李芬
- 作品数：10 被引量：47H指数：4
- 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院生物资源基因工程重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 新疆一枝蒿与黄花蒿粗提物抗棉铃虫与棉蚜的特性研究被引量：5
- 2011年
- 【目的】为利用新疆一枝蒿研制新型无公害植物杀虫药剂奠定基础。【方法】采用97%乙醇对新疆一枝蒿(Artemisia rupestris)和黄花蒿(Artemisia annua)进行了总提,将所得粗提物对棉花重要害虫—棉铃虫(Helicoverpa armigera)与棉蚜(Aphis gossypii)进行了生物活性测定,同时还使用新疆一枝蒿粗提物对棉铃虫开展了室内、室外的驱避实验。【结果】(1)新疆一枝蒿与黄花蒿粗提物对棉铃虫半致死浓度LC50分别为3.515 7与4.781 1 mL/100g;(2)新疆一枝蒿与黄花蒿粗提物对棉蚜半致死浓度LC50分别为0.956与2.047 4 g/100 mL;(3)新疆一枝蒿粗提物对棉铃虫室内室外趋避率分别为28.39%与80.68%。【结论】新疆一枝蒿粗提物对棉铃虫与棉蚜的毒杀作用较好并高于黄花蒿粗提物,且新疆一枝蒿粗提物对棉铃虫有驱避和生长抑制等作用。
- 何海黄丽张学涛张雷李芬刘小宁
- 关键词：新疆一枝蒿黄花蒿棉铃虫棉蚜粗提物
- 北疆地区棉蚜对不同杀虫剂敏感度水平测定被引量：23
- 2012年
- 为了解北疆不同地区棉蚜种群对不同类型杀虫剂的敏感度水平,科学指导北疆地区棉蚜的化学防治,利用FAO推荐的叶片浸渍法(1980)测定北疆地区4个棉蚜田间种群对4类杀虫剂的敏感性。结果表明,新农大种群对杀虫剂的敏感水平最高,不同类型杀虫剂的毒力大小顺序为:新烟碱类>有机磷类>抗生素类>拟除虫菊酯类。安宁渠种群较石河子种群更为敏感。石河子垦区内的两个不同种群对菊酯类处于相对敏感状态;对有机磷类产生了明显抗药性,147团种群对辛硫磷的相对抗性倍数为951.8倍,新湖农场种群更达到了1236.9倍;147团种群和新湖种群对啶虫脒亦产生了明显的抗药性,相对抗性倍数分别为134.4倍和270.0倍,但对吡虫啉的敏感度较高。石河子垦区应限制使用新烟碱类的啶虫脒和有机磷类杀虫剂,以减缓棉蚜抗性的发展。
- 张学涛柳建伟李芬刘宁孙磊张东海刘小宁
- 关键词：棉蚜杀虫剂抗药性
- 棉铃虫细胞色素P450 CYP6B6基因启动子活性检测条件的优化被引量：1
- 2012年
- 旨在用阳离子脂质体介导携带有pGL3-Basic报告基因的棉铃虫细胞色素P450 CYP6B6启动子pGL-CYP6B6-promoter重组质粒转染Sf9细胞,对启动子活性的检测条件进行优化。将长度为999 bp的棉铃虫CYP6B6基因启动子亚克隆至荧光素酶报告载体pGL3-Basic上,提取无细胞内毒素的质粒,转染处于对数生长期的昆虫细胞Sf9,通过检测荧光素酶的表达量验证启动子的活性。对转染后的检测时间、加入转染质粒的量,转染质粒与内对照质粒pRL-TK的比例分别进行了优化,进而确定检测的最优条件。结果表明,转染后的最适检测时间为24 h,转染质粒的最适用量为3.2μg,报告质粒与内对照质粒用量的比例为10 1时转染效率最高。
- 李芬刘小宁
- 关键词：细胞色素P450SF9细胞转染活性检测
- 棉铃虫(Helicoverpa armigera)FK506结合蛋白基因的克隆、表达与纯化被引量：2
- 2014年
- 为了深入了解FK506结合蛋白基因的作用和探索调控棉铃虫CYP6B6的表达机制,基于单酵母杂杂交结果采用RT-PCR的方法从棉铃虫的中肠cDNA中扩增得到了FK506结合蛋白基因,将测序正确的目的片段克隆至原核表达载体pET32a中,在大肠杆菌BL21中用异丙基-β-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导表达,通过镍柱离子亲和层析纯化目的蛋白。用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达和纯化结果,并用Western blotting进行验证。结果表明,克隆得到的目的基因大小为327 bp,编码108个氨基酸残基,预测蛋白质分子量和等电点分别是11.78 kD和7.87。氨基酸序列分析表明该序列具有完整的开放阅读框,且没有信号肽。重组质粒pET32a-FKBP在大肠杆菌BL21中获得表达,主要以可溶性形式存在,经亲和层析柱纯化获得目的蛋白,Western blotting检测发现纯化的目的蛋白大小正确且纯度高。
- 刘小宁李芬赵文博朱燕赵洁
- 关键词：棉铃虫
- 棉铃虫中肠P450 CYP6B6基因5′上游序列的克隆及序列分析被引量：2
- 2011年
- 已证实2-十三烷酮等植物次生物质的胁迫会诱导棉铃虫(Helicoverpa armigera)CYP6B6基因的过量表达[1]。为探明棉铃虫P450 CYP6B6基因的表达调控机制,根据棉铃虫中肠P450 CYP6B6基因cDNA序列(GenBank登录号:AY950636),运用基因组步移的方法获得其5′上游区的序列,用启动子区的分析软件进行比对分析,结果得到棉铃虫P450 CYP6B6基因5′上游区域1 333 bp的基因片段。分别运用NNPP v.2.2和TRANSFAC v.6.0预测转录起始位点及分析了转录因子结合位点,结果显示,该序列不仅包括TATA盒等这一类核心结构序列,还含有多个转录因子的结合位点,如GATA-1、Dfd、C/EBP、HSF、cytR和AhR(芳香烃受体化合物应答元件)等。该结果为深入研究棉铃虫P450 CYP6B6的表达调控机制及其参与杀虫剂抗性的研究奠定分子基础。
- 张雷张学涛马纪李芬刘小宁
- 关键词：棉铃虫细胞色素P450基因组步移
- 基于文献计量学的昆虫细胞色素P450研究发展态势分析被引量：4
- 2014年
- 利用文献计量法和关键词词频法,对1999年至2012年间,国内外在昆虫细胞色素P450研究领域的研究成果进行梳理和研究,结果显示:昆虫细胞色素P450文献数量在此期间呈现出明显的增长趋势,说明昆虫细胞色素P450日益得到学者的广泛关注。关键词词频法说明对模式昆虫果蝇P450的研究依然是热点,而卫生害虫、农业害虫以及经济昆虫P450的研究已逐渐成为新的研究热点;而研究方向上正向昆虫P450调控表达的理论研究及其实践应用拓展。
- 刘小宁刘宁李芬马爱芳马纪高希武
- 关键词：昆虫细胞色素P450
- 2-十三烷酮诱导棉铃虫(Helicoverpa armigera)细胞色素P450 CYP6B6时空表达规律的研究被引量：5
- 2014年
- 植物次生物质2-十三烷酮能够诱导棉铃虫细胞色素P450 CYP6B6基因的过量表达,以6龄棉铃虫(Helicoverpa armigera)幼虫为对象,研究2-十三烷酮对棉铃虫细胞色素P450 CYP6B6的诱导作用,并对其表达规律进行了初探。分别采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫组化的方法,分析棉铃虫在终浓度为10 mg·g-1的2-十三烷酮胁迫下,不同时间及不同组织部位CYP6B6基因在mRNA水平和蛋白水平上的表达变化规律。qRTPCR结果显示:用添加了2-十三烷酮的人工饲料饲喂棉铃虫不同时间后,在头壳中CYP6B6 mRNA的表达量一直低于对照组,到48 h时与对照组具有显著差异(t4=15.32,P=0.000 1);在脂肪体中随着时间的推移,表达量呈升高趋势,在36 h已过量表达(t4=7.627,P=0.001 6);在24 h时体壁和中肠组织的表达量分别较对照组提高了2.06倍和7.16倍,之后表达量均呈现先降低后升高的趋势,且在48 h时达到最大。免疫组化结果显示:在棉铃虫幼虫组织中发现CYP6B6蛋白在体壁、脂肪体、中肠中均有表达,相比之下在体壁中表达量较高。该研究为深入了解棉铃虫P450 CYP6B6的表达调控机制及其参与杀虫剂抗性的研究奠定了基础。
- 刘小宁李芬张学涛朱燕
- 关键词：MRNA水平蛋白水平
- 昆虫基因启动子及细胞色素P450基因启动子研究进展被引量：4
- 2012年
- 细胞色素P450是一类重要的解毒酶系。昆虫在各种内源或外源性有毒物质的胁迫下,通过调控体内细胞色素P450的过表达,对有毒化合物进行解毒代谢,从而适应不利环境。在昆虫体内,P450基因表达的调控主要发生在转录水平上,启动子作为基因的一部分,能够与RNA聚合酶结合形成转录起始复合体,进而控制基因表达的起始时间和表达程度。基于此,就昆虫启动子的分析及功能验证的主要方法、昆虫启动子的结构特征及昆虫细胞色素P450基因启动子的一些研究进展进行概述,以期为昆虫细胞色素P450基因启动子的深入研究提供借鉴。
- 李芬刘小宁
- 关键词：启动子细胞色素P450昆虫抗药性
- 棉铃虫细胞色素P450CYP6B6基因启动子的活性分析被引量：1
- 2012年
- 在昆虫细胞色素P450s超家族中,CYP6家族基因与杀虫剂抗性关系最为密切,其中CYP6B家族基因的表达在植物次生物质的代谢调节中发挥重要作用.为研究CYP6B6基因的表达调节机制,本文采用PCR的方法从棉铃虫中肠DNA序列中扩增了CYP6B6基因转录起始位点上游不同片段长度的5段序列,构建由其驱动的萤火虫荧光素酶基因报告质粒pGL3-CYP6B6-promoter,与内参载体pRL-TK同在脂质体的介导下转染昆虫Sf9细胞,体外分析该基因启动子的转录活性及与调控相关的因素.结果显示,5个报告质粒的荧光素酶相对活性分别是基本载体pGL3-Basic载体的0.95、1.95、1.21、1.17和1.01倍,其中p-791片段序列具有启动子活性,这段序列位于翻译起始位点上游400bp之间,生物信息学分析显示,该区间具有TATA box、CAAT box、CBFα、C/EBP等基本元件和AhR等异源物质响应的重要元件结合序列,暗示该序列可能具有与转录调控相关的元件,这为研究CYP6B6的调控机制奠定了基础.
- 李芬马纪刘小宁
- 关键词：棉铃虫细胞色素P450活性分析
- 猫栉首蚤不同性别和不同虫态的过冷却点测定被引量：1
- 2010年
- 目的比较研究猫栉首蚤不同性别成虫和幼虫的过冷却点,旨在分析其分布及越冬规律,进而为猫栉首蚤及其相关传染病的预防控制与相关研究提供依据。方法采用热电偶和数字温度表,测定猫栉首蚤实验室种群雌雄成虫和3龄老熟幼虫的过冷却点与结冰点,分析其不同发育阶段和不同性别的抗寒性差异。结果在饥饿状态下,猫栉首蚤雌性成虫与雄性成虫的平均过冷却点温度分别为(-18.24±0.26)℃和(-18.45±0.26)℃,二者差异无统计学意义;雌性成虫与雄性成虫的结冰点温度分别为(-15.46±0.30)℃和(-15.19±0.31)℃,二者差异亦无统计学意义;而3龄老熟幼虫的平均过冷却点温度为(-8.73±0.40)℃,结冰点温度为(-6.63±0.37)℃,都分别显著高于猫栉首蚤雌雄成虫的过冷却点和结冰点。结论猫栉首蚤的成虫抗寒性差异无统计学意义;与成虫相比,幼虫不耐寒冷,因此在我国北方较寒冷的区域,其以成虫越冬的可能性较大。
- 李芬孟凤霞林杰
- 关键词：过冷却点抗寒性结冰点
