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陈刚
作品数:
8
被引量:24
H指数:3
供职机构:
中国预防医学科学院
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发文基金:
“九五”国家科技攻关计划
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
生物学
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合作作者
詹美云
厦门大学生命科学学院生物学系
谭文杰
河南省周口市卫生防疫站
苗季
厦门大学
丛郁
中国预防医学科学院
丛旭
中国预防医学科学院
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杆状病毒
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机构
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作者
8篇
詹美云
8篇
陈刚
6篇
谭文杰
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苗季
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丛郁
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丛旭
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毕胜利
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夏宁邵
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张文英
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谭文杰
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田瑞光
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郎振为
1篇
伊瑶
1篇
陈刚
传媒
6篇
中华实验和临...
2篇
病毒学报
年份
1篇
1999
6篇
1998
1篇
1997
共
8
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被引量排序
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中国河南两株庚型肝炎病毒(HGV)NS5区部分cDNA的克隆与序列分析
1998年
通过逆转录-聚合酶链反应从我国河南省2例重叠感染HCV或HBV/HDV的献血员中,分离到HGVNS5区的部分cDNA,对其进行序列分析比较,结果表明:河南株HGVNS5区核苷酸与两株中国HGV株的同源性(>91.9%)高于国外代表株(88.5%-90.6%),但由核苷酸推导的氨基酸的同源性都无明显的地区性区别。HGVNS5区氨基酸序列较保守(同源性>91%),缺乏明显高变区。中国4株HGV在7384位发生了由C→T的变异,从而导致一个共同的保守位点的产生(由F→A)。重叠感染其他肝炎病毒时。
谭文杰
陈刚
夏宁邵
黄鹤丛
郁苗季
詹美云
关键词:
庚型肝炎病毒
非结构基因
一种同时检测丙型与庚型肝炎病毒的逆转录-巢式聚合酶链反应方法
被引量:2
1998年
目的庚型肝炎病毒(HGV)与丙型肝炎病毒(HCV)同属黄病毒科,且传播途径相似,重叠感染率高,本研究旨在建立一种同时检测HGV与HCV感染的方法。方法根据HCV与HGV的基因序列分别选取5’-UTR(HCV)与NS3(HGV)的两套引物,在同一管内进行逆转录-巢式聚合酶链反应,并初步应用于153例标本。结果该方法能同时检出HGV与HCV感染,扩增片段大小与设计相符。结论该方法简便特异。
谭文杰
夏宁
邵丛郁
陈刚
陈刚
苗季
伊瑶
关键词:
丙型肝炎病毒
庚型肝炎病毒
聚合酶链反应
中国庚型肝炎病毒河南株非结构基因(NS)3区cDNA的克隆及序列分析
1998年
目的为了研究中国庚型肝炎病毒(HGV)非结构(NS3)区基因结构特征。方法利用逆转录半巢式聚合酶链反应从河南1份HGVRNA阳性血清获得覆盖HGVNS3全长cDNA的4个片段,并克隆到pcDNAⅡ载体中,采用Sanger双脱氧末端终止法测定全部cDNA序列。结果发现克隆到的包括HGVNS3区在内的cDNA序列长度为2137个核苷酸,编码711个氨基酸。与国内外已测定的5侏全序列的相应序列进行同源性比较,其核苷酸同源性在857%~938%之间,根据核苷酸序列推导的氨基酸序列的同源性为961%~973%,3株中国HGVNS3区氨基酸存在3个共同变异位点,此外在河南株NS3区还发现了一个与其他5株全序列共同的糖基化位点。结论河南株HGVNS3区的核苷酸及氨基酸序列相对比较保守,其基因特征的阐明为NS3区基因的生物学功能研究及HGV诊断试剂的研制提供了基础。
陈刚
谭文杰
王淑萍
詹美云
关键词:
庚型肝炎病毒
CDNA克隆
病毒基因
用逆转录-套式聚合酶链反应检测我国不同临床型肝炎/肝病患者中庚型肝炎病毒感染
被引量:4
1998年
目的为了研究庚型肝炎病毒(HGV)在我国的感染状况。方法根据已发表的HGV的5’端非编码区(5’-UTR区)及螺旋酶区(NS3区)两段高度保守的基因序列分别设计两套引物,用逆转录-套式聚合酶链式反应(RT-nestedPCR)检测HGVRNA。结果从北京、秦皇岛、河南等地采集各种肝病患者及职业献血员血清354份,HGVRNA阳性79份,阳性率为22.3%。其中已确定的临床型肝炎/肝病患者254例,HGVRNA阳性者为50例,阳性率为19.6%。原因不明的或非甲~戊型肝炎患者43例,HGVRNA阳性者为13例,阳性率为30.2%。丙型肝炎阳性的职业献血员57例,HGVRNA阳性者为16例,阳性率为30.2%。结论提示HGV感染在我国多种人群中普遍存在,它不仅可能是引起非甲~戊型肝炎的重要病原之一。
丛郁
谭文杰
陈刚
苗季
张文英
田瑞光
詹美云
关键词:
庚型肝炎
病毒
RNA
聚合酶链反应
利用穿梭质粒快速构建含乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因的重组杆状病毒
被引量:3
1998年
目的应用新型杆状病毒表达系统快速构建含有HBsAg基因的重组杆状病毒,高效表达HBsAg,为HBV诊断试剂、疫苗及治疗研究提供依据。方法构建含有HBsAg基因的供体质粒pFB-BS,转化Bac-to-Bac杆状病毒表达试剂盒中的DH10Bac致敏菌,利用其含有的细菌Tn7转座系统将HBsAg基因重组至穿梭质粒Bacmid上,快速筛选出含有HBsAg基因的重组杆状病毒。结果此重组病毒能在昆虫细胞中表达出有生物学活性的HBsAg,表达产物主要集中在细胞内,ELISA滴度为1:2×104,产量可以达到2μg/106细胞。
苗季
丛旭
谭文杰
丛郁
陈刚
詹美云
关键词:
杆状病毒
乙型肝炎病毒
表面抗原
丙型肝炎病毒核壳蛋白在转基因小鼠中的表达及与Fas抗原关系的初步研究
被引量:4
1997年
将中国人丙型肝炎病毒(HCV)分离株的5’-非编码区和结构基因(5UTR+C+E1+E2)区基因插入到pcDNA3载体中构成表达质粒,通过显微注射法将此质粒注射入F1代杂交鼠(C57BL/6XICR)受精卵,并植入假孕母鼠输卵管中,经筛选获得整合有目的基因的转基因小鼠系。免疫组化研究表明,HCV核壳蛋白在转基因小鼠各组织中皆有表达,多呈核型染色,心肌细胞中可见浆型。核壳蛋白在各组织中的表达水平;心>肺>肾>肝,同时在转基因小鼠心、肾、肝中检出Fas抗原的表达,其表达水平与核壳蛋白的表达呈正相关关系。提示HCV核壳蛋白的表达可引起Fas抗原的表达。
谭文杰
郎振为
丛郁
陈刚
陈刚
詹美云
关键词:
丙型肝炎病毒
转基因小鼠
丙型肝炎
中国株HGV NS3 区基因的原核表达及其产物的抗原性分析
被引量:1
1999年
目的研究HGVNS3区基因产物的抗原性,并探讨NS3蛋白在血清学检测中的应用。方法将中国株HGVNE3区的3个基因片段分别克隆到pRSETB和pRSETC质粒载体中,构建成原核表达载体。IPTG诱导下,在大肠杆菌BL21中高效表达,获得3个重组蛋白,用Westernblot和ELISA法分别对表达产物进行分析。结果所构建的表达载体均得到高效表达,得到的重组蛋白PA、P3和P4的分子量分别为42000,30000和24000,在Westernblot和ELISA反应中均可被HGV阳性血清识别,其中HGVNS3区N端的基因产物抗原性较强。结论中国株HGVNS3区的N端存在优势的抗原决定簇,其基因产物有较好的抗原性。
陈刚
毕胜利
詹美云
关键词:
GBV-C/HGV
抗原性分析
中国株丙型肝炎病毒(HCV)结构区蛋白在昆虫细胞中的表达及加工
被引量:10
1998年
利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达了完整的中国河北株丙型肝炎病毒(HCV)结构蛋白。免疫印迹实验结果显示,表达产物中有一系列分子量不同、可以与HCV抗体阳性病人血清反应的蛋白,表明结构蛋白被宿主细胞蛋白酶切割与加工,相应分别为20kD的核心蛋白、32kD糖基化的E1蛋白、40kD的未糖化的E2蛋白和70kD糖基化的E2蛋白,另有80kD及100kD的两组前体蛋白。利用表达产物检测慢性HCV感染者血清,发现E2抗体检出率很高,而其中一部分核心抗体为阴性。
苗季
谭文杰
丛旭
丛郁
陈刚
毕胜利
詹美云
关键词:
丙型肝炎病毒
结构基因
杆状病毒
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