王良海
- 作品数：34 被引量：56H指数：4
- 供职机构：石河子大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 基于M2型巨噬细胞来源的Siglec15对食管鳞癌细胞恶性生物学行为影响的生物信息学分析及实验验证
- 2024年
- 目的:采用生物信息学方法分析M2型肿瘤相关巨噬细胞(M2-TAMs)来源唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素15(Siglec15)促进食管鳞状细胞癌(ESCC)恶性生物学行为的作用,并通过细胞实验对其进行验证。方法:应用肿瘤免疫评价资源(TIMER)数据库分析Siglec15在泛癌和癌旁正常组织中的表达差异及免疫浸润情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测M2-TAMs和ESCC EC109及KYSE150细胞中Siglec15 mRNA表达水平。在M2-TAMs与ESCC细胞非接触性共培养基础上,分别设置EC109/KYSE150组、EC109/KYSE150+si-NC组(转染si-NC序列)和EC109/KYSE150+si-Siglec15组(分别转染si-Siglec15#1和si-Siglec15#2序列),采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测各组细胞中迁移和侵袭细胞数,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果:生物信息学分析,与癌旁正常组织比较,食管癌、结肠癌和头颈部鳞状细胞癌等泛癌组织中Siglec15 mRNA表达水平升高(P<0.05或P<0.01),且食管癌组织中Siglec15 mRNA表达水平与巨噬细胞浸润呈明显正相关关系(P<0.05);与EC109细胞和KYSE150细胞比较,M2-TAMs中Siglec15 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。EC109/KYSE150组、EC109/KYSE150+si-NC组和EC109/KYSE150+si-Siglec15组细胞增殖率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与EC109/KYSE150组比较,24和48 h时EC109/KYSE150+si-NC组细胞划痕愈合率升高(P<0.01),迁移和侵袭细胞数增加(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.01);与EC109/KYSE150+si-NC组比较,EC109/KYSE150+si-Siglec15#1组和EC109/KYSE150+si-Siglec15#2组细胞划痕愈合率降低(P<0.05),迁移和侵袭细胞数减少(P<0.05),细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:M2-TAMs来源Siglec15可能是促进ESCC细胞迁移和侵袭的关键因子。
- 任祎琳臧翌辰薛乐乐杨凯歌陈素芳王魏楠罗成华梁伟华王良海李锋胡建明
- 关键词：食管鳞状细胞癌肿瘤相关巨噬细胞
- 抑制食管癌细胞增殖的药物
- 本发明公开了抑制食管癌细胞增殖的药物。本发明通过检测临床标本并建立体外细胞模型及体内小鼠模型，从肿瘤干细胞的角度研究了SOX9在食管鳞癌发生发展中的作用及其调控的下游分子机制，通过实验证明：SOX9在食管鳞癌组织中及食管...
- 王良海张之钰侯隽郁晓丹庞丽娟李锋
- 文献传递
- 一种用于病理科感染标本暂存取样装置
- 本发明公开了一种用于病理科感染标本暂存取样装置，包括暂存箱，所述暂存箱底部四角位置分别螺栓连接有移动刹车轮；所述暂存箱内部通过螺栓连接有分隔板，且将暂存箱内部腔体分隔为活体组织区储存腔和细胞学区储存腔；所述暂存箱的右侧下...
- 卢香云姚永坤王良海崔晓宾裴俞慧彭昊李曼
- 溶质载体蛋白SLC43A2作为标志物在制备诊断和/或预后评估食管癌的产品中的应用
- 本发明实施例公开了一种溶质载体蛋白SLC43A2作为标志物在制备诊断和/或预后评估食管癌的产品中的应用。本发明通过生物分子指标SLC43A2的表达辅助食管鳞癌患者的诊断和对预后进行评价，为解决食管癌患者诊断和预后评价手段...
- 彭昊王良海闫煜钰何敏
- 细粒棘球蚴通过STAT6促进巨噬细胞向M2型极化被引量：2
- 2022年
- 目的:探讨细粒棘球蚴通过调控巨噬细胞STAT6的表达介导其极化的机制。方法:使用细粒棘球蚴囊液(EgCF)处理巨噬细胞系Raw264.7,以未加EgCF组作为对照组,qRT-PCR、ELISA、流式细胞术等实验检测M1、M2相关因子的表达水平,研究细粒棘球蚴对巨噬细胞极化的影响;使用EgCF处理巨噬细胞,并在实验组加入信号转导和转录激活因子6(STAT6)抑制剂,以未加抑制剂组及DMSO组作为对照组,qRT-PCR、流式细胞术等实验检测STAT6、M1、M2相关因子的表达水平,研究细粒棘球蚴通过调控巨噬细胞STAT6的表达,介导巨噬细胞极化的机制。结果:EgCF促进STAT6和M2相关因子的表达(P<0.05),抑制M1相关因子的表达(P<0.05)。STAT6抑制剂可抑制Raw264.7细胞中STAT6和M2相关因子表达,并上调M1相关因子表达。结论:EgCF通过促进STAT6的表达介导巨噬细胞向M2型极化。
- 冯叶叶许军英逯君霞侯隽王良海吴向未陈雪玲
- 关键词：细粒棘球蚴巨噬细胞STAT6极化
- 基于TCGA数据库的食管鳞状细胞癌差异表达焦亡相关基因的筛选及GSDMC基因的验证被引量：2
- 2023年
- 目的 通过对TCGA数据库中食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma, ESCC)组织基因表达谱RNA测序数据进行生物信息学分析,探讨与ESCC预后有关的焦亡基因,并通过体外实验对筛选出的基因进行验证和功能研究。方法 下载TCGA和GTEx数据库中ESCC和正常食管样本中mRNA数据及临床数据。从文献中获得细胞焦亡相关基因(pyroptosis-related genes, PRG),使用R语言及DESeq2软件获取差异表达的PRG。采用Cox单因素、多因素回归分析,筛选出与预后相关的基因。应用qRT-PCR验证差异表达的PRG在ESCC和正常食管上皮细胞的表达水平;运用siRNA干扰ESCC细胞中已筛基因的表达,qRT-PCR检测siRNA的干扰效率。干扰成功后分别采用CCK-8、平板克隆和qRT-PCR实验,检测干扰已筛基因后ESCC细胞的活力、克隆形成能力和凋亡。运用肿瘤免疫评估资源(TIMER)数据库,分析gasdermin家族蛋白C(GSMDC)的mRNA表达与食管癌免疫细胞浸润水平的相关性。结果 33个PRG中与ESCC相关的差异表达基因有23个,其中13个基因表达上调,10个基因表达下调(P<0.001)。Cox单因素回归分析显示:CASP5和GSDMC基因与ESCC患者预后相关(P<0.01)。Cox多因素回归分析显示:GSDMC基因是ESCC患者预后相关的独立危险因素(P<0.01)。qRT-PCR结果显示:GSDMC基因的mRNA水平在ESCC细胞中上调(P<0.05)。敲低GSDMC基因可抑制ESCC细胞增殖[第4天OD值:(1.73±0.07)vs(1.10±0.09),t=13.55,P<0.001]和克隆形成能力[克隆形成数目:(686±94.30)vs(377±77.31),t=4.389,P<0.05],促进ESCC细胞凋亡(P<0.001)。TIMER数据库分析:GSDMC基因的表达水平与B细胞(r=-0.317)、CD8+T细胞(r=-0.15)、巨噬细胞(r=-0.252)浸润程度呈负相关(P均<0.001),与树突状细胞(r=0.353)的浸润水平呈正相关(P<0.001)。结论 GSDMC在ESCC组织中表达上调,可作为评估ESCC患者预后不良的生物学指标。
- 苗婷婷胡浇浇郑士耀孙畅杨铭曹玉文曹玉文胡建明王良海杨兰
- 关键词：食管肿瘤鳞状细胞癌生物信息学免疫细胞
- 干性相关分子Nanog在食管鳞状细胞癌组织中高表达并促进食管鳞癌细胞的侵袭转移:基于激活TGF-β信号通路
- 2024年
- 目的 探讨食管鳞状细胞癌(鳞癌)中干性相关分子胚胎干细胞关键因子(Nanog)和侵袭迁移相关分子基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达及其之间的调控关系。方法 运用免疫组织化学技术检测127例食管鳞癌组织和82例癌旁正常组织中Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白的表达情况,分析Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白的表达水平、相关性及与食管鳞癌患者的临床病理参数和预后之间的关系;采用GEO数据库分析Nanog等干性相关分子主要富集通路;应用TIMER在线网站分析食管癌中TβR1和MMP-2及MMP-9的相关性。在体外运用siRNA转染的方式将食管鳞癌细胞株分为正常对照组、Nanog低表达组,采用划痕实验分析其对食管鳞癌细胞迁移的影响,qRT-PCR及Western blotting检测两组之间TβR1、p-Smad2/3、MMP-2/MMP-9的表达情况。结果 Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白在食管鳞癌组织中表达均上调(χ^(2)=70.475,P<0.01;χ^(2)=34.415,P<0.01;χ^(2)=46.605,P<0.01),且呈正相关(r=0.205,P=0.045;r=0.307,P<0.001)。Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白表达水平与食管鳞癌的浸润深度相关(χ^(2)=23.9,P<0.01;χ^(2)=6.029,P<0.05;χ^(2)=11.89,P<0.05),有淋巴结转移的样本中,MMP-2/MMP-9蛋白表达水平高于无淋巴结转移的样本(χ^(2)=10.08,P<0.01;χ^(2)=5.731,P<0.05)。MMP-2/MMP-9蛋白表达与食管鳞癌患者的年龄、性别和肿瘤分化程度无相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白高表达组的食管鳞癌患者生存时间短于低表达组(P<0.001;P=0.004;P=0.017);生物信息学分析显示,Nanog等干性相关分子主要富集在转化生长因子-β(TGF-β)信号通路,MMP-2/MMP-9与TβR1表达在食管癌中呈正相关关系。体外划痕实验结果显示,Nanog促进食管鳞癌细胞系的迁移;qRT-PCR及Western blotting结果显示,敲低Nanog后,TβR1、p-Smad2/3、MMP-2/MMP-9的表达水平明显降低。结论 Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白在食管鳞癌患者组织中高表达且呈�
- 孙畅郑士耀李梅杨铭秦梦园徐媛梁伟华梁伟华胡建明王良海李锋周虹
- 关键词：食管鳞状细胞癌
- 长链非编码RNA‑ROR的应用
- 本发明公开了一种长链非编码RNA‑ROR(linc‑ROR)的应用。所述应用具体为用于检测linc‑ROR的物质及抑制linc‑ROR表达和/或功能的物质分别在制备用于辅助诊断和治疗食管鳞癌的产品中的应用。试验表明，抑制...
- 侯隽郁晓丹王良海张之钰李锋
- 文献传递
- 循证医学在临床病理专业学位研究生培养中的应用被引量：2
- 2016年
- 临床病理专业学位研究生是病理学专业重要的后备力量,如何更好地运用循证医学理念培养适应时代需求的病理专业学位研究生是一个值得关注的研究生教育问题。改变传统的教学内容和教学模式,提高学生学习兴趣,使其快速掌握行业最新信息,鼓励学生积极参与学术讨论以及制订多元化的考核标准,提高研究生的培养质量,培养合格病理学人才。
- 崔晓宾陈云昭刘春霞李锋党鸿蔚王良海索靖
- 关键词：循证医学临床病理专业学位研究生
- SHANK2抑制剂在制备治疗食管鳞癌药物中的应用
- 本发明涉及生命科学研究技术领域，是一种SHANK2抑制剂在制备治疗食管鳞癌药物中的应用。在食管鳞癌中的研究发现，SHANK2大量扩增能够增强YAP核定位及转录活性,进而促进肿瘤进展；SHANK2的抑制能够抑制食管鳞癌细胞...
- 王良海王翠翠李曼侯隽赵微
