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穿梭载体／哺乳动物细胞系统──一种检测环境诱变剂的新方法被引量：1: 1995年; 穿梭载体／哺乳动物细胞系统──一种检测环境诱变剂的新方法谈幸之，李申德，周宇红，冯晓莲，罗雪云（北京卫生部食品卫生监督检验所毒理室１０００２１北京医科院肿瘤研究所细胞生物学室１０００２１）目前，穿梭质粒检测系统已成为环境诱变分子机理研究的一种重要手段...; 谈幸之李申德周宇红冯晓莲罗雪云; 关键词：环境诱变剂哺乳动物细胞系统

Psp189／veroE6细胞检测系统的建立及其在筛选霉菌毒素诱变性中的应用被引量：6: 1996年; 采用国内尚未报道的新型穿梭质粒Ｐｓｐ１８９与非洲绿猴肾ｖｅｒｏＥ６细胞组成穿梭质粒／哺乳动物细胞诱变检测系统并成功地将其应用于食品中黄曲霉毒素Ｂ１（ＡｆａｔｏｘｉｎＢ１，ＡＦＢ１）的诱变性检测，结果表明：随着ＡＦＢ１作用质粒ＤＮＡ时间的延长，经哺乳动物细胞内复制并在宿主菌中筛选得到的突变体逐渐增加，并呈明显的剂量－反应关系，检出的突变体经０．; 谈幸之李申德罗雪云周宇红周宇红杨晓洁冯晓莲; 关键词：穿梭质粒食品检测

穿梭质粒pSP189/哺乳动物细胞系统在AFB_1诱变分子机理研究中的应用被引量：5: 1997年; ＡｆｌａｔｏｘｉｎＢ１（ＡＦＢ１）是食品中广泛存在的致癌性最强的霉菌毒素之一，本文将基于ＳＶ４０病毒的短暂复制型穿梭质粒ｐＳＰ１８９与非洲绿猴肾细胞（ＶｅｒｏＥ６细胞系）组成穿梭质粒／哺乳动物细胞诱变检测系统检测ＡＦＢ１的诱变性，并通过对靶基因ＳｕｐＦＴＲＮＡ的序列分析了解ＡＦＢ１在ＤＮＡ一级结构上的作用位点，类型及序列特异性等信息。结果表明：在体外采用大鼠肝微粒体与ＡＦＢ１和ｐＳＰ１８９直接作用形成ＡＦＢ１－ＤＮＡ加合物，再转染ＶｅｒｏＥ６细胞，随着ＡＦＢ１作用质粒ＤＮＡ时间的延长，经哺乳动物细胞内复制并在宿主菌中筛选得到的突变体逐渐增加，并呈明显的剂量－反应关系，检出的突变体经０．８％琼脂糖凝胶电泳分析大多为点突变，对其中５３个独立突变子的靶基因ＳｕｐＦＴＲＮＡ的序列分析结果表明：ＡＦＢ１诱发ｐＳＰ１８９靶基因ＳｕｐＴＩＲＮＡ的突变大多单碱基置换，占突变子总数的８４．９％，９５．２％的碱基置换发生在ＧＣ位点，其中以ＧＣ→ＴＡ的颠换占大多数，约为５３．３％，其次为ＧＣ→ＡＴ的转换，约为３５．６％；ＡＦＢ１诱发的突变在靶基因ＳｕｐＦＴＲＮＡ的分布并非是随机的，而是存在着一定的序列特异性，其特征序列为“５＇－?; 谈幸之李申德罗雪云周宇红冯晓莲杨晓洁崔惠云; 关键词：穿梭质粒黄曲霉毒素诱变癌变

穿梭质粒pSP189快速提取和转染的方法被引量：1: 1996年; 本文采用基于ＳＶ４０病毒的新型穿梭质粒ｐＳＰ１８９，作为ＰＺ１８９的衍生质粒其独特性在于ｐＳＰ１８９是一个质粒群（ＰｌａｓｍｉｄＰｏｐｕｌａｔｉｏｎ）每个质粒在其靶基因ｓｕｐＦＴＲＮＡ的３’端都插入一段随机产生的８－ｂｐ的标识序列ＳｉｇｎａｔｕｒｅＳｅｑｕｅｎｃｅ），通过对突变子靶基因ＳｕｐＦ和标识序列同时测序可以鉴别出一个转染细胞瓶中两个靶基因序列改变相同的突变子是独立突变（ＩｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔＭｕｔａｔｉｏｎ）还是同胞突变（ＳｉｂｌｉｎｇＭｕｔａｔｉｏｎ）。由于ｐＳＰ１８９的独特性，我们总结出一套简便、快速的质粒ＤＮＡ转化、扩增保存、提取、转染及从哺乳动物细胞中回收纯化的方法，结果表明，用我们的一步法从细菌中提质粒和改良的Ｈｉｒｔ法从细胞中回收质粒基本没有细菌和细胞ＤＮＡ的污染，而且不需超离心即可达到较高的纯度并获得较高的转化率和转染率，为进一步筛选分离突变体并对靶基因进行ＤＮＡ序列分析打下了基础。; 谈幸之周宇红李申德李申德罗雪云杨晓洁; 关键词：穿梭质粒

大蒜水提取液对大鼠体内抗氧化酯及谷胱甘肽转硫酶的影响: 1992年; 本文观察了大蒜水提取液对wistar大鼠体内谷胱甘肽转硫酶(GST)和三种抗氧化酶即谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的影响。实验结果显示:大蒜能够显著增强大鼠体内抗氧化酶及GST酶活性,并呈一定的剂量反应关系。该研究提示:1)增强机体内抗氧化酶和解毒酶GST的活性和水平可能是大蒜抗癌防衰老的机制之一;2)大蒜可能对于人类肿瘤的预防及抗衰老具有广泛的应用前景。; 谈幸之陈钧蔡有余; 关键词：大蒜抗氧化酶谷胱甘肽转硫酶

大蒜液对NIH小鼠肝组织丙二醛和谷胱甘肽含量的影响: 1993年; 以35mg/Kg体重、70mg/Kg体重、140mg/Kg体重三个剂量灌胃NIH小鼠,测定了其肝组织中脂质过氧化产物丙二醛(Malondialdehycle,MDA)和生物抗氧化剂谷胱甘肽(Glutathione,GSH)含量。结果表明,大蒜液在该剂量范围内抑制NIH小鼠肝匀浆中MDA的含量,同时增加GSH的含量,说明大蒜液在体内可能具有一定的抗氧化和解毒作用。; 谈幸之戴寅徐晋康蔡有余; 关键词：大蒜液 NIH小鼠脂质过氧化产物谷胱甘肽大蒜辣素

霉菌毒素致突变致癌性作用机制研究进展（综述）: 1996年; 霉菌毒素致突变致癌性作用机制研究进展（综述）谈幸之，罗雪云卫生部食品卫生监督检验所（１０００２１）霉菌毒素是自然界中广泛存在的真菌的Ⅱ相代谢产物，对人和动物表现出多种毒效应。在迄今发现的许多霉菌毒素中，已确认黄曲霉毒素（Ａｆｌａｔｏｘｉｎｓ，ＡＦｓ）...; 谈幸之罗雪云; 关键词：霉菌毒素致癌性致突变性癌变过程食管癌高发区

一种快速简便可靠的穿梭质粒靶基因序列测定方法: 1998年; 在对突变的分子机理所进行的研究中，ｐＳＰ１８９穿梭载体是一种非常重要且极具使用价值的工具。基于该载体系统，我们探索并建立了一简单、快速和高效的程序步骤用以对载体上的ＳｕｐＦＴＲＮＡ靶基因序列进行测定和分析。在此方法中，我们采用碱变性法对双链质粒ＤＮＡ模板进行变性，再使用５＇端标记有γ－３２Ｐ－ＡＴＰ的引物对所制备的ＤＮＡ单链序列进行测定并获得了满意的实验结果。; 谈幸之李申德罗雪云; 关键词：穿梭质粒靶基因诱变

轮状病毒1、2血清型VP7蛋白基因的扩增及其克隆被引量：1: 1994年; 用聚合酶链反应扩增了轮状病毒Ｗａ株（第１血清型）和ＤＳ－１株（第２血清型）的全长ＶＰ７蛋白基因，利用两引物５＇末端的多接头位点，以ｐＵＣ１８质粒为载体构建了含两株ＲＶＶＰ７基因ｃＤＮＡ拷贝的重组体。经ＰＣＲ扩增制备得１～４血清型ＲＶＶＰ７基因高变区（５１－３９２核苷酸）￣（３２）Ｐ标记核酸探针，对重组质粒型别进行了Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和斑点杂交鉴定，结果Ｗａ株ＶＰ７基因重组体只与１型探针呈强杂交信号，ＤＳ－１株重组体只与２型探针呈强杂交信号。; 陈钧纪绍忠谈幸之范明远; 关键词：轮状病毒基因克隆血清型蛋白基因

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谈幸之

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