杨敏
- 作品数：8 被引量：15H指数：3
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- 全反式维甲酸对人卵巢癌细胞株COC1增殖分化及凋亡的研究
- 目的：探讨全反式维甲酸（ATRA）对人卵巢癌细胞株COC1增殖分化的影响。
方法：选用人卵巢癌细胞株COC1进行体外培养，以不同浓度的ATRA处理COC1细胞，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞...
- 杨敏
- 关键词：卵巢肿瘤维甲酸增殖分化
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- HIFU通过下调miR-181a进而促进ICAM-1表达增强小鼠抗肿瘤免疫被引量：3
- 2015年
- 目的探讨miR-181a在高强度聚焦超声(high-intensity focused ultrasound,HIFU)增强机体抗肿瘤免疫中的作用及其机制。方法 1皮下构建供HIFU治疗的黑色素瘤移植瘤小鼠模型,采用简单随机法随机分为HIFU组与荷瘤组,每组30只,采用MTT方法检测各组脾淋巴细胞对B16细胞的杀伤活性,ELISA检测小鼠血清及共培养上清中TNF-α及IFN-γ的表达水平;2qRT-PCR检测HIFU组与荷瘤组脾淋巴细胞中的差异miRNAs;3用生物信息学方法预测差异miRNAs的潜在靶基因,通过RT-PCR及Western blot验证靶基因的表达;4构建荧光素酶报告质粒进一步验证差异miRNAs的靶基因,再将差异miRNAs的mimics转染脾淋巴细胞,RT-PCR及Western blot检测其靶基因表达的变化,以进一步确认差异miRNAs对靶基因表达的影响。结果 1HIFU治疗能够抑制黑色素瘤生长,促进脾淋巴细胞分泌TNF-α和IFN-γ,增强脾淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤活性;2HIFU处理明显下调脾淋巴细胞中miR-181a的表达水平(P<0.01);3生物信息学方法预测发现共刺激分子细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)可能是miR-181a的潜在靶基因,且HIFU处理明显促进脾淋巴细胞中ICAM-1的mRNA和蛋白质的表达(P<0.01);4miR-181a mimics显著抑制pLUC-ICAM-1-3'UTR报告质粒荧光素酶的活性(P<0.01),并下调脾淋巴细胞中ICAM-1的mRNA(P<0.05)和蛋白质的表达(P<0.01)。结论 HIFU通过抑制miR-181a对共刺激分子ICAM-1的负调控作用从而增强荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫。
- 袁世梅李欢杨敏段亮查何孙晖李雪茹罗进勇李崇雁王智彪何通川周兰
- 关键词：高强度聚焦超声抗肿瘤免疫MICRORNA细胞间黏附分子-1
- 基于iTRAQ技术筛选肝癌转移相关差异蛋白被引量：2
- 2016年
- 目的:通过对不同转移潜能的肝癌细胞系的差异蛋白组学研究,以筛选鉴定出与肝癌转移相关的差异表达蛋白。方法:3株具有相同遗传背景、不同转移潜能的肝癌细胞系MHCC97-L、MHCC97-H及HCCLM3作为研究材料,经过收集胞质蛋白,浓缩、酶解、脱盐并用同位素标记相对和绝对定量技术(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)对其进行标记,应用二维液相色谱串联质谱技术对肽段进行鉴定,得到的结果与数据库进行比对,对蛋白进行注释。基于Web Gestalt数据库对差异表达的蛋白进行GO(gene ontology)功能分析和通路分析以筛选与肝癌转移相关的目标蛋白。并用Western blot对3个关键蛋白(PLEC、SHMT2、LDHA)进行验证。结果:经过iTRAQ标记并质谱检测分析,共发现鉴定1 170个蛋白,其中在L/H(MHCC97-L/MHCC9-H)组鉴定发现47个差异表达蛋白,在M/H(HCCLM3/MHCC97-H)组鉴定发现65个差异表达蛋白。生物信息学分析显示L/H和M/H组差异表达的蛋白主要参与酶催化和细胞间粘附及细胞代谢的过程。应用Western blot在蛋白水平上的验证,PLEC在高转移细胞株MHCC97-H和HCCLM3中表达上调,SHMT2在HCCLM3中表达上调,LDHA在MHCC97-H中表达上调。结论:在本研究中应用iTRAQ标记高通量的蛋白质组学技术对3株不同转移潜能的肝癌细胞系的差异表达蛋白进行检测和鉴定分析,发现PLEC和SHMT2蛋白是两种新的与肝癌转移可能相关的蛋白。
- 宋琳岚杨敏蒋小燕陈瑜汤慧颜亮廖勇
- 关键词：肝细胞性肝癌蛋白组学
- 全反式维甲酸对人卵巢癌细胞cyclinD1和CDK4表达的影响被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨全反式维甲酸 (ATRA)对人卵巢癌细胞增殖抑制作用及其与细胞周期调控因子cyclinD1和CDK4之间的关系。方法 选用人卵巢癌细胞株COC1进行体外培养 ,以不同浓度的ATRA处理COC1细胞 ,甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测细胞增殖抑制情况 ;流式细胞仪进行细胞周期时相分析 ;免疫细胞化学法测定细胞内cyclinD1和CDK4的表达。结果 A TRA浓度为 (10 -7～ 10 -5)mol/L时 ,均可明显抑制COC1细胞的增殖 (P <0 0 1) ,并具有时间 剂量依赖性。ATRA处理COC1细胞后G0 /G1期细胞增加 ,从 31 34%上升至 5 3 95 % ,S期细胞减少 ,从 5 8 5 0 %下降至 35 4 0 %。结果显示ATRA作用后 ,COC1细胞cyclinD1和CDK4蛋白表达减弱 ,且与细胞增殖指数 (PI)呈现负相关。结论 ATRA对人卵巢癌细胞株COC1具有明显的增殖抑制作用 ,可能是通过使细胞周期调控因子cyclinD1和CDK4蛋白表达减弱 ,将细胞阻滞于G0
- 杨敏赵涌
- 关键词：全反式维甲酸卵巢癌癌细胞CYCLIND1CDK4细胞周期调控因子
- 全反式维甲酸对人卵巢癌细胞株COC1增殖分化的影响被引量：4
- 2005年
- 目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对人卵巢癌细胞株COC1增殖分化的影响。方法选用人卵巢癌细胞株COC1进行体外培养,以不同浓度的ATRA处理COC1细胞,MTT比色法检测细胞增殖抑制情况;流式细胞仪进行细胞周期时相分析;光镜及透射电镜进行形态学观察;免疫细胞化学法测定细胞内增殖细胞核抗原Ki-67的表达;酶联免疫法测定培养液中卵巢癌标志物CA125水平的变化。结果ATRA浓度为10-7～10-5mol/L时,均明显抑制COC1细胞的增殖;ATRA处理COC1细胞后G0/G1期细胞增加,S期细胞减少。经ATRA处理的COC1细胞发生显著形态学分化,Ki-67表达减弱,培养液中CA125的表达水平降低。结论ATRA能明显抑制人卵巢癌细胞株COC1的生长增殖并诱导部分细胞向良性分化。
- 杨敏赵涌林晓
- 关键词：卵巢肿瘤维甲酸增殖分化
- 高强度聚焦超声治疗小鼠皮下瘤后IL-6和IL-10表达的变化被引量：1
- 2015年
- 目的探讨高强度聚焦超声(HIFU)治疗小鼠结直肠癌皮下瘤的有效性和治疗前后IL-6和IL-10表达的变化情况。方法采用结直肠癌细胞系,建立BABL/c小鼠皮下瘤模型,数量60只;采用JC-200肿瘤治疗系统,分为6组:对照组(荷瘤假照组),治疗后1、3、5、7 d及14 d组,眼球取血,收集肿瘤组织,石蜡包埋后HE染色观察组织病理变化,并检测残余肿瘤组织和血清中IL-6和IL-10的表达水平。结果 HIFU能有效地消融肿瘤组织,靶区组织随时间的变化出现以水肿、出血、炎症细胞浸润、坏死、纤维增生为主的病理学变化。HIFU消融后肿瘤组织及外周血IL-6和IL-10的表达均表现为上升后下降的趋势。HIFU后1、3、5、7 d血清中IL-6的浓度均显著高于对照组(P<0.05),14 d检测,IL-6的表达则明显下降(P>0.05);血清中IL-10的浓度与对照组相比在1、3 d明显升高(P>0.05),1 d后达到最高峰,而血清IL-10的浓度在5、7、14 d组与对照组相比,无明显差异(P>0.05)。结论 HIFU能有效治疗结直肠癌,且肿瘤残余组织和血清中IL-6和IL-10的表达早期升高,后期IL-6明显降低,而IL-10无明显变化。
- 杨敏李欢袁世梅唐祖川陈楚宋琪玲施琼周兰罗进勇何通川李发琪王智彪翁亚光
- 关键词：高强度聚焦超声白细胞介素6白细胞介素10
- DNA倍体及核形态参数检测在肾细胞癌预后判断中的价值
- 2004年
- 目的 :探讨图像细胞术测定肾细胞癌DNA倍体和核形态参数在预后判断上的价值及其与病变分级的关系。方法 :根据Fuhrman等建议的病理分级系统对 4 7例肾细胞癌进行分级 ,肿瘤组织切片经Feulgen染色后 ,应用图像分析仪测量肾细胞癌的DNA倍体以及细胞核形态参数并结合临床随访资料进行统计分析。结果 :平均DNA倍体分布在FuhrmanⅠ～Ⅱ级主要为 2C ,≥ 5C的细胞少于 10 % ,Ⅲ～Ⅳ级中 2C细胞少于Ⅰ～Ⅱ级 ,≥ 5C的细胞超过 2 0 % ,各组间DNA倍体参数之间差异有显著性 (P <0 .0 1)。瘤细胞核面积、周长和形状因子等参数在Ⅰ～Ⅳ级间差异都具有显著性 (P <0 .0 1)。随访资料中FuhrmanⅠ～Ⅱ级复发及死亡数为 2 / 16 ,而Ⅲ～Ⅳ级为 8/12 ,两组比较 ,复发转移及死亡率差异有显著性 (P <0 .0 1)。平均DNA倍体和细胞核形态参数在健存组与复发死亡组之间差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :提示肾细胞癌Fuhrman分级Ⅰ～Ⅱ级预后较好 ,Ⅲ～Ⅳ级预后差。用图像细胞术进行细胞核DNA倍体及核形态参数测定 ,对肾细胞癌预后判断有应用价值。
- 赵涌赵敬杨敏李圆圆彭斌蒲立新
- 关键词：肾细胞癌病理学分级预后DNA倍体
- 高强度聚焦超声抑制小鼠黑色素瘤细胞B16-F10在体内的转移被引量：1
- 2015年
- 目的在黑色素瘤的小鼠模型上,探讨高强度聚焦超声（HIFU）处理对黑色素瘤细胞体内转移的影响。方法皮下注射小鼠黑色素瘤细胞B16-F10以构建小鼠黑色素瘤皮下移植瘤模型;待肿瘤最长径长至7~10 mm时进行HIFU处理,并设置实验对照组（荷瘤鼠辐照HIFU但保持治疗头功率源开关关闭,即假照组）;治疗后每3 d测量肿瘤长径和短径,共观察3周,绘制肿瘤曲线,统计生存率和转移率,并通过实时荧光定量PCR测定血液中黑色素瘤细胞3个标志物的相对表达量以监测血液中循环黑色素瘤细胞的数量,它们分别是黑色素瘤相关抗原A3（MAGE-A3）、T细胞1识别的黑色素瘤抗原（MART1）以及同源转化成对框基因转录因子PAX3）;在HIFU治疗后14 d,通过尾静脉注射再次移植B16-F10细胞,观测其肺转移率。结果（1）各自的中位生存时间及95%可信区间（CI）：假照组分别为19.00 d和17.14~20.86 d,HIFU组则分别为26.00d和24.76~27.25 d,生存率差异显著（P〈0.01）;从治疗后第20天起,两组小鼠的肿瘤体积差异明显,从HIFU处理后第20天开始,包括处理后第23、26天,辐照组小鼠肿瘤体积明显小于假照组（P〈0.05）;（2）实时荧光定量PCR结果显示HIFU组小鼠在治疗后第7天的MAGE-A3、MART1和PAX3三个指标都明显低于假照组（P〈0.05）,在治疗后第14天其MAGE-A3的表达量仍然明显低于假照组（P〈0.05）;（3）在HIFU治疗后14 d通过尾静脉再次移植相同肿瘤细胞,HIFU组肺转移灶的数量明显低于假照组（P〈0.05）,肿瘤转移抑制率为42.4%。结论 HIFU处理能够抑制黑色素瘤细胞在体内转移的发生,其机制可能涉及减少肿瘤细胞从原发灶的脱落和瘤细胞在肺部的定植能力。
- 李欢袁世梅杨敏段亮王海燕查何李雪茹孙晖翁亚光罗进勇何通川李崇雁王嫣李发琪王志彪周兰
- 关键词：高强度聚焦超声黑色素瘤
