丛郁
- 作品数：9 被引量：36H指数：4
- 供职机构：中国预防医学科学院更多>>
- 发文基金：“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 35例庚型肝炎临床及酶学变化观察被引量：6
- 1998年
- 目的探讨庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染的临床意义。方法应用逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）检测１６５例肝炎患者血清ＨＧＶＲＮＡ和血清酶的变化。其中急性肝炎２４例，慢性肝炎７８例，肝硬化１８例，肝癌４例，乙、丙肝携带者４１例。结果在急性黄疸型肝炎中检出单纯性ＨＧＶ感染３例（１２５％），血清ＡＬＴ水平在４８８±６５Ｕ／Ｌ之间，ＡＳＴ在４５２±７１Ｕ／Ｌ之间，ＴＢｉＬ在７７１±１４３μｍｏｌ／Ｌ。急性肝炎酶的升高一般在１个月内降到正常，而ＨＧＶＲＮＡ在ＡＬＴ降到正常后仍持续一段时间才转阴，其中１例发病后９个月转阴。慢性肝炎中检出ＨＧＶＲＮＡ阳性１９例（２４４％），其中单纯性ＨＧＶ阳性４例（５１３％）。肝硬化肝癌中ＨＧＶＲＮＡ阳性４例，其中１例肝硬化为单纯性ＨＧＶ阳性。结论在急性黄疸型肝炎、乙型肝炎病毒携带者、慢性肝炎、肝硬化以及肝癌中均可检出庚型肝炎病毒，为单独感染或与乙、丙型肝炎病毒同时或重叠感染，其传播途径与乙、丙型肝炎的传播途径相同。
- 廖胜东詹美云丛郁丛郁郭小妹
- 关键词：庚型肝炎酶学变化
- 庚型肝炎病毒NS5区优势抗原表位的表达及其抗原性的初步评价被引量：1
- 2002年
- 目的 表达庚型肝炎病毒 (HGV)基因组NS5区部分基因重组抗原 ,分析其抗原性。方法 分别亚克隆了HGVNS5a、NS5b以及NS5b与C区嵌和的基因至pThioC表达载体上 ,构建成 3个重组表达质粒 ,分别转化大肠埃希菌JM1 0 9(DE3) ,用IPTG诱导表达重组蛋白。表达产物经纯化后采用Westernblot和间接ELISA方法分析 3个重组蛋白的抗原性。结果 经酶切和序列分析鉴定正确 ,3种表达蛋白均高效表达且相对分子质量与预期大小相符。Westernblot分析和间接ELISA试验表明 ,3种表达蛋白均能与抗 HGV阳性血清发生特异性反应。将应用重组蛋白检测的抗 HGV抗体与混合重组抗原 (包括C区合成肽、NS5a合成肽、NS3区基因重组抗原 )的检测结果进行了比较 ,在混合重组抗原阳性的 2 2份血清中 ,P5a检出率为 68% (1 5 2 2 ) ,P5b检出率为 91 % (2 0 2 2 ) ,Pc 5b检出率为 73 % (1 6 2 2 )。在 70份阴性标本中 ,3种抗原的检出率分别为P5a:7% (5 70 ) ;P5b :1 % (1 70 ) ;Pc 5b :6 % (4 70 )。3个重组抗原单独检出阳性的标本 ,其中有一部分经RT PCR检测亦为阳性。结论 原核表达的NS5区蛋白所检测的抗 HGV抗体不能完全被其他区段的抗原所覆盖 ,是免疫诊断HGV感染所必需的抗原表位之一。
- 丛郁焦宏远张文英田瑞光詹美云
- 关键词：庚型肝炎病毒抗原
- 用逆转录-套式聚合酶链反应检测我国不同临床型肝炎/肝病患者中庚型肝炎病毒感染被引量：4
- 1998年
- 目的为了研究庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在我国的感染状况。方法根据已发表的ＨＧＶ的５’端非编码区（５’－ＵＴＲ区）及螺旋酶区（ＮＳ３区）两段高度保守的基因序列分别设计两套引物，用逆转录－套式聚合酶链式反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）检测ＨＧＶＲＮＡ。结果从北京、秦皇岛、河南等地采集各种肝病患者及职业献血员血清３５４份，ＨＧＶＲＮＡ阳性７９份，阳性率为２２．３％。其中已确定的临床型肝炎／肝病患者２５４例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为５０例，阳性率为１９．６％。原因不明的或非甲～戊型肝炎患者４３例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为１３例，阳性率为３０．２％。丙型肝炎阳性的职业献血员５７例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为１６例，阳性率为３０．２％。结论提示ＨＧＶ感染在我国多种人群中普遍存在，它不仅可能是引起非甲～戊型肝炎的重要病原之一。
- 丛郁谭文杰陈刚苗季张文英田瑞光詹美云
- 关键词：庚型肝炎病毒RNA聚合酶链反应
- 利用穿梭质粒快速构建含乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因的重组杆状病毒被引量：3
- 1998年
- 目的应用新型杆状病毒表达系统快速构建含有ＨＢｓＡｇ基因的重组杆状病毒，高效表达ＨＢｓＡｇ，为ＨＢＶ诊断试剂、疫苗及治疗研究提供依据。方法构建含有ＨＢｓＡｇ基因的供体质粒ｐＦＢ－ＢＳ，转化Ｂａｃ－ｔｏ－Ｂａｃ杆状病毒表达试剂盒中的ＤＨ１０Ｂａｃ致敏菌，利用其含有的细菌Ｔｎ７转座系统将ＨＢｓＡｇ基因重组至穿梭质粒Ｂａｃｍｉｄ上，快速筛选出含有ＨＢｓＡｇ基因的重组杆状病毒。结果此重组病毒能在昆虫细胞中表达出有生物学活性的ＨＢｓＡｇ，表达产物主要集中在细胞内，ＥＬＩＳＡ滴度为１：２×１０４，产量可以达到２μｇ／１０６细胞。
- 苗季丛旭谭文杰丛郁陈刚詹美云
- 关键词：杆状病毒乙型肝炎病毒表面抗原
- 丙型肝炎病毒结构基因转基因小鼠的建立被引量：6
- 1997年
- 为探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）结构基因在ＨＣＶ感染中的致病性，构建了中国丙型肝炎病毒５ＵＴＲ区与结构基因区（Ｃ＋Ｅ１＋Ｅ２）的表达质粒，并通过显微注射法将其接种入小鼠受精卵内制备转基因小鼠。共注射受精卵４１０枚，存活３１２枚，植入后产仔６０只；转基因鼠尾部组织ＰＣＲ法ＤＮＡ检测证明有靶基因的整合；转基因小鼠的肝、肾、脾、心、肺、小肠、血中均有靶基因的转录，而在脑组织中无转录。３只Ｇｏ代整合小鼠经与正常ＩＣＲ小鼠配种，获Ｇ１代小鼠３２只，其中１３只有ＨＣＶ结构基因的整合。这一结果表明，ＨＣＶ结构基因转基因小鼠动物模型已建成。
- 谭文杰丛郁李光三李光三毕胜利詹美云
- 关键词：丙型肝炎病毒结构基因转基因小鼠
- 丙型肝炎病毒核壳蛋白在转基因小鼠中的表达及与Fas抗原关系的初步研究被引量：4
- 1997年
- 将中国人丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）分离株的５’－非编码区和结构基因（５ＵＴＲ＋Ｃ＋Ｅ１＋Ｅ２）区基因插入到ｐｃＤＮＡ３载体中构成表达质粒，通过显微注射法将此质粒注射入Ｆ１代杂交鼠（Ｃ５７ＢＬ／６ＸＩＣＲ）受精卵，并植入假孕母鼠输卵管中，经筛选获得整合有目的基因的转基因小鼠系。免疫组化研究表明，ＨＣＶ核壳蛋白在转基因小鼠各组织中皆有表达，多呈核型染色，心肌细胞中可见浆型。核壳蛋白在各组织中的表达水平；心＞肺＞肾＞肝，同时在转基因小鼠心、肾、肝中检出Ｆａｓ抗原的表达，其表达水平与核壳蛋白的表达呈正相关关系。提示ＨＣＶ核壳蛋白的表达可引起Ｆａｓ抗原的表达。
- 谭文杰郎振为丛郁陈刚陈刚詹美云
- 关键词：丙型肝炎病毒转基因小鼠丙型肝炎
- DNA免疫引起小鼠产生抗丙型肝炎病毒核壳区体液应答的初步研究被引量：2
- 1998年
- 采用ｐｃＤＮＡ３与ｐＭＴ两种基因表达裁体，构建包含丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心区（Ｃ区）或全结构基因区（核心区、包膜区）的质粒。经纯化后直接对Ｂａｌｂ／ｃ小鼠进行骨骼肌或尾部皮内注射，２～６ｗ后采血，用ＥＬＩＳＡ法检测小鼠抗核壳区的体液应答。结果表明：ＤＮＡ免疫可引起小鼠产生抗ＨＣＶ核壳区的体液应答，加强免疫２次后可使特异性抗体平均滴度达到１８００以上。提示ＤＮＡ免疫可作为丙型肝炎病毒感染的潜在防御手段。
- 谭文杰丛郁毕胜利苗季丛旭詹美云
- 关键词：丙型肝炎病毒DNA免疫
- 中国株丙型肝炎病毒(HCV)结构区蛋白在昆虫细胞中的表达及加工被引量：10
- 1998年
- 利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达了完整的中国河北株丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）结构蛋白。免疫印迹实验结果显示，表达产物中有一系列分子量不同、可以与ＨＣＶ抗体阳性病人血清反应的蛋白，表明结构蛋白被宿主细胞蛋白酶切割与加工，相应分别为２０ｋＤ的核心蛋白、３２ｋＤ糖基化的Ｅ１蛋白、４０ｋＤ的未糖化的Ｅ２蛋白和７０ｋＤ糖基化的Ｅ２蛋白，另有８０ｋＤ及１００ｋＤ的两组前体蛋白。利用表达产物检测慢性ＨＣＶ感染者血清，发现Ｅ２抗体检出率很高，而其中一部分核心抗体为阴性。
- 苗季谭文杰丛旭丛郁陈刚毕胜利詹美云
- 关键词：丙型肝炎病毒结构基因杆状病毒
- 丙型肝炎核心蛋白与NS3蛋白在转基因小鼠中的表达被引量：4
- 1998年
- 为研究丙型肝炎病毒核心蛋白及ＮＳ３蛋白在转基因小鼠体内的基因表达及细胞内定位，以及病毒蛋白的直接致细胞病变效应，我们采用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测了靶基因ｍＲＮＡ在转基因小鼠各种组织中的表达，用免疫组化方法分析了核心蛋白与ＮＳ３蛋白在转基因小鼠体内的表达及细胞内定位。结果表明：在转基因小鼠肝、肾、心等组织中可表达靶基因ｍＲＮＡ，核心蛋白的表达主要为核型，而ＮＳ３蛋白的表达主要为浆型。Ｚｎ２＋可诱导ｍＭＴ启动子下的靶基因表达。Ｃ与ＮＳ３蛋白的表达不引起转基因小鼠的表型与组织学发生明显改变。
- 谭文杰郎振为丛郁伊瑶詹美云
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白NS3蛋白转基因小鼠
