- 天津市监狱羁押人群结核病患者分离菌株的分子流行病学研究
- 2021年
- 目的研究天津地区监狱流行的结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)菌株的主要基因型,菌株间的进化关系以及结核病在监狱羁押人员中传播的主要模式。方法选取天津市结核病控制中心参比实验室菌株库中保存的2013年1月至2016年6月来自天津市监狱管理局羁押人员不同结核病患者痰标本中分离培养的124株MTB菌株,采用多重PCR试验检测菌株基因组中RD105差异区域的缺失情况以鉴定北京基因型MTB;使用15个VNTR位点对菌株开展基因分型研究,根据菌株的成簇情况评估天津地区监狱羁押人员结核病近期传播的水平。结果天津监狱结核病患者分离培养的124株MTB菌株中,北京基因型MTB为116株,占全部分析菌株的93.5%。全部124株MTB菌株的VNTR基因分型显示93株(75.0%)为基因分型同簇株,共形成了18个基因分型簇,其中最大的分型簇由25株北京基因型MTB组成,其余的31株MTB为基因分型独特型。基因分型数据经最小生成树算法分析显示,124株MTB被分为3个基因型。其中116株北京基因型MTB组成了其中的1个基因型;8株非北京基因型菌株中,3株MTB和5株MTB分别组成另外2个基因型。结论天津监狱羁押人员中,北京基因型MTB传播的最为广泛,是绝对优势菌株。基因分型表明近期传播(外源性感染)是MTB在监狱羁押人群中传播的主要模式。
- 赵慧谢彤王春花巨韩芳孙蕊李旭
- 关键词：分子流行病学可变数目串联重复序列监狱
- 2020年天津市肺结核耐药流行病学特征及影响因素分析被引量：3
- 2023年
- 目的分析2020年天津市肺结核患者的耐药流行病学特征及其影响因素。方法纳入2020年1—12月天津市的肺结核患者,对患者痰标本进行分离培养,分离鉴定结核分枝杆菌并进行药物敏感性试验。应用非条件logistic回归分析肺结核耐药患者的耐药流行病学特征及其影响因素。结果共纳入1314例肺结核患者,获得1314株结核分枝杆菌。其中,68.42%(899/1314)为全敏菌株,31.58%(415/1314)为耐药菌株。在415株耐药菌株中,10.05%(132/1314)为单耐药菌株,4.11%(54/1314)为多耐药菌株,10.81%(142/1314)为耐多药菌株,6.61%(87/1314)为其他类型耐药。结核分枝杆菌对异烟肼的耐药率最高(19.79%),其次为链霉素(18.87%),对利福平、左氧氟沙星、莫西沙星也有较高的耐药率(11.87%、13.13%、13.38%),对卡那霉素和阿米卡星的耐药率相对较低(0.91%、0.75%)。在156株利福平耐药结核分枝杆菌中,准广泛耐药率(同时对氟喹诺酮类耐药)为46.79%(73/156)。非条件logistic回归分析结果显示,与全敏组相比,单耐药组和多耐药/耐多药组中40~59岁者占比更高,≥60岁者占比更低(P<0.05)。与全敏组相比,单耐药组和多耐药/耐多药组中复治者占比均更高(P<0.05);与单耐药组相比,多耐药/耐多药组中复治者占比更高(P<0.05)。年龄、治疗史是结核分枝杆菌单耐药、多耐药/耐多药的影响因素(P<0.05)。复治耐药患者中的利福平耐药率、耐多药率、准广泛耐药率明显高于初治患者(P<0.001)。结论2020年天津市肺结核患者的耐药特征十分严峻,年龄40~59岁、治疗史等是肺结核患者耐药特别是利福平耐药的影响因素。
- 赵慧王志锐巨韩芳孙蕊王春花
- 关键词：肺结核结核分枝杆菌耐药性药物敏感试验影响因素
- 79株结核分枝杆菌临床分离株吡嗪酰胺耐药基因pncA突变分析被引量：2
- 2015年
- 目的了解结核分枝杆菌临床分离株pnc A基因突变情况,研究吡嗪酰胺耐药与北京基因型以及pnc A基因突变之间的关系。方法对79株结核分枝杆菌临床分离株进行MGIT 960吡嗪酰胺药敏试验,北京基因型的鉴定,pnc A基因扩增和测序。结果 79株临床分离株中,吡嗪酰胺耐药39株,吡嗪酰胺敏感40株。北京基因型在PZA耐药株、PZA敏感株中的比例分别为94.9%(37/39)、92.5%(37/40),差异无统计学意义(χ2=0.22,P=0.64)。40株吡嗪酰胺敏感株均未发生pnc A基因突变,39株吡嗪酰胺耐药株中有31株发生突变,突变率为79.5%(31/39)。耐药株中的pnc A基因突变率高于敏感株,差异有统计学意义(χ2=52.33,P=0.00)。吡嗪酰胺耐药株中共发现26种突变类型。结论结核分枝杆菌耐吡嗪酰胺主要机制之一为pnc A基因突变。北京基因型可能与吡嗪酰胺耐药无关。
- 穆成谢彤巨韩芳孙蕊王春花
- 关键词：结核分枝杆菌吡嗪酰胺
- 天津市监狱羁押人员中结核病患者临床分离菌株的基因型分析
- 2019年
- 为揭示结核分枝杆菌(MTB)北京基因型菌株中基于差异区域(RD)多态性形成的各个进化分支在天津监狱羁押人员中的流行情况,笔者收集2013年1月至2016年6月从天津市监狱羁押人员结核病患者痰标本中分离培养获得的124株MTB菌株进行基因型分析。结果发现,124株菌株中经鉴定为北京基因型者有116株(93.5%)。116株北京基因型菌株中,96株(82.8%)为北京基因型现代株,20株(17.2%)为北京基因型古代株。基于大片段多态性分析,北京基因型MTB分为4个进化分支。20株北京基因型古代株中有7株(6.0%)为RD181(+)菌株,13株(11.2%)为RD181(-)菌株;96株北京基因型现代株中,95株(81.9%)为RD150(+)菌株,仅1株(0.9%)为RD150(-)菌株。北京基因型MTB的各个进化分支中,RD150(+)北京基因型现代株在监狱中传播流行最为广泛。结果提示需加强RD150(+)北京基因型现代株在天津监狱羁押人员中流行的监测工作。
- 谢彤王春花赵慧巨韩芳穆成王志锐孙蕊
- 关键词：基因测定基因型囚犯
- 二代线性探针技术在结核分枝杆菌耐药性检测中的价值被引量：2
- 2019年
- 目的评价二代线性探针技术(GenoType MTBDRplus VER 2.0,简称“GenoType 2.0”)快速检测结核分枝杆菌(MTB)临床分离株对异烟肼与利福平耐药性的临床应用价值。方法收集2017年4月至2019年4月天津市结核病控制中心参比实验室中疑似肺结核患者的痰标本共6315份,纳入涂阳、培阳且经菌群鉴定为MTB的349株菌株为研究对象,分别采用表型药物敏感性试验(简称“比例法药敏试验”)和GenoType 2.0检测菌株对利福平、异烟肼的耐药性;并以比例法药敏试验结果为参考标准,评价GenoType 2.0的检测效能。结果GenoType 2.0、比例法药敏试验和GenoType 2.0+比例法药敏试验检测349株MTB菌株对利福平敏感、单耐、耐利福平+异烟肼菌株的检出率分别为86.53%(302/349)、87.97%(307/349)、86.25%(301/349),2.58%(9/349)、2.29%(8/349)、2.29%(8/349),10.89%(38/349)、9.74%(34/349)、11.46%(40/349),前者与后两者及后两者对敏感、单耐、耐利福平+异烟肼菌株检出率差异均无统计学意义(χ^2=0.322,P=0.851;χ^2=0.112,P=0.946;χ^2=0.546,P=0.761);对异烟肼敏感、单耐、耐利福平+异烟肼菌株的检出率分别为79.94%(279/349)、80.23%(280/349)、79.65%(278/349),9.17%(32/349)、9.46%(33/349)、9.46%(33/349),10.89%(38/349)、10.32%(36/349)、10.89%(38/349),前者与后两者及后两者对敏感、单耐、耐利福平+异烟肼菌株检出率差异均无统计学意义(χ^2=0.071,P=0.965;χ^2=0.017,P=0.991;χ^2=0.061,P=0.970)。以比例法药敏试验为参考标准,GenoType 2.0对利福平和异烟肼耐药性检测的敏感度、特异度、符合率、Kappa值分别为91.67%(44/48)和95.89%(70/73)、99.00%(298/301)和100.00%(276/276)、97.99%(342/349)和99.14%(346/349)、0.91和0.97。结论GenoType 2.0对于利福平和异烟肼的耐药性检测具有较高的敏感度和特异度,加上其检测周期较短,可以满足临床对结核病早期诊断和及时治疗的需求。
- 江丽娜穆成孙蕊王志锐戴文汐王春花
- 关键词：抗多种药物性分子探针技术微生物敏感性试验利福平异烟肼
- 萋-尼氏抗酸染色法和金胺O荧光染色法在结核分枝杆菌痰涂片检测中的对比被引量：16
- 2018年
- 目的:比较萋-尼氏抗酸染色法(简称Z-N)和金胺O荧光染色法(简称荧光染色)在痰涂片镜检中对结核分枝杆菌的检测效果差异。方法:纳入580份痰标本,挑取相同部位制成两份涂片,分别使用Z-N和荧光染色进行染色镜检,比较两种方法的阳性检出率、阳性分级标准及读片时间上的差异。将涂片后余下的痰标本采用全自动分枝杆菌检测/药敏系统做液体培养。结果:Z-N法阳性检出率为10.8%,荧光染色法为15.3%,两种方法比较差异有统计学意义(P<0.05)。对两种方法每一级别的结果进行χ~2检验,结果表明两种染色方法在各个分级没有统计学差异(P>0.05)。荧光染色法的读片时间要明显短于Z-N。结论:荧光染色阳性检出率略高于Z-N,证明荧光染色法是一种快速、灵敏的检测方法,对肺结核的临床诊断具有重要意义。
- 赵慧赵慧王春花孙蕊谢彤穆成王志锐巨韩芳
- 关键词：结核分枝杆菌荧光染色法荧光显微镜
- 即时痰和体外培养条件下结核分枝杆菌sigma因子表达差异分析
- 2023年
- 目的为了解sigma因子在即时痰的表达情况,探索与致病性结核分枝杆菌毒力关系密切的sigma因子。方法选取2018年1~12月天津市结核病控制中心门诊部确诊的结核病患者,对其痰涂片阳性和xpert阳性确诊的肺结核随机选择20份痰阳性标本进行实验。每一例肺结核患者在其开始治疗前收集2份即时痰标本,一份立刻抽提RNA,一份进行体外培养。体外培养的菌株在生长对数期提取RNA。设计13个sigma因子的特异性引物,通过荧光定量PCR(RT-PCR)的方法,分析其在即时痰临床分离株和体外培养株的转录表达差异。以核糖体16s为参照基因,利用2^(ΔCt)分析sigma因子的转录倍数,将稳定表达的sigA作为统计分析的底物,单因素方差ANOVA分析其余sigma因子的表达差异。结果临床分离菌与H37Rv相比,所有的sigma因子统计分析差异均不显著(P均>0.05);临床分离菌与体外培养株相比,只有sigM表达量最高(P<0.05),统计分析差异显著。结论sigM在细菌感染的初级阶段转录水平明显增高,但其具体作用还不清楚,可能参与了宿主免疫系统和细菌逃离机制之间的相互平衡。
- 江丽娜穆成孙蕊王春花
- 关键词：结核分枝杆菌痰液
- Xpert Mtb/RIF、痰涂片和培养在疑似肺结核诊断中的对比研究被引量：18
- 2018年
- 目的探讨Xpert Mtb/RIF法、痰涂片、固体培养对临床疑似肺结核诊断的应用价值。方法收集315例疑似肺结核患者痰样本,分别进行金胺O荧光涂片镜检、固体培养、传统药敏、Xpert Mtb/RIF检测,并将结果进行分析。结果Xpert Mtb/RIF阳性率高于金胺O荧光涂片镜检,差异有统计学意义(χ2=40,P<0.05);Xpert Mtb/RIF检测的阳性率与结核分枝杆菌培养比较,差异无统计学意义(χ2=2.57,P>0.05)。Xpert Mtb/RIF检测结核分枝杆菌的敏感度和特异度分别为66.7%(36/54)和88.9%(232/261),以传统比例法药敏为金标准,Xpert Mtb/RIF检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为100.0%(2/2)和97.1%(33/34)。对Xpert Mtb/RIF试验和固体培养法及传统比例法药敏试验进行Kappa检验,检测结果一致性均较好(K值分别为0.514、0.785)。结论 Xpert Mtb/RIF与痰涂片、固体培养相结合可进一步提高结核分枝杆菌的检出率,对临床诊断具有重要意义。
- 孙蕊王志锐穆成赵慧王春花巨韩芳
- 关键词：分枝杆菌结核特异度
- 新法合成纳米银及其对鸟分枝杆菌的抗菌活性研究被引量：1
- 2017年
- 以山楂叶水提取物作为还原剂,采用生物法合成纳米银粒子.采用BACTEC MGIT 960 培养系统对结核分枝杆菌标准株H37Rv和鸟分枝杆菌（ATCC25291）对链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇一线抗结核药物,以及纳米银终浓度为0.15、0.30、0.60、1.20 μg/ml等4个剂量组进行药物敏感性试验.发现当pH值为11、浓度为0.5 mmol/L硝酸银溶液29.9 ml与0.1 ml山楂叶水提取物混合,反应条件为80 ℃、水浴15 min时,合成的纳米银粒径为7 （±23%） nm,为最佳合成条件.新法合成纳米银在较低浓度下（0.30 μg/ml）即显示出对鸟分枝杆菌和H37Rv具有抗菌活性.
- 王春花李维宏赵慧穆成孙蕊
- 关键词：银化合物金属纳米粒子微生物敏感性试验
- 结核分枝杆菌北京基因型亚型的流行及与耐药性的关系研究被引量：1
- 2015年
- 目的通过分析Mtb北京基因型基因组NTF（noisetransferfunction）区插入序列IS6110，揭示北京基因型在进化过程中所形成的古代株和现代株2个亚型在天津市的流行情况及其与耐药表型的关系。方法收集20122014年天津市临床分离的816株Mtb菌株。采用PCR试验分析菌株基因组中差异区域（Regionofdifference，RD）RD207和RD105片段是否有缺失，以鉴定是否为北京基因型。通过检测北京基因型菌株基因组NTF区中IS6110插入序列的数目，了解北京基因型菌株中古代株和现代株所占的比例，并进一步分析这两种亚型与菌株耐药表型间的关系。计数资料采用卡方检验进行分析，以P〈0．05为差异有统计学意义。结果在所分析的816株临床分离的Mtb菌株中，764（93．63％）株为北京基因型菌株。764株北京基因型菌株中，110株（14．40％）为古代株，654株（85．60％）为现代株。现代株中仅有1株为北京基因型w株。在古代株和现代株中，耐异烟肼菌株分别占26．36％（29／110）和10．70％（70／654）（X2=20．47，P〈0．01）；耐利福平菌株分别占14．55％（16／110）和6．57％（43／654）（X2=8．40，P〈0．01）；耐乙胺丁醇菌株分别占8．18％（9／110）和3．21％（21／654），（X2=6．17，P〈0．05）。此外，MDR-TB患者中古代株和现代株分别占13．64％（15／110）和4．74％（31／654）（X2=13．17，P〈0．01）。结论Mtb北京基因型中的现代株是天津市的主要流行株，但古代株与耐药结核病的关系更为密切，提示在天津市，对抗结核药物产生耐药并不是导致北京基因型广泛流行的主要因素。
- 谢彤巨韩芳王春花王志锐穆成赵慧王艳楠孙蕊王撷秀
- 关键词：结核分枝杆菌基因型抗药性表型
