胡迎春
- 作品数：93 被引量：153H指数：8
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 人支气管上皮细胞恶性转化相关基因的克隆被引量：1
- 2001年
- [目的]根据克隆的大鼠气管上皮细胞恶性转化EST片段 (GenBankAccessionNumberAF011363)克隆相应的人全长基因并探索其功能。[方法]根据大鼠EST序列进行生物素探针标记 ,cDNA文库筛选 ,cDNA快速终末端扩增延伸目的基因直至获得全长序列。[结果]HRNT 1全长cDNA4256bp ,开放阅读框架2760bp,位于254bp -3016bp之间 ,编码区内含有9个TRP序列 ;位于人类染色体Xq13;cDNA序列收录于GenBank中(AccessionNumberAF223393)。HRNT_1在人支气管上皮恶性转化细胞以及肺癌细胞中具有较高表达。[结论]HRNT_1为一功能基因 ,其高表达与支气管上皮细胞恶性转化相关。
- 张开泰李刚葛世丽胡迎春吴德昌
- 关键词：基因克隆恶性转化肺癌
- nm23参与α粒子辐射致大鼠气管上皮细胞恶性转化的原发过程
- 1999年
- 目的：克隆α粒子辐射致细胞恶性转化相关基因。方法：采用ｍ Ｒ Ｎ Ａ 差异显示技术识别原代大鼠气管上皮细胞同由α粒子辐射诱发恶转的大鼠气管上皮细胞之间的差别表达基因。结果：共克隆到１５ 个可能同α粒子辐射致细胞恶性转化相关的差异表达基因片段（ Ｅ Ｓ Ｔｓ） ，共向 Ｇｅｎ Ｂａｎｋ 登录７ 条新基因序列。其中克隆 Ｚ Ｃ６６ 同肿瘤转移抑制基因ｎｍ ２３ 高度同源，经 Ｎｏｒｔｈｅｒｍ 杂交证实其在恶转的大鼠气管上皮细胞中高表达，序列分析提示ｎ ｍ２３在此恶转细胞中存在突变。结论：上述结果为进一步深入研究辐射致癌提供了线索，并提示ｎ ｍ２３ 基因可能参与α粒子辐射致大鼠气管上皮细胞恶性转化的原发过程。
- 李刚吴德昌胡迎春赵永良项晓琼
- 关键词：NM23气管上皮细胞恶变
- α粒子辐射诱导人肺鳞癌裸鼠转移模型的建立
- 2004年
- 目的 建立α粒子辐射诱导人肺鳞癌裸鼠转移模型。方法 α粒子辐射诱导人肺鳞癌细胞系BERP35T4原代接种裸鼠皮下 ,后采用组织块接种的方法 ,在鼠间连续传代 3次 ,计算原代成瘤率及传代成活率 ,并观察肿瘤的转移情况 ,病理切片和免疫组织化学鉴定肿瘤的性质和来源。结果 (1)α粒子辐射诱导人肺鳞癌细胞系BERP35T4原代接种成瘤率为 4 4 4 % (4 9) ;(2 )原代肿瘤的体表转移率与肺转移率均为 2 5 % (1 4 ) ;(3)病理切片鉴定为低分化鳞状上皮细胞癌 ;(4)免疫组织化学显示CK3和EMA表达阳性。结论 采用组织块接种的方法 ,在α粒子辐射诱导人肺鳞癌细胞系BERP35T4的基础上 ,经过裸鼠体内连续传代 3次 ,成功地建立了人类肺癌裸鼠转移模型。
- 胡迎春项晓琼徐勤枝霍艳英李邦印段瑞峰李刚张开泰吴德昌
- 关键词：Α粒子肺鳞癌免疫组织化学
- 亚细胞定位及信号转导检测技术在hrnt-1基因功能研究中的应用
- 2002年
- 目的 :hrnt_1是本实验室克隆的全长基因 ,GenBankNr库中编号为AF2 2 3393。实验证实该基因与支气管上皮细胞恶性转化相关 ,但具体的生物学功能尚不清楚。本研究旨在建立一种功能研究的方法 ,为探索hrnt_1在细胞恶性转化过程中的生物学功能提供线索。方法 :构建hrnt_1与pEGFP荧光素表达载体 ,通过融合蛋白的表达 ,观察hrnt_1基因产物在细胞中的位置分布 ;利用信号通路检测技术 ,观测hrnt_1对细胞内信号转导通路的影响。结果 :hrnt_1产物主要分布在细胞核中 ,对Myc Max,GR ,NFκB ,EIK_1 STAT等核转录因子活性有上调作用。结论 :细胞定位与信号通路检测技术相结合的方法简便、快速 ,适用于新的疾病基因功能研究。
- 谢玲张开泰项晓琼胡迎春范保星霍艳英李邦印段瑞峰吴德昌
- 关键词：亚细胞定位信号转导基因表达
- 卷烟烟气诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化不同阶段的基因表达谱研究
- 2008年
- 背景与目的:应用基因芯片技术,分析卷烟烟气(cigarette smoke condense,CSC)诱发永生化人支气管上皮细胞BEP2D发生恶性转化不同阶段的基因表达谱变化。材料与方法:用CSC对不同代龄的永生化人支气管上皮细胞BEP2D进行染毒,用软琼脂克隆及流式细胞术对染毒细胞的恶性转化性状进行检测,分离培养已发生恶性转化的软琼脂克隆细胞。分别提取不同代龄染毒细胞的总RNA,选用人类全基因组寡核苷酸芯片Sentrix Human-6Expression Bead Chip,通过芯片的杂交、清洗及扫描,对染毒细胞的基因表达谱进行分析。结果:用CSC对BEP2D细胞染毒后,从第30代细胞(P30)开始,细胞获得了锚着独立生长特性,流式细胞术分析显示,P40细胞出现多倍体。我们从软琼脂克隆中分离出具有恶性转化特性的细胞C2,与烟气溶剂对照细胞相比,染毒后细胞P10、P20、P30、P40及C2中均表达下调的基因有269个,表达上调的基因有63个,这些基因的改变发生在CSC诱发BEP2D细胞恶性转化的早期阶段,与癌启动相关。CSC染毒后,P10、P20表达没有变化,而在P30、P40及C2中发生表达下调的基因有316个,表达上调的基因有147个,这些基因的改变发生在CSC诱发BEP2D细胞恶性转化的中期,与癌促进相关。结论:从CSC诱发BEP2D细胞恶性转化不同阶段的基因表达谱,筛选出一批与癌症的启动及发展阶段相关的基因,为深入了解吸烟致肺癌的发生、发展机制提供了有价值的信息,同时也为制备吸烟致肺癌相关基因的检测芯片奠定实验基础。
- 胡迎春霍艳英钟科军杨陟华徐国蕊潘秀颉吴德昌朱茂祥
- 关键词：卷烟烟气支气管上皮细胞恶性转化基因表达谱
- 生物素标记文库筛选与cDNA快速终末端扩增技术克隆HRNT-1新基因被引量：8
- 2000年
- 目的：大鼠ZA73基因(GenBank accession number：AF011363)是本实验室从大鼠支气管上皮恶性转化细胞模型中采用mRNA差异显示技术克隆到的EST片段，与支气管上皮细胞恶性转化相关。根据此EST序列，克隆人全长基因。材料与方法：运用生物素标记探针筛选人cDNA文库、将筛选基因进行cDNA快速终末端扩增(Rapid amlification of cDNA ends)，直至获得全长序列。结果：HRNT-1 cDNA总长4256 bp，开放阅读框架2760 bp，5′非编码序列253bp，3′非编码序列1240 bp，已被GenBank收录于Nr数据库中(Accession number：AF223393)。结论：采用生物素标记cDNA文库筛选和cDNA快速终末端扩增相结合的技术是克隆全长cDNA快速而有效的方法，尤其适用于那些长度超过2kb的基因。
- 李刚葛世丽胡迎春吴德昌张开泰
- 关键词：文库筛选CDNA
- Pten^(+/+)MEFs与Pten^(-/-)MEFs细胞系的差异表达蛋白质组分析
- 2008年
- 目的:研究PTEN缺失细胞的蛋白表达规律。方法:用双向电泳技术比较Pten+/+MEFs与Pten-/-MEFs细胞的蛋白表达差异;用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对差异蛋白进行质谱分析;用肽质量指纹图谱检索数据库对差异蛋白进行鉴定;用Northern印迹和Western印迹验证蛋白的差异表达。结果:与Pten+/+MEFs细胞相比,Pten-/-MEFs细胞有明显的差异性蛋白表达谱,Pten-/-MEFs细胞中表达下降的蛋白有铜锌超氧化物歧化酶、过氧化物氧化还原酶5和6等,表达增加的蛋白有低分子量蛋白酪氨酸磷酸酶和丝切蛋白(coffilin)1。结论:PTEN的缺失引起细胞内多种蛋白表达改变,这些表达改变的蛋白可能与PTEN缺失后细胞癌变相关。
- 段瑞峰傅春玲李刚杨柳胡迎春吴德昌霍艳英
- 关键词：PTEN双向电泳
- 多效生长因子通过JNK信号通路负调控Schlafen2基因表达被引量：2
- 2008年
- 实验室前期研究发现,多效生长因子(pleiotrophin,PTN)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞中Schlafen2(Slfn2)基因高表达.为了探讨Ptn沉默诱导Slfn2基因表达可能涉及的信号通路,应用Western印迹检测外源性PTN因子(终浓度50ng/μl)对Ptn沉默细胞JNK磷酸化水平的影响;应用Northern印迹分别检测JNK和p38通路特异性抑制剂对Ptn沉默细胞Slfn2基因转录水平的影响.结果发现,Ptn沉默细胞内JNK磷酸化水平高于对照细胞,外源性PTN处理后沉默细胞内JNK磷酸化水平下调;阻断JNK通路呈时间依赖性抑制Ptn沉默细胞中Slfn2基因转录,阻断p38通路对Ptn沉默细胞中Slfn2转录水平没有明显影响.结果提示,Ptn可能通过抑制其下游JNK/MAPK通路来负调控Slfn2的表达.
- 方玲胡迎春杨柳刘梦伊刘昕潘兴斌吴德昌霍艳英
- 关键词：多效生长因子基因沉默
- 磷酸化PTEN蛋白以PIKK/Chk2激酶依赖的方式参与DNA损伤修复
- 目的 深入研究磷酸化PTEN蛋白在DNA损伤修复中的作用.方法 以HeLa,AO-3细胞为研究对象,采用免疫荧光、蛋白印迹以及大规模染色质松弛技术,探讨核定位PTEN与DNA损伤修复的关系.结果 DNA受到损伤后磷酸化P...
- 徐勤枝胡迎春叶祺浓周平坤
- 甲硫腺苷磷酸化酶在人支气管上皮细胞辐射致癌模型中的表达变化研究
- 2007年
- 目的研究甲硫腺苷磷酸化酶(Methylthioadenosine Phosphoylase,MTAP)在人支气管上皮细胞(BEP2D)辐射致癌恶性转化前后的表达水平变化。方法培养永生化细胞BEP2D和恶性转化细胞BERP35T-2;制备细胞总蛋白质,进行双相电泳和质谱分析;选择有表达差异的蛋白质点MTAP,在细胞模型中进行Northern Blot和Western blot分析。结果双相电泳发现MTAP在恶性转化细胞BERP35T-2中基本没有表达;Northern Blot和Western Blot分析表明MTAP基因在BEP2D永生化细胞中转录和翻译表达水平均很高,而在BERP35T-2恶转细胞中表达极低;发现MTAP基因在两种细胞中的表达差别在10倍以上。结论MTAP的低表达与辐射致肺癌的发生有密切关系,是BEP2D受到α粒子辐射后基因表达谱的主要改变之一。
- 李邦印张开泰霍艳英胡迎春徐勤枝应万涛吴德昌
- 关键词：甲硫腺苷磷酸化酶BEP2DΑ粒子
