张进华
- 作品数：35 被引量：87H指数：5
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- LMP1与绿色荧光蛋白融合基因慢病毒的制备被引量：2
- 2005年
- 目的:制备EB病毒LMP1与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒.方法:采用RT-PCR方法获得LMP1全外显子片段,使之克隆到带绿色荧光蛋白慢病毒表达载体质粒FUGW中.经限制性酶切、PCR扩增和测序鉴定重组载体.在脂质体介导下将慢病毒包装系统的包装结构基因pCMV.△8.9、包膜基因VSVG、目的基因FUGW-LMP1导入病毒包装细胞293FT,荧光显微镜检测基因的表达,包装成病毒后,收集病毒上清,浓缩,PCR鉴定.结果:限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实RT-PCR获得的LMP1 cDNA片段与Gen-Bank中的数据完全吻合;LMP1准确克隆入FUGW的多克隆位点.慢病毒的3种质粒可高效转染入293FT细胞,荧光显微镜下观察可见大量的绿色荧光.绿色荧光位于细胞的胞膜及胞质.结论:成功制备了LMP1与GFP融合基因慢病毒,为研究EBV瘤基因LMP1在多种疾病中的作用机制提供适合的稳定转染细胞的载体.
- 李先茂赵彤朱梅刚张三泉张进华
- 关键词：潜伏膜蛋白1聚合酶链反应慢病毒
- TUNEL改良方法在大肠癌组织细胞凋亡检测中的应用
- 细胞凋亡是细胞的程序性死亡,它在许多生理及病理过程中均发挥着重要作用,细胞凋亡检测方法包括形态学观察和基因组DNA分析.近年来,随着分子生物学、细胞生物学等的巨大进展,凋亡检测技术有了很大的发展.原位凋亡检测,特别是末端...
- 张进华杨建芳熊平霞
- 关键词：细胞凋亡大肠癌TUNEL
- 文献传递
- 光波变频微波辐射技术在真菌Crocott六胺银快速染色中的应用及体会
- 张进华张彦黎燕玲刘俊坤张庚彦
- 比较GS环保试剂与常规试剂制备的组织样本在荧光定量PCR中的效果被引量：5
- 2011年
- 应用GS生物组织标本制备液（GS液）制作的石蜡切片提取DNA，进行实时荧光定量PCR技术扩增，并与常规方法制作的石蜡切片进行比较，结果没有大的差别。证实Gs液能较好地保存组织中的DNA。 1 材料与方法 1．1 材料取乳腺癌、结肠癌、肺癌、卵巢癌和淋巴瘤组织各12块，每种组织中6块放入4％中性甲醛，
- 张进华肖莎李显筝齐鲁
- MTT染色法检测化疗后骨肉瘤细胞的凋亡被引量：2
- 2009年
- 目的研究MTT染色法用于检测与区分化疗后活的与凋亡的骨肉瘤细胞可行性。方法以手术切取的骨肉瘤组织的细胞建立凋亡细胞模型,采用MTT染色法检测,直接在光镜下进行形态学观察,并与荧光染色方法的观察结果进行比较。结果MTT染色法可准确判定化疗后活的与凋亡的骨肉瘤细胞,并可清晰分辨正常细胞、凋亡细胞和死亡细胞。结论MTT染色法是一种简单、可行的检测骨肉瘤细胞凋亡的方法,可用于化疗后肿瘤坏死率的研究。
- 陈强张进华陈建庭史占军邓永健
- 关键词：骨肉瘤细胞荧光染色
- 改良MTT药敏分析在成骨肉瘤个体化治疗中的意义被引量：3
- 2011年
- 目的:为提高骨肉瘤患者的治疗有效率,通过改良MTT药敏分析,研究成骨肉瘤药物敏感性,探讨成骨肉瘤个体化治疗的可行性。方法:通过收集新鲜骨肉瘤组织收集培养骨肉瘤细胞,以MTT比色法观察6种常用化疗药对骨肉瘤细胞增殖的影响。结果:骨肉瘤细胞对MTX,紫杉醇和5-FU敏感性强,生长抑制率达到50.06%,48.35%和47.13%。结论:通过对骨肉瘤细胞进行MTT药敏分析研究,选择性地对患者开展个体化化疗,对提高骨肉瘤治愈率有重要的意义。
- 陈强张进华陈建庭史占军邓永健
- 关键词：骨肉瘤药敏实验MTT
- 原位杂交法检测KIAA1173基因在肺癌组织中的表达被引量：1
- 2005年
- 张三泉蒋会勇宋兰英胡海张进华赵彤
- 关键词：肺癌组织原位杂交法CDNA探针基因MRNA恶性肿瘤
- 表达人KIAA1173基因的鼻咽癌6-10B细胞模型的建立
- 2005年
- 目的建立表达人KIAA1173基因的鼻咽癌6-10B细胞模型,为探究人KIAA1173基因在鼻咽癌发病机制中的作用奠定实验基础。方法从新鲜肌肉组织中提取总RNA,采取逆转录PCR(RT-PCR)得到人KI-AA1173基因cDNA,纯化PCR产物,与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,转化,铺板,筛选阳性克隆,酶切鉴定并进行序列测定。将重组质粒pcDNA3.1(+)-KIAA1173和空载体利用阳离子脂质体介导转入鼻咽癌6-10B细胞,经G418筛选阳性克隆。用RT-PCR、原位杂交及免疫细胞化学方法检测KIAA1173基因在6-10B细胞中的稳定表达情况。以空白质粒转染组作为对照。结果重组质粒pcDNA3.1(+)-KIAA1173经酶切和DNA测序分析显示与GenBank所公布的相应序列相符,插入方向正确,阅读框架完整。转染KIAA1173基因的6-10B细胞阳性克隆在mRNA和蛋白水平证实,转染细胞内有该基因高表达,表明细胞可表达人KIAA1173基因。结论成功获得了人KIAA1173基因全长cDNA的基因克隆,将该基因导入鼻咽癌6-10B细胞后,获得生物学活性稳定的KIAA1173基因高表达的细胞模型。
- 张三泉蒋会勇韩西群胡海张进华姚开泰赵彤
- 关键词：鼻咽肿瘤转染细胞模型
- 霍奇金淋巴瘤CD99基因表达缺失的意义被引量：15
- 2004年
- 目的 :探讨经典型霍奇金淋巴瘤 (cHL)R S细胞CD99蛋白表达情况 .方法 :将 8例cHL全部按WHO新分类标准进行确诊 ,采用免疫组织化学SABC法进行CD99染色 ,观察每一病例R S细胞阳性表达率 ;流式细胞仪检测B淋巴瘤DG75细胞株 ,T淋巴瘤Jurkat细胞株 ,霍奇金淋巴瘤L4 2 8,HDLM 2细胞株CD99蛋白表达情况 .结果 :8例cHL中R S细胞CD99阴性表达率为 10 0 % (8/8) ;DG75细胞株CD99表达阳性 (87.3± 0 .4 ) % ,Jurkat细胞株CD99表达阳性(96 .8± 0 .6 ) % ,L4 2 8细胞株CD99表达阳性 (3.8± 0 .4 ) % ,HDLM 2细胞株CD99表达 (6 6 .4± 0 .3) %阳性 .结论 :CD99基因在霍奇金淋巴瘤表达缺失可作为诊断cHL的参考依据 .
- 李先茂李燕赵彤朱梅刚张进华
- 关键词：霍奇金淋巴瘤免疫组织化学
- KDR介导的双自杀基因重组腺病毒对ECV304细胞增殖活性、细胞周期及凋亡的影响被引量：1
- 2005年
- 目的探讨腺病毒介导KDR启动子驱动的融合基因体系对人脐血管内皮细胞株ECV304的增殖活性、细胞周期及凋亡的影响。方法以重组腺病毒AdEasy-KDR-CDglyTK体外感染表达KDR的ECV304细胞株和对照组不表达KDR的LS174T细胞株,并给予不同浓度的前药GCV(ganciclovir)和/或5-FC(5-fluorocytosine),观察该体系对ECV304细胞的杀伤效应及其旁观者效应;并以流式细胞仪检测细胞周期的变化,电镜观察细胞的病变。结果重组腺病毒对ECV304细胞及对照组LS174T细胞的感染率相似,其感染率随腺病毒滴度的递增而增加,当MOI为200时,所有细胞株均达约100%感染。以MOI为100的重组体分别感染各细胞株表现出对前药的不同敏感性:表达KDR的ECV304细胞对前药的具有较高的敏感性,与前者相比,不表达KDR的LS174T细胞对前药不敏感(P均<0.001)。融合基因的疗效优于任一单自杀基因(P均<0.001)。将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同混合培养,观察到该体系明显的旁观者效应。流式细胞术检测表明该体系抑制ECV304细胞DNA的合成,表现为S期细胞比率增多及G1期细胞减少(P均<0.001)。同时,电镜下可见ECV304有凋亡和坏死改变。结论KDR基因启动子可调控融合基因体系选择性杀伤人血管内皮细胞,其机制与细胞周期阻滞、凋亡及坏死有关。
- 苏国强黄宗海俞金龙厉周范应方宋慧娟王蔚张进华
- 关键词：KDR启动子自杀基因治疗腺病毒
