目的:探究恩格列净(EMPA)调控人肾小球微血管内皮细胞(HRGEC)增殖、凋亡的作用机制。方法:30mmoL/L的葡萄糖诱导HRGEC建立高糖环境下的肾损伤细胞模型。恩格列净(250、500、1000nmoL/L)处理受损细胞。脂质体法将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-497-3p组(转染miR-497-3p)、si-NC组(转染si-NC)、si-鱼糖基磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D1(GPLD1)组(转染si-GPLD1)、EMPA+miR-497-3p+pcDNA组(共转染miR-497-3p和pcDNA)、EMPA+miR-497-3p+pcDNA-GPLD1组(共转染miR-497-3p和pcDNA-GPLD1)转染HRGEC细胞,并用30mmoL/L的葡萄糖或500nmoL/L恩格列净处理。细胞计数试剂盒(CCK-8)、流式细胞术检测细胞增殖率、凋亡率。蛋白免疫印迹(WB)实验检测细胞GPLD1、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(P21)、半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3、Caspase-9蛋白表达。双荧光素酶报告实验、RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation assay,RIP)实验检测细胞中miR-497-3p与GPLD1的结合力。结果:与NG组相比,HG组HRGEC细胞增殖率显著降低,凋亡率显著升高,miR-497-3p表达显著降低(P<0.05);与HG组相比,恩格列净(250、500、1000nmoL/L)组细胞增殖率显著升高,凋亡率显著降低,miR-497-3p表达显著升高(P<0.05),选出恩格列净的最适浓度500nmoL/L。miR-497-3p显著抑制野生型GPLD1细胞的荧光活性,促进Ago2-GPLD1的表达,负向调控GPLD1的蛋白表达。过表达miR-497-3p、敲减GPLD1具有相似的促进高糖诱导HRGEC细胞增殖,抑制凋亡的作用,并上调PCNA蛋白,下调P21、Caspase-3、Caspase-9蛋白。过表达GPLD1显著削弱恩格列净、过表达miR-497-3p对高糖诱导HRGEC细胞的增殖、凋亡调控作用。结论:恩格列净促进高糖诱导HRGEC细胞增殖,抑制凋亡,其机制与调控miR-497-3p/GPLD1信号通路相关。
目的探讨恩格列净联合利拉鲁肽对肥胖型2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)患者糖脂代谢及血清分泌型卷曲相关蛋白5(secreted frizzled-related protein 5,SFRP5)、鸢尾素(Irisin)、总脂联素(total adiponectin,tAPN)水平的调节效应。方法选取2019年3月至2021年3月邯郸市中心医院肥胖型T2DM患者116例,以随机抽签法分为观察组(n=58)、对照组(n=58)。对照组给予利拉鲁肽治疗,观察组在对照组基础上联合恩格列净治疗,均治疗3个月。比较两组治疗前、治疗3个月后减重有关指标[体重、腰围、体重指数(body mass index,BMI)]、糖代谢指标[糖化血红蛋白(glycated hemoglobin,HbA1c)、空腹血糖(fasting blood glucose,FPG)、餐后2 h血糖(2 h postprandial blood glucose,2 hPG)]、脂代谢指标[低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、三酰甘油(triglycerides,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)]、胰岛素敏感性有关指标[稳态模型胰岛β细胞功能指数(homeostasis model isletβcell function index,HOMA-β)、稳态模型胰岛素抵抗指数(homeostasis model insulin resistance index,HOMA-IR)]、血清SFRP5、Irisin、tAPN水平,并统计不良反应发生情况。结果观察组与对照组相比治疗3个月后体重[(74.93±2.68)kg比(78.21±3.47)kg]、腰围[(90.40±2.17)cm比(93.28±2.53)cm]、BMI[(26.57±0.94)kg/m2比(27.94±1.06)kg/m^(2)]、HbA1c[(6.03±0.59)%比(6.76±0.68)%]、FPG[(6.24±0.73)mmol/L比(6.97±0.95)mmol/L]、2 hPG[(8.06±1.25)mmol/L比(8.83±1.50)mmol/L]、LDL-C[(2.27±0.21)mmol/L比(2.58±0.27)mmol/L]、TG[(1.83±0.34)mmol/L比(2.20±0.48)mmol/L]、TC[(5.36±0.42)mmol/L比(5.92±0.53)mmol/L]、HOMA-IR(2.35±0.24比2.69±0.31)水平均下降(P<0.05),HDL-C[(1.50±0.38)mmol/L比(1.19±0.25)mmol/L]、HOMA-β(68.94±13.26比57.52±10.39)及血清SFRP5、Irisin、tAPN水平均升高(P<0.05);观察组治疗期间不良反应发生率17.24%与对照组12.07%相比
