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狂犬病病毒核酸诊断技术研究进展被引量：2: 2015年; 狂犬病是由狂犬病病毒引起的人兽共患烈性传染病,发病后死亡率几乎为100%。近年来,我国狂犬病的发病率呈上升趋势,急需一种快速、简便、经济、准确、易于推广的实验室诊断方法。文中从基于PCR方法的核酸诊断技术、依赖核酸序列扩增技术、环介等温扩增技术、基因芯片技术等方面对目前国内外狂犬病病毒核酸诊断技术作一综述,并分析各种方法的优点和缺点,为狂犬病的临床快速诊断提供参考依据,以更好地预防和控制狂犬病。; 路静伊正君付玉荣; 关键词：狂犬病病毒基因芯片技术

狂犬病病毒抗原、抗体的实验室诊断研究进展被引量：3: 2015年; 狂犬病是由狂犬病病毒引起的人兽共患烈性传染病,发病后死亡率几乎为100%。近年来,我国狂犬病的发病率呈上升趋势。当前急需一种快速、准确、经济、简便、易于推广的实验室诊断方法。本文从抗原诊断、抗体诊断对目前国内外狂犬病病毒的实验室诊断作一综述,并分析各种方法的优点和缺点,为狂犬病的快速实验室诊断提供参考依据,以更有效地预防和控制狂犬病。; 路静付玉荣伊正君; 关键词：狂犬病病毒抗原诊断抗体诊断

狂犬病病毒糖蛋白膜外区重组基因的表达与鉴定被引量：1: 2015年; 目的构建狂犬病病毒糖蛋白外膜区基因质粒并在大肠埃希菌中表达,为研制狂犬病病毒抗原诊断试剂盒奠定基础。方法采用RT-PCR方法扩增狂犬病病毒CTN株糖蛋白膜外区基因,目的片段与表达载体PET32a(+)分别经双酶切、胶回收后连接并转化至E.coli BL21(DE3)菌株。阳性重组菌经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE分析后进行纯化,利用Western blot鉴定其反应原性。结果以狂犬病病毒CTN株为模板扩增的糖蛋白膜外区基因片段经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定大小为1 323bp,与理论值相符;重组质粒经酶切鉴定后转化入E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达的融合蛋白分子质量单位大小约为66.6ku,与理论值相符;重组菌在IPTG终浓度为1mmol/L,诱导时间为4h,温度为37℃时蛋白表达产量最高。该融合蛋白主要以包涵体形式存在,可被His标签抗体识别。结论成功表达了狂犬病病毒糖蛋白膜外区蛋白,该蛋白反应原性良好,为研制狂犬病病毒抗原诊断试剂盒奠定了基础。; 路静付玉荣伊正君; 关键词：狂犬病病毒基因克隆原核表达

狂犬病病毒核蛋白的结构、功能及其应用研究进展被引量：10: 2015年; 狂犬病是由狂犬病病毒引起的人兽共患烈性传染病,发病后病死率几乎为100%。目前狂犬病尚无有效的治疗方法,及时、准确的诊断以及暴露后狂犬病疫苗的注射是其主要的预防措施。核蛋白是狂犬病病毒重要的功能蛋白,其在疫苗免疫效果的评价中也发挥着重要作用。狂犬病的诊断主要针对核蛋白。本文对核蛋白的基因结构、抗原性、致病性及其应用的研究进展进行了综合评述,从而加深对核蛋白的了解,为狂犬病的快速临床诊断和免疫效果评价提供参考依据,以更好的预防和控制狂犬病。; 路静付玉荣伊正君; 关键词：狂犬病病毒核蛋白

小鼠IL-27真核表达载体的构建及其在RAW264.7细胞中的表达被引量：2: 2016年; 目的:构建小鼠白介素27(Interleukin 27,IL-27)单链融合基因的真核表达载体并检验其在RAW264.7细胞中的表达情况。方法:提取小鼠脾细胞总RNA,通过RT-PCR扩增出小鼠EBI3和p28 c DNA。采用重叠延伸PCR(splicing by overlap extension PCR,SOE PCR)通过编码疏水性多肽接头(Gly4Ser)3的DNA序列连接小鼠EBI3和p28基因片段,构建小鼠IL-27单链融合基因(mouse single chain IL-27,msc IL-27),并将其克隆至pc DNA3.1(+)载体。通过酶切和测序鉴定阳性重组载体,将重组质粒pc DNA3.1-IL-27通过脂质体转染法转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7,通过RT-PCR方法检测目的基因的表达。结果:测序分析表明,小鼠IL-27单链融合基因中EBI3、linker和p28的连接顺序、方向及碱基序列与预期相符。在转染后的RAW264.7细胞中检测到了小鼠IL-27 m RNA的表达。结论:成功构建了小鼠IL-27单链融合基因及其真核表达载体,并在RAW264.7细胞中实现表达,为进一步探讨IL-27的生物学功能奠定了基础。; 路晓红付玉荣伊正君路静张德峰; 关键词：融合基因重叠延伸PCR 真核表达载体 RAW264.7

研究生教育中研究生自身存在的问题及对策被引量：2: 2015年; 研究生自身存在的问题关乎对其培养工作的成败,是研究生整体素质下滑的重要原因。笔者从研究生角度,分析了当前研究生教育中研究生自身存在的问题:读研目标不明确,目的功利化,态度不端正,心浮气躁,缺乏学习的自主性,创新意识弱,创新能力差,心理缺乏安全感,并针对这些问题提出了对策。研究生只有通过解决自身存在的问题,在研究生生涯的积淀中成就自我,才能使自己成长为社会所需的高层次创新人才。; 路静付玉荣伊正君; 关键词：研究生教育

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路静