阎玲梅
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：北京协和医学院更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金云南省社会发展科技计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 重组人甲状旁腺激素肽(1-34)在大肠杆菌中的高效融合表达及纯化被引量：3
- 2006年
- 人工合成人甲状旁腺激素1～34肽段(PTH134)的cDNA序列,克隆到大肠杆菌蛋白表达载体pThioHis中,获得了高表达菌株。经发酵、破菌、金属螯合层析、反相层析和凝胶层析后获得了纯度大于95%的hPTH134,hPTH134肽N端测序和质谱分子量测定结果与天然PTH134一致。生物学活性研究表明,hPTH134在体外具有刺激腺苷酸环化酶的作用。
- 李健峰肖红剑姬秋彦李智华龙海亭阎玲梅罗娜徐维明
- 关键词：人甲状旁腺激素大肠杆菌
- Ⅱ型登革病毒D01090株在人胚肺二倍体细胞KMB17上适应株选育及初步鉴定
- 2012年
- 目的:选育能在人胚肺二倍体细胞KMB17上稳定增殖的Ⅱ型登革病毒适应株,为研发以人源性细胞为基质的登革疫苗候选株奠定基础。方法:将Ⅱ型登革病毒中国株D01090提取病毒基因组,通过RT-PCR法进行登革病毒型别鉴定后,在C6/36和Vero细胞上进行毒种扩增和滴度测定;将D01090毒株以4.0MOI接种KMB17细胞并反复传代至病毒完全适应在细胞内扩增,并连续传代10代,选育出良好的KMB17细胞适应株;病毒培养液经蔗糖梯度离心和超速离心后获得高浓度病毒液,接种KMB17细胞后通过透射电镜超薄切片检测细胞的病理变化;然后经过三轮蚀斑纯化筛选出纯化病毒株,免疫荧光法检测病毒纯化株的抗原性。结果:以Ⅱ型登革病毒中国株D01090基因组为模板,能扩增出511bp的登革病毒特异基因和119bp的Ⅱ型登革病毒型特异性基因。病毒经C6/36细胞扩增后滴度达4.5CCID50/ml,感染KMB17细胞至第三代可产生明显的细胞病变(cytopathic effect,CPE),连续传10代细胞病变速度逐渐增快,至第10代达到增殖高峰,病毒滴度达5.0CCID50/ml;将病毒感染6天后病变达+++的KMB17细胞进行超薄切片后经透射电镜观察细胞的病理变化,镜下可观察到内质网中新组装成的病毒颗粒,细胞周围产生很多分裂的小碎片,伴有游离出胞的病毒;三轮蚀斑纯化后筛选出纯化克隆,免疫荧光法检测病毒的抗原性呈阳性。结论选育出了能稳定传代且病毒扩增量高的Ⅱ型登革病毒KMB17细胞适应株,经蚀斑纯化后仍保持较好的抗原性。
- 赵玉娇潘玥阎玲梅岳耀斐杨丽娟孙强明
- 关键词：生物学特性
- 人白细胞介素11的定点聚乙二醇修饰被引量：6
- 2009年
- 利用hIL-11无Cys残基这一特点,通过定点突变将一个Cys残基引入hIL-11的N末端。然后,利用与Cys巯基特异性反应的mPEG-马来酰亚胺将mPEG偶联到预先选定的位点,经层析纯化得到hIL-11的定点PEG修饰物。利用依赖型细胞株7TD1测定其生物学活性,结果表明,其体外生物学活性保持原有hIL-11活性的30%左右。定点聚乙二醇修饰方法为定向改造hIL-11,提高其药效的应用研究打下基础。
- 李智华胡满仓阎玲梅赵玉娇杨旭彭正华徐维明李健峰
- 关键词：聚乙二醇化学修饰
- 反相高效液相色谱法测定甲肝灭活疫苗中的2-苯氧基乙醇含量被引量：1
- 2006年
- 目的建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC法)测定甲型肝炎灭活疫苗中2-苯氧基乙醇的含量。方法采用C18柱,以50%乙腈为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为270nm,柱温为室温。以外标法测定含量。结果2-苯氧基乙醇的浓度线性范围是0.55～111μg/mL(r=0.9995),平均回收率为100.37%,RSD为1.77%。结论RP-HPLC法可用于甲型肝炎灭活疫苗中2-苯氧基乙醇的含量测定。
- 李华柯华昕阎玲梅周文晶谢忠平
- 关键词：反相高效液相色谱法甲型肝炎灭活疫苗
