郭习勤
- 作品数：8 被引量：12H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 口服鼠疫F1-V重组融合基因DNA活菌疫苗的构建及免疫原性研究被引量：3
- 2007年
- 目的构建携带鼠疫耶尔森菌F1-V融合基因的重组减毒沙门菌苗,口服免疫Balb/c小鼠检测其免疫原性,为口服鼠疫活载体DNA疫苗研究打下基础。方法将F1-V融合基因克隆到真核表达载体asd-pVAX1,进一步依次将重组质粒转化减毒沙门菌X3730、X4550得到重组沙门菌X4550(asd-pVAX1/F1-V),提取重组质粒转染COS-7细胞并做免疫组化和Western-blot检测F1-V融合蛋白在细胞中的表达。以1×109CFU/只的剂量3次口服免疫Balb/c小鼠,ELISA方法检测血清中抗体水平。结果构建的重组减毒沙门菌转染COS-7细胞后,免疫组化和Western-blot试验证明F1-V融合蛋白在细胞中得到了瞬时表达,ELISA检测到免疫小鼠血清有特异性抗体IgG产生。结论构建的重组沙门菌能运送DNA疫苗到体内并成功释放质粒刺激机体产生特异性免疫应答,为口服鼠疫活载体DNA疫苗的黏膜免疫研究打下了基础。
- 郭习勤焦新安王栋董梅邢丽颜艳何维明王希良
- 关键词：鼠疫耶尔森菌鼠疫DNA疫苗伤寒沙门菌
- 布尔山羊流行性淋巴管炎病原诊断及感染途径研究
- 2006年
- 采用微生物学技术,从流行病学、临床诊断、血相及血液生化指标测定、微生物检验及感染途径等方面,对陕西省舍饲布尔山羊良种肉羊罹患流行性淋巴管炎病进行了较详细的研究。结果表明,该病病原为假性皮疽囊球菌(Cryptococcus farciminosus),通过损伤的皮肤粘膜而感染致病。同时提出了综合防治措施。
- 李联正马秋明何维明赵卓郭习勤谢应国王亚萍张迎疆
- 关键词：布尔山羊流行性淋巴管炎病原诊断
- 鼠疫亚单位疫苗和口服活载体疫苗的研究
- 鼠疫是由鼠疫耶尔森菌(Y.pestis)引起的人畜共患烈性传染病，人间鼠疫包括肺鼠疫和腺鼠疫，腺鼠疫是通过跳蚤叮咬感染，Y.pestis迁移到肺部就会引起肺鼠疫感染，肺鼠疫能够通过气溶胶在人与人之间传播，在不予治疗的情况...
- 郭习勤
- 关键词：鼠疫亚单位疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌致病作用免疫保护
- 文献传递
- 鼠疫DNA疫苗pVAX1/F1-V安全性初步研究被引量：2
- 2006年
- 为了研究鼠疫DNA疫苗pVAX1/F1-V质粒的安全性,试验运用SDS-PAGE电泳和琼脂糖电泳等方法检测了鼠疫DNA疫苗pVAX1/F1-V质粒的纯度,并以小鼠为动物模型进行了质粒pVAX1／F1-V的急性毒性和长期毒性试验,用PCR方法检测外源基因在小鼠组织中的分布情况,用ELISA、EIISPOT方法检测了其自身的免疫反应。结果表明,提取的质粒pVAX1/F1-V未检测到核酸及菌体蛋白污染;注射初期质粒pVAX1/F1-V 主要分布于注射部位的肌肉组织,其他组织有散在分布;小鼠接种4周后,质粒pVAX1/F1-V仅分布于注射部位。小鼠注射pVAX1/F1-V质粒后未产生明显的毒副反应及自身免疫损伤,也未检测到自身抗体。初步证明鼠疫DNA 疫苗pVAX1/F1-V安全性良好,为鼠疫菌新型DNA疫苗的应用奠定了基础。
- 郭习勤王栋王希良蒋会婷黄顺军韩岳何维明
- 关键词：鼠疫耶尔森氏菌毒性试验DNA疫苗安全性
- 鼠疫F1和V保护性抗原免疫学研究进展被引量：2
- 2006年
- 鼠疫是一种烈性人兽共患传染病,曾经导致历史上10多亿人死亡,目前在世界各地还均有流行。抗生素治疗一般对腺鼠疫有效,但难以治疗肺鼠疫,经常有抗生素治疗仍死亡的情况发生。灭活疫苗对肺鼠疫无效,减毒活疫苗存在毒力返强的安全隐患。F1和V亚单位疫苗在动物模型中对腺鼠疫和肺鼠疫均有效,已经用减毒沙门菌系统通过口服和鼻腔途径传递系统进行免疫研究。文章综述了鼠疫亚单位疫苗和减毒活载体疫苗抗原免疫学研究进展。
- 郭习勤何维明
- 关键词：鼠疫耶尔森菌鼠疫疫苗
- 炭疽杆菌培养上清液抗原的制备及免疫保护效果测定被引量：4
- 2006年
- 目的制备炭疽培养上清液抗原并对其免疫效果进行测定。方法将炭疽A16r菌种接种于培养基中培养,收集无菌滤液,并进行超滤浓缩,经Al(OH)3佐剂吸附后,皮下免疫Balb/c小鼠,用炭疽Vollum(s)强毒株腹腔攻击测定其免疫效力。结果制备出具有高保护性的上清液抗原,9 h产物对Balb/c小鼠免疫效果良好(94.4%)。结论本研究为进一步研究炭疽疫苗免疫保护机制和炭疽疫苗改进研究打下基础。
- 董梅马丽娟张松乐张良艳郭习勤邢丽杨海荣王希良
- 关键词：炭疽杆菌培养上清液
- 口服鼠疫F1-V重组融合蛋白活菌疫苗的构建及免疫效果的初步研究被引量：1
- 2007年
- 鼠疫耶尔森菌能产生很多由染色体或质粒编码的毒力因子，包括pgm、pst、Yops、F1抗原、V抗原等。F1和V抗原已被证实为主要保护性抗原，且存在属间保守性，F1-V融合抗原分子在免疫原性和免疫保护性上具有叠加效应，将两者联合接种可保护小鼠抵抗109峨强度攻击。在鼠疫杆菌基因组、蛋白组和功能基因组研究的基础上，F1和V是鼠疫新型疫苗研究首选的保护性抗原分子的靶标。现有鼠疫死菌苗和鼠疫活菌苗在剂型和接种方式没有黏膜保护作用，可能会因此影响疫苗的保护效果。沙门菌可有效提呈抗原到肠道的免疫系统，在肠道组织、肝脏中增殖，可持续诱导机体细胞、体液免疫和黏膜免疫。本实验通过含有asd基因的重组质粒与缺失asd基因的减毒沙门菌构成的宿主-载体平衡致死系统，在无抗生素选择压力的条件下在载体菌株中稳定表达鼠疫F1-V融合抗原蛋白，以重组菌灌胃法黏膜途径免疫小鼠检测其免疫原性，尝试研究预防肺鼠疫的口服活载体疫苗。
- 郭习勤王栋邢丽崔萍董梅王希良
- 关键词：鼠疫耶尔森菌重组融合蛋白免疫效果口服保护性抗原功能基因组
- 鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原的制备及其免疫保护效果的研究被引量：5
- 2006年
- 为制备鼠疫耶尔森氏菌F1-V重组融合蛋白抗原,观察其免疫原性和免疫保护效果,通过疏水层析、阴离子交换层析、凝胶过滤层析纯化鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原.用氢氧化铝凝胶吸附制备试验性鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原,皮下接种健康BALB/c小鼠,ELISA检测血清F1-V抗体效价、MTT法测定淋巴细胞增殖能力,进一步用400LD50鼠疫耶尔森氏菌141标准毒株皮下攻毒,观察动物的存活情况.通过三步柱层析纯化获得的鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原纯度达到90%以上.氢氧化铝凝胶吸附的鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原免疫BALB/c小鼠三次,血清抗F1-V抗体效价为1∶(51200±800),对耶尔森氏菌141强毒株攻击的保护率是90%.上述结果表明,制备的鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原具有良好的免疫原性和免疫保护效果,为研制鼠疫F1-V重组融合蛋白疫苗奠定了基础.
- 王栋黄顺军邢丽郭习勤韩岳罗德炎李敏王希良
- 关键词：鼠疫耶尔森氏菌免疫保护效果
