耿晶
- 作品数:8 被引量:23H指数:3
- 供职机构:武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金武汉市科技攻关计划项目湖北省工业微生物重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生农业科学理学更多>>
- aprE基因表达的分子生物学和微量热法分析被引量:7
- 2005年
- 利用分子生物学方法(SDS-PAGE和酶活检测法)未检测到所克隆的aprE基因在大肠杆菌中的表达产物(碱性蛋白酶),而微量热法检测结果发现:重组菌株的生长代谢产热曲线之间存在明显的差异.根据这些差异,分析了该基因的上、下游调控序列对该基因在大肠杆菌中表达的重要作用,从而进一步对该基因进行了亚克隆,得到了生物学方法可检测到的表达产物.由此推测,微量热技术有可能为检测外源基因表达及其调控,以及为指导进一步基因工程操作提供一种新的快速灵敏的技术和方法.
- 李美菊陈向东刘国生杨洋王小娟耿晶梅运军刘义沈萍王金晶
- 关键词:基因表达分子生物学方法外源基因表达微量热法碱性蛋白酶检测法
- 细菌衍生黑素对长波紫外线诱导人皮肤成纤维细胞凋亡和坏死的保护被引量:6
- 2008年
- 目的:探讨细菌衍生黑素(b-melanin)对长波紫外线(UVA)诱导人成纤维细胞凋亡和坏死产生的光保护作用,为今后将其用作皮肤光保护剂提供依据。方法:正常人成纤维细胞(NL-FB)和着色性干皮病患者成纤维细胞(XP-FB)经UVA照射12h后,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,Hoechst33258染色法观察早期凋亡细胞核形态学变化,二氯荧光素二酯(DCFH-DA)标记法测定细胞内活性氧基(ROS)水平。结果:UVA照射诱导细胞的半数致死剂量,XP-FB大约为30J/cm2,而NL-FB>40J/cm2。为了观察不同浓度(0,25,50,100,200,400,和800μg/mL)的b-melanin是否对细胞存在光保护作用,给予半数致死剂量(30J/cm2)UVA照射后,经100~400μg/mLb-melanin处理的XP-FB的细胞存活率均较未处理组明显增高(P<0.01),而NL-FB的细胞存活率变化不明显。细胞内ROS测定结果显示100、400μg/mL的b-melanin能明显清除UVA诱导产生的ROS。100μg/mL b-melanin即能阻止非致死剂量(16J/cm2)UVA照射诱导的早期凋亡细胞核改变。结论:b-melanin能对UVA诱导人成纤维细胞凋亡和坏死提供有效的光保护,这一作用很可能关系到b-melanin对ROS的清除。本研究还首次提出核酸切除修复机制缺陷的XP-FB是一敏感的可用于测试UVA光损伤作用的体外细胞模型。
- 周琼雷铁池耿晶陈向东车巍饶立徐世正
- 关键词:黑素长波光保护着色性干皮病
- 细菌黑色素对DNA光保护作用的研究
- 本文研究了一株产黑嗜麦芽假单胞菌所产黑色素清除溶液中自由基的能力和其防止紫外线照射引起的DNA双链断裂的作用,并探讨了质粒作为衡量细菌黑色素光保护作用体外模式的优势。利用荧光光度分析法研究了嗜麦芽假单胞菌AT18中提纯黑...
- 耿晶余胜兵陈向东周平沈萍
- 关键词:质粒DNA光保护
- 文献传递
- 枯草芽孢杆菌培养液中DNA和DNase的检测及其分泌规律的研究
- 据报道枯草芽孢杆菌在培养的一定时期可以向周围环境中主动分泌DNA,我们通过在LB培养基中连续培养枯草芽孢杆菌菌株DB104/pAPR8-1(该菌株中质粒含有地衣芽孢杆菌C6的碱性蛋白酶基因),收集培养液上清,用细菌过滤器...
- 李美菊陈向东王小娟耿晶梅运军王金晶张扬沈萍
- 关键词:枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶分泌荧光定量PCR
- 文献传递
- 毛细管电泳研究细菌黑色素对质粒DNA构型的影响
- 采用毛细管电泳研究了一株产黑嗜麦芽假单胞菌AT18中提纯的黑色素对质粒DNA构型的影响.该黑色素单独存在时对质粒DNA构型影响较小.在少量铜离子存在时,黑色素在较低浓度下便可诱导质粒DNA从共价闭环结构向开环结构转变,并...
- 余胜兵耿晶周平冯艾荣王静陈成陈向东胡继明
- 关键词:毛细管电泳质粒DNA黑色素
- 文献传递
- 黑色素对苏云金芽孢杆菌及其紫外诱导性的影响
- 在苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)发酵生产中经常遇到溶源性菌株,在各种因素诱导下释放噬菌体,导致发酵失败,造成巨大损失。我们利用嗜麦芽假单胞菌AT18制备提纯的多巴黑色素对武汉某药...
- 耿晶贺明慧王菲陈向东
- 文献传递
- 黑色素对苏云金芽孢杆菌及其紫外诱导性的影响
- 在苏云金芽孢杆菌(Vacillus thuringiensis,简称Bt)发酵生产中经常遇到溶源性菌株,在各种因素诱导下释放噬菌体,导致发酵失败,造成巨大损失。我们利用嗜麦芽假单胞菌AT18制备提纯的多巴黑色素对武汉某药...
- 耿晶贺明慧王菲陈向东
- 关键词:黑色素苏云金芽孢杆菌
- 文献传递
- 5株细菌产L-多巴黑色素的比较研究被引量:10
- 2005年
- 对5株细菌所产黑色素的物理和化学性质及发酵进行了比较研究.结果表明:尽管这些不同来源的黑色素在理化性质上存在一定差异,但它们的基本框架结构及主要基团是一致的,且在发酵过程中都检测到L-多巴,说明它们都属于多巴类黑色素;不同菌株在同一条件下和同一菌株在不同条件下发酵黑色素的产量差别很大,其中WS和H2的黑色素产量可分别达到1720mg/L和1040mg/L,有进一步开发成为工业发酵生产黑色素应用菌株的潜力.
- 万霞耿晶陈向东黄玉屏彭珍荣沈萍
- 关键词:发酵条件优化