李芳
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
- 供职机构：山西农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省回国留学人员科研经费资助项目引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- MicroRNA828负调控缺磷胁迫诱导的番茄花青素生物合成被引量：12
- 2015年
- 【目的】深入解析番茄mi R828的生物学功能,特别是参与番茄缺磷胁迫响应和花青素生物合成的调控作用。【方法】分别利用ps RNATarget和RLM-5′RACE预测和验证mi R828在番茄中的靶基因。用Meg Align和MEGA5对番茄Sl MYB7-like与部分R2R3 MYB转录因子氨基酸序列进行了多重比对和进化树分析。用q RT-PCR分析mi R828及其靶基因Sl Myb7-like在AC、Micro Tom和LA1996 3个不同番茄种质中的表达和mi R828在番茄(AC)中的组织特异性表达模式。以mi R828过表达转基因番茄和野生番茄为材料,设置正常供磷(+Pi,MS+KH2PO4 3.4 g·L-1)和缺磷(-Pi,MS+KCl 1.86 g·L-1)2个处理的培养试验。用q RT-PCR分析mi R828及其靶基因在缺磷胁迫下的表达模式。将野生型和mi R828过表达的转基因番茄植株缺磷培养15 d后,观察番茄植株地上部分和地下部分的表型差异,通过q RT-PCR分析mi R828、mi R828的靶基因Sl Myb7-like(SGN-U320618)和花青素合成相关酶基因(PAL、CHS、DFR、ANS、3GT和F3′H)的表达模式,应用分光光度计测量各样品的花青素含量。【结果】RLM-5′RACE剪切试验表明mi R828对靶基因Sl Myb7-like存在剪切调控作用,且剪切作用位点位于成熟mi R828的第10位和第11位核苷酸之间,从而验证了Sl Myb7-like是mi R828直接作用的靶基因。氨基酸序列多重比对及进化树分析显示番茄Sl MYB7-like与拟南芥At MYB7和金鱼草MYB330的序列相似性最高。Sl MYB7-like含有与花青素合成相关的保守氨基酸基序。mi R828在Micro Tom幼苗中的表达最高,在LA1996中的表达最低。相反,mi R828靶基因Sl Myb7-like在LA1996中的表达水平最高,在Micro Tom中的表达水平最低。q RT-PCR分析显示Sl Myb7-like的表达模式与mi R828相反,证明Sl Myb7-like被mi R828调控。正常供磷条件下,野生型番茄各组织中mi R828的表达量普遍较低,但在花芽、花和绿果中相对较高;mi R828过表达转基因番茄植株中各花青素合成相关基因�
- 贾小云刘慧沈洁李芳丁娜孙岩高昌勇李润植
- 关键词：番茄缺磷胁迫花青素
- 莱茵衣藻DGAT2基因家族的鉴定与功能分析被引量：4
- 2016年
- 微藻燃油是绿色可再生的替代性能源。解析微藻油脂合成调控机制是提高微藻油脂产量和微藻燃油规模化生产必须回答的重要议题。本研究以单细胞光自养模式植物莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)为试材,以参与三酰甘油(triacylglycerol,TAG)最后一步酰化反应的二酰基甘油转移酶(diacylglycerol acy ltransf-erase,DGAT)为靶标,采用生物信息学等分析手段,全基因组鉴定Ⅱ-型DGAT(DGAT2)基因家族成员及其表达模式。研究结果表明,莱茵衣藻Cre DGAT2家族有5个成员,命名为Cre DGTT1-5。Cre DGAT2基因含有5~12个内含子和6~13个外显子。Cre DGAT2可分为三个亚族,即Cre DGTT1和Cre DGTT4各自为一亚族,Cre DGTT2、Cre DGTT3和Cre DGTT5组成另一亚族,各亚族分别具有独特的理化特性。缺氮胁迫诱导Cre DGTT1高表达,而盐胁迫导致Cre DGTT4上调表达。预示着不同的Cre DGT2成员参与不同胁迫条件下微藻油脂合成的应答反应。本研究获得的有关莱茵衣藻DGAT2基因家族蛋白理化性质、蛋白结构、基因结构以及系统进化等信息为进一步全面解析微藻DGAT2基因的生物学功能以及鉴定油脂代谢工程靶标分子提供了科学参考。
- 郝敬云周广航邵雪梅李芳苑丽霞高昌勇孙希平薛金爱李润植
- 关键词：莱茵衣藻盐胁迫
- 超表达MucACP-Δ9脱氢酶对烟草叶组织油脂合成的影响被引量：2
- 2016年
- 棕榈油酸（C16：1Δ9）和顺式十八碳烯酸（C18：1Δ11）等ω-7脂肪酸具有重要的食品营养、医药保健与工业应用价值。本文构建了来自富含ω-7脂肪酸的猫爪藤（Macfadyena ungui s-cati）ACP-Δ9脱氢酶基因（Muc ACP-Δ9D）的植物组成型表达载体,农杆菌介导转化烟草叶盘,获得转基因植株。超表达且定位于质体的Muc ACP-Δ9D使烟草叶片脂肪酸组分发生显著改变,饱和的棕榈酸（C16：0）含量下降30%-50%,2种ω-7脂肪酸（C16：1Δ9和C18：1Δ11）含量均显著增加,分别由对照的微含量提升至16.4%-20.4%和9.0%。棕榈酸与这2种ω-7脂肪酸含量之间呈极显著负相关。另外,C18：2与C18：3多不饱和脂肪酸在转基因烟草叶片中的含量均显著减少,二者含量与C16：1Δ9及C18：1Δ11的含量亦呈负相关关系。这表明导入的异源Muc ACP-Δ9D能在烟草细胞质体内高效催化ACP-C16：0生成ACP-C16：1Δ9,ACP-C16：1Δ9进一步延伸产生C18：1Δ11,最终实现烟草叶片中ω-7脂肪酸的合成与富集,使ω-7脂肪酸从对照极低含量提高到25.4%-29.4%。此外,Muc ACP-Δ9D基因在烟叶组织超表达,对烟草植物生长发育及种子发芽等表型未构成不良影响。本研究为利用以非粮食作物、生物量巨大的烟草营养器官为平台生产优质脂肪酸提供新的技术路径和优异种质资源。
- 高昌勇毛雪尚宏芹李芳郝敬云张莉薛金爱李润植
- 关键词：植物油脂代谢工程烟草
