李以莞
- 作品数：12 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗体轻链可变区基因真核表达框架及抗CD3鼠/人嵌合轻链基因的构建
- 1996年
- 利用抗乙肝表面抗原的单抗２Ｈ１的轻链可变区基因的一部分，以核酸定点突变法引入ＭｌｕＩ限制性内切酶识别位点，构建了含有启动子、前导肽序列以及剪接供体信号等真核表达元件和“ＥｃｏＲＶ－Ｍｌｕ Ｉ”外显子克隆“匣”的通用的抗体轻链可变区基因真核表达框架ｐＧＥＭ－ＬＰＣＲ。从分泌ＣＤ３单抗的杂交瘤细胞中提取基因组ＤＮＡ，通过ＰＣＲ扩增及序列分析证实获得了ＣＤ３单抗轻链可变区基因的外显子。将其克隆到ｐＧＥＭ－ＬＰＣＲ中，切下完整的真核转录单位，与带有人Ｋａｐｐａ链恒定区基因及选择标记基因的表达载体相连接，成功地构建了抗ＣＤ３鼠／人嵌合轻链基因。此表达框架可用于多种抗体轻链可变区基因外显子的克隆及其真核转录单位的制备，大大简化了基因工程抗体的研制。
- 张拥辉李以莞张叔人张友会沈德诚
- 关键词：抗体CD3轻链可变区
- T细胞生长因子和人T细胞淋巴瘤病毒
- 1983年
- 1976年Morgan及Gallo等发现人T细胞经PHA刺激后可以释放一种在试管内刺激人正常T细胞增殖的物质,这种物质后来证明是一种淋巴因子,并定名为T细胞生长因子(T-cell growthfactor,简称 TCGF).Gallo等利用TCGF这一特点,体外培养了1例皮肤T细胞淋巴瘤病人的活检标本及血标本,建成两株T细胞淋巴原始细胞样细胞株,并从这两株细胞首次分离到人T细胞淋巴瘤病毒(简称HTLV)。TCGF的发现引起人们广泛的兴趣。
- 李以莞
- 关键词：细胞淋巴瘤HTLV阳性细胞细胞表面细胞生长因子
- 鼻咽癌癌基因研究 I.鼻咽癌细胞株CNE-2DNA的转化活性被引量：1
- 1989年
- 用低分化鼻咽癌细胞株CNE-2 DNA转染NIH3T3细胞,获得的转化细胞株经扩增进行二轮和三轮转染。转化细胞株含有人特异的DNA序列能在软琼脂上生长并在裸鼠体内形成肿块。
- 姚钢青李以莞田海梅杨治华衣林赵志辉
- 关键词：鼻咽癌癌基因转染
- 抗HBsAg鼠/人嵌合抗体基因的构建、表达及鉴定被引量：2
- 1990年
- 用抗体工程法构建抗乙肝表面抗原(HBsAg)鼠/人嵌合抗体的嵌合基因,并在哺乳动物细胞中成功地表达。分离鼠McAb 2H1(抗HBsAg)轻、重链可变区基因,并连接到含有人轻链(Kappa)及重链(Gamma 1)恒定区基因的哺乳动物细胞表达载体中;用电穿孔法将嵌合基因导入小鼠SP2/0细胞,得到高效表达。2H1嵌合抗体能特异性地与HBsAg结合,并能有效地与亲代McAb竞争;与血源性多克隆乙肝免疫球蛋白(HBIG)比较,其具有特异性好、节约血源、价廉、质纯、无其他病毒,如HIV等污染制品的可能等优点,可用于阻断乙肝母婴传播及在意外感染时被动免疫。
- 李以莞Clyde W.Shearman
- 关键词：乙型肝炎抗体基因嵌合基因
- 鼻咽癌癌基因研究 Ⅱ.鼻咽癌癌基因属性-Ha-ras基因被引量：2
- 1989年
- 用已知癌基因片段作为探针,检测经鼻咽癌CNE-2DNA二轮转染的NIH3T3转化细胞株,结果证实在转化细胞株中存在着与C-Ha-ras基因的同源基因,但该基因在带型和杂交强度上与CNE-2细胞DNA Ha-ras基因相比,没有大的改变。
- 李以莞姚钢青衣林田海梅杨治华赵志辉
- 关键词：鼻咽癌癌基因HA-RAS
- 抗CD_3人/鼠嵌合抗体的研究
- 1995年
- 杨治华刘向阳田海梅王李以莞沈德诚段世利佘鸣
- 关键词：抗体嵌合抗体
- 基因工程抗体研究进展被引量：3
- 1991年
- 自1975年单克隆抗体杂交瘤技术问世以来,单克隆抗体(下简写为mAb)在临床医学中被广泛地应用于疾病的诊断、治疗及予防。但目前绝大多数mAb是鼠源的,临床重复给药时体内产生抗鼠抗体,使临床疗效减弱甚至消失。人们普遍认为。
- 李以莞
- 关键词：基因工程抗体
- 抗人CD3人/鼠嵌合抗体基因的构建
- 1995年
- 为了降低鼠源抗人CD3单抗的免疫原性,增加其在人体内的生物活性及治疗作用,使该抗体能更广泛更有效地长期多次用于人体治疗肿瘤、器官移植排斥反应及自身免疫性疾病.本文采用PCR技术从分泌抗CD3单抗的杂交瘤细胞HIT3a的mRNA中分离克隆了抗体的轻重链可变区基因的cDNA.以此轻重链可变区cDNA为特异探针从HIT3a基因文库中分离带有调控序列的功能性轻重链可变区基因;并将其插入到含有人κ轻链及人γ1重链恒定区基因的哺乳动物表达载体中成功地构建了抗人CD3人/鼠轻重链嵌合抗体基因,为研制人抗CD3人/鼠嵌合抗体完成了关键性的第一步.
- 杨治华李以莞沈德诚田海梅刘向阳刘宝印李洁段世利佘鸣
- 关键词：抗人CD3嵌合抗体肿瘤抗CD3单抗重链可变区DNA
- 抗CD_3鼠/人嵌合抗体基因的构建及表达 I.CD_3单抗重链可变区基因的克隆及序列测定被引量：1
- 1992年
- 以人工合成的小鼠免疫球蛋白重链可变区(V_H)基因特异的寡核苷酸片段为引物,用PCR法成功地进行了HIT_3a(抗CD_3单克隆抗体)V_H基因的扩增,并将扩增片段克隆进了pGEM-7Zf(+)质粒DNA中,重组质粒序列测定的结果表明,片段大小为353 bp,基因重排方式为VDJ_4。
- 刘建国李以莞杨治华王璘沈德诚段世利佘鸣田海梅赵志辉刘宝印
- 关键词：免疫球蛋白PCR
- 抗HFRSV血凝素3G1单克隆抗体重链可变区基因的表达及初步鉴定
- 1992年
- 本文利用基因重组技术,在成功地克隆抗HFRSV血凝素抗原3G_1单抗重链可变区基因的基础上,对其在原核表达单域抗体进行了初步尝试。将3G_1单抗重链可变区基因亚克隆到原核高效表达质粒pBV220中,经转化E coli DH5a受体菌,42℃诱导6h后,在E、coli中有分子量约15kD的3G_1重链可变区基因产物表达。经测得表达产物占菌体总蛋白量的10％。IFA和ELTSA阻断试验表明,重组菌裂解上清对亲本鼠3G_1完整单抗与HFRSV抗原的结合有较明显的阻断作用。从而初步表明3G_1单抗重链可变区基因在E、coli
- 程云张劲翼汪力亚汪美先阎岩李以莞杨守纯
- 关键词：重链可变区克隆表达单克隆抗体
