范文红
- 作品数：42 被引量：60H指数：6
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学天文地球理学更多>>
- 血管内皮生长因子抑制剂结合活性试验两种结果分析方法比较
- 2019年
- 目的:对血管内皮生长因子抑制剂(VEGF Trap)结合活性试验两种结果分析方法进行比较,以考察两者的差异。方法:采用固定剂量的VEGF与系列稀释的VEGF Trap处理之后,检测未结合的VEGF的量,分别以未结合的VEGF量对VEGF Trap浓度梯度和未结合的VEGF检测板的OD值对VEGF Trap浓度梯度进行四参数方程拟合,两种方法计算该产品的结合活性。结果:两种方法均满足试验有效性条件,且血管内皮生长因子抑制剂供试品和标准品的半数抑制浓度(IC50)均分别为3.68和3.6pmoL·L-1,供试品的结合活性为102%。结论:证明了两种分析方法得到的结果完全一致。为同类产品结合活性计算方法的选择提供借鉴。
- 毕华李永红范文红陶磊裴德宁丁有学饶春明
- 关键词：血管内皮生长因子抑制剂结合活性半数抑制浓度
- CHO细胞DNA国家标准品的研制
- 目的：建立CHO细胞DNA残留量定量测定用国家标准品。 方法：使用QIAGEN Genomictip 500/G以及基因组DNA纯化试剂制备了CHO细胞基因组DNA作为标准品原料，通过紫外分光光度法和电泳进行纯度和含量...
- 王兰高凯范文红毕华付志浩李永红饶春明
- 关键词：国家标准品紫外分光光度法定量PCR法
- 重组人粒细胞刺激因子的N端氨基酸序列异质性分析被引量：1
- 2018年
- 目的:分析重组人粒细胞刺激因子(rhG-CSF)的N端异质性。方法:采用反相超高效液相色谱法分离rhG-CSF中N端不一致的各组分;色谱条件:采用Waters BEH 300 C4(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%三氟乙酸水溶液(A)-0.1%三氟乙酸乙腈溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.2 mL·min^(-1)。分别收集各组分并冷冻干燥,采用N端测序仪测定各组分的N端氨基酸序列;液质联用测定rhG-CSF的相对分子质量,对N端测序结果进行验证质谱仪采用Waters公司Xevo G2-S质谱仪,正离子电喷雾离子源,毛细管电压3.0 kV,锥孔电压40 V,去溶剂气体温度350℃,去溶剂气体流速800 L·h^(-1),扫描范围(m/z)500～3 000。结果:色谱分离得到3个组分;N端氨基酸序列测定结果显示,3个组分分别为rhG-CSF主成分及2个N端异质性相关蛋白;质谱相对分子质量测定结果与N端测序结果一致。结论:应用色谱法及质谱法可对rhG-CSF中的N端异质性相关蛋白进行分析检测,检测结果可为国产rhG-CSF制品的质量控制和标准提升提供参考和数据支持。
- 韩春梅刘兰杨靖清陶磊范文红史新昌饶春明
- 关键词：重组人粒细胞刺激因子相关蛋白质谱
- 液质联用对重组胰高血糖素样肽-1-Fc融合蛋白中的制品相关蛋白进行定性定量分析被引量：1
- 2018年
- 目的：对重组胰高血糖素样肽-1-Fc融合蛋白（rGLP-1-Fc）的制品相关蛋白进行定性及定量分析。方法：利用液质联用法,对r GLP-1-Fc原液中制品相关蛋白的修饰类型进行鉴定;通过胰蛋白酶酶切液质肽图的方法,对修饰位点进行鉴定;采用反相超高效液相色谱法,测定3批原液中制品相关蛋白的比例。结果：该蛋白原液中主要存在3种制品相关蛋白;液质联用检测结果显示：1种为氧化及糖化的修饰产物,另外2种为一条二硫键解链导致的变异体;液质肽图分析发现氧化及糖化发生在第28位赖氨酸残基;对3批原液进行了检测,3种制品相关蛋白的平均含量分别为（2.37±0.04）%、（9.07±0.20）%和（4.03±0.07）%。结论：利用液质联用技术对rGLP-1-Fc原液中的制品相关蛋白进行了初步的定性、定量分析,测定结果可为同类产品的制品相关蛋白分析提供技术支持。
- 陶磊刘周阳韩春梅史新昌聂爱英范文红饶春明
- 关键词：融合蛋白液相色谱-质谱联用
- 重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体突变体质控方法与质量标准的建立
- 2016年
- 目的建立重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体突变体的质控方法和质量标准。方法利用乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖抑制试验测定重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体突变体的生物学活性;RP-HPLC和SECHPLC测定其纯度;胰酶酶切,HPLC测定其肽图;荧光定量PCR检测E.coli宿主DNA残留量;ELISA法测定宿主蛋白残留量;Edman降解法进行N-末端序列测定;水平等电聚焦电泳法测定等电点;其余检测项目按《中国药典》三部(2010版)规定进行。同时对通常在原液中进行检定的宿主DNA残留、菌体蛋白残留、N-末端序列测定进行初步的方法验证,考察其在成品中进行检测的可行性。结果经初步验证,在成品中进行宿主DNA残留、菌体蛋白残留、N-末端序列测定具有可行性,用建立的方法对重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体突变体成品进行检定,各项指标均符合《人用重组DNA制品质量控制技术指导原则》和《中国药典》三部(2010版)的要求。结论建立的质控方法和质量标准具有保证产品安全、有效、质量可控的特点,可用于该类产品的常规检定。同时只对成品进行质控的方法和质量标准对同类产品的质量控制具有借鉴意义。
- 毕华李永红杨靖清丁有学范文红韩春梅李响史新昌裴德宁饶春明
- 关键词：生物学活性
- 人干扰素α2b理化对照品质控方法与质量标准研究
- 2023年
- 目的:建立人干扰素α2b(hIFN α2b)理化对照品的质控方法与质量标准。方法:使用2020年版《中华人民共和国药典》报告基因法测定hIFN α2b理化对照品的生物学活性、福林酚法测定蛋白质含量、电泳法和高效液相色谱法测定纯度、等电聚焦电泳法测定等电点、Edman降解法测定N端氨基酸序列;液质联用法测定相对分子质量,使用C4(50 mm×2.1 mm, 3.5μm)色谱柱和QTof质谱仪;液质联用法测定质量肽图和二硫键,使用C18(100 mm×2.1 mm, 1.7μm)色谱柱和QTof质谱仪;建立hIFN α2b理化对照品的质量标准;对7批由不同企业提供的理化对照品进行检测。结果:建立了hIFN α2b理化对照品的质量标准,7批hIFN α2b理化对照品的比活性为1.2×10^(8)~2.8×10^(8)IU·mg^(-1),电泳纯度均>96.0%,高效液相色谱纯度均>95.0%,等电点主区带为5.2~6.6,N端氨基酸序列为(M)CDLPQTHSLGSRRT,相对分子质量、质量肽图和二硫键测定结果均与理论值相符。结论:建立的质控方法与质量标准可以比较全面地评价hIFN α2b理化对照品的质量,各企业的理化对照品均符合质量标准的要求。
- 裴德宁陶磊韩春梅范文红杨靖清秦玺毕华周勇
- 关键词：质控方法蛋白结构
- 重组人源化兔抗vEGF单克隆抗体的生物学活性检测方法的建立
- 目的:建立重组人源化抗vEGF单抗的生物学活性测定方法。方法:利用血管内皮生长因子(vEGF)能够刺激人脐静脉血管内皮细胞HUVEC增殖的原理,通过测定抗vEGF单抗抑制这种增殖作用的效果,进而测定重组人源化抗vEGF单...
- 范文红毕华饶春明
- 关键词：生物制品生物学活性
- 文献传递
- 美妥珠(HcHAb18)单抗质量标准的建立及理化对照品结构确证
- 目的:建立美妥珠单抗的质控方法和质量标准。方法:利用乳酸脱氢酶检查外周血分离的单核细胞对人肺腺癌A549细胞的杀伤效应测定美妥珠单抗的生物学活性;非还原CE-SDS和SEC-HPLC测定纯度;胰酶酶切,HPLC测定其肽图...
- 范文红陶磊李响韩春梅杨靖青丁有学裴德宁郭莹饶春明王军志
- 关键词：ADCC纯度分析结构确证液质联用
- 文献传递
- 美妥珠(HcHAb18)单抗质量标准的建立及理化对照品结构确证
- 目的：建立美妥珠单抗的质控方法和质量标准。方法：利用乳酸脱氢酶检查外周血分离的单 核细胞对人肺腺癌A549细胞的杀伤效应测定美妥珠单抗的生物学活性；非还原CE-SDS和SEC-HPLC测定 纯度；胰酶酶切,HPLC测定其...
- 范文红王军志陶磊李响韩春梅杨靖青丁有学裴德宁郭莹饶春明
- 关键词：ADCC纯度分析结构确证液质联用
- 重组人源化兔抗血管内皮生长因子单克隆抗体生物学活性检测方法的建立被引量：6
- 2012年
- 目的建立重组人源化兔抗血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)单克隆抗体生物学活性检测方法。方法以人脐静脉血管内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)作为基质细胞,对23支重组人源化兔抗VEGF单抗参比品、24支供试品原液和10支成品进行生物学活性测定,并计算参比品和供试品的IC50值,计算变异系数;对参比品进行活性赋值后,再计算供试品活性,计算变异系数。结果重组人源化兔抗VEGF单抗参比品、原液和成品的IC50值分别为(49.41±23.60)、(47.42±19.45)和(39.13±16.25)ng/ml,变异系数分别为47.76%、41.02%和41.53%;参比品活性赋值为5.08×104U/ml;供试品原液活性为(0.88±0.19)×106U/ml,变异系数为21.6%,供试品成品活性为(1.49±0.41)×106U/支,变异系数为27.5%。结论成功建立了重组人源化兔抗VEGF单抗生物学活性测定方法,确定了参比品的活性单位,为重组人源化兔抗VEGF单抗生物学活性的检测提供了切实可行的方法。
- 范文红毕华饶春明王军志
- 关键词：血管内皮生长因子人脐静脉血管内皮细胞生物学活性
