻碍了这一技术在临床广泛应用。而干细胞预处理为解决这两大难题带来了新希望,研究证实通过预处理干细胞可以明显改善其迁移、归巢和存活能力,为此,本文将对其相关研究作一综述。
- 黄宏邱伟陈民佳张娅安天琛朱明朱方强
- 关键词：干细胞预处理
- 川芎嗪抑制mTOR信号通路介导的帽依赖性翻译而诱导HRPC细胞凋亡被引量：3
- 2016年
- 目的明确川芎嗪(Ligustrazine,TMP)对激素抵抗性前列腺癌(hormone-refractory prostate cancer,HRPC)细胞PC-3的促凋亡效应并探讨其分子机制,评价TMP对正常前列腺上皮细胞RWPE-1的影响。方法分别用不同终浓度的TMP处理PC-3细胞和RWPE-1细胞48、72 h后,行MTT实验及Annexin V/PI染色法评价TMP对这两种细胞活性及凋亡的影响;Western blot检测TMP对PC-3细胞中mTOR信号通路活化情况及凋亡相关蛋白表达的影响;pull-down及荧光素酶报告基因实验研究TMP对PC-3细胞中翻译起始复合物形成及帽依赖性翻译的影响。结果 TMP对RWPE-1细胞的活性及存活无显著影响,但以剂量依赖及时间依赖的方式抑制PC-3细胞的活性,当TMP浓度≥25μmol/L时,差异具有统计学意义(P<0.05);与0μmol/L处理组相比,50、100μmol/L TMP处理24 h即可显著上调PC-3细胞中Bax/Bcl-2比值及Caspase-3的表达,处理后48 h检测发现PC-3细胞发生明显的凋亡(P<0.01);与0μmol/L处理组相比,50、100μmol/L TMP显著抑制PC-3细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)及mTOR下游关键蛋白4EBP1和p70S6K的磷酸化,影响翻译起始复合物eIF4F的形成,进而抑制相关蛋白质的帽依赖性翻译及合成。结论 TMP可通过抑制mTOR信号通路的活化来降低HRPC细胞中增殖及抗凋亡相关蛋白的帽依赖性翻译,进而促进其凋亡。
- 刘中禄朱明卢汀郭韡邢伟安天琛李向云何骁赵榕森袁洪峰黄宏
- 关键词：川芎嗪激素抵抗性前列腺癌细胞凋亡
- 低浓度H2O2预处理增强骨髓间充质干细胞活力
- 目的：探讨过氧化氢(H2O2)预处理增强骨髓间充质干细胞(BMSCs)存活和抗凋亡能力的作用及机制.方法：分离、培养、鉴定小鼠BMSCs.观察不同低浓度H2O2 处理BMSCs 48 h 后细胞的增殖,以及SDF-1 及...
- 黄宏朱明邢伟陈民佳徐祥邱伟郭韡
- 关键词：骨髓间充质干细胞过氧化氢细胞保护
- 高糖预处理内皮细胞条件培养基对脐带间充质干细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2015年
- 为了探讨体外高糖诱发内皮细胞损伤而继发性对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cell,h UC-MSC)增殖和凋亡的影响及其机制,该研究采用酶消化法分离培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,h UVEC),制备不同糖浓度(5,30 mmol/L)培养h UVECs 24,48,72 h条件培养基(conditioned medium,CM);内皮细胞条件培养基(h UVEC-CM)培养h UC-MSC 3 d,实时细胞监测系统检测h UC-MSC的增殖;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞的凋亡情况;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Cl-Caspase3的表达。结果显示,条件培养基培养h UC-MSC 3 d后,与对照组相比,h UVEC-CM(HG)组h UC-MSC的增殖活力明显降低,凋亡率显著升高,凋亡相关蛋白Bcl-2的表达明显减少,Bax及Cl-Caspase3的表达明显增加(P<0.05)。以上表明,h UVEC-CM(HG)能抑制h UC-MSC的增殖,并通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cl-Caspase3的表达诱导h UC-MSC凋亡。
- 李循龙皎月朱明邢伟郭黄宏徐祥
- 关键词：人脐静脉内皮细胞人脐带间充质干细胞
