杨治华
- 作品数：150 被引量：520H指数：11
- 供职机构：中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 新的基因工程抗体真核高效表达系统、其制备方法及其应用
- 本发明涉及一种制备基因工程抗体真核高效表达系统的方法，以及由此方法构建的一种基因工程抗体真核高效表达系统，称为pYR-GKES表达系统，包括8个独立的克隆载体和表达载体，本发明还涉及由该方法制备的表达系统在制备和高产量生...
- 杨治华冉宇靓
- 文献传递
- SCID-hu人鼠嵌合模型在生物医学研究中的应用被引量：1
- 1999年
- 将人的造血干细胞移植到重症联合免疫缺陷（Ｓｅｖｅｒｅｃｏｍｂｉｎｅｄ Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｔ Ｄｉｓｅａｓｅ，ＳＣＩＤ） 小鼠体内，构建成ＳＣＩＤｈｕ 人鼠嵌合小鼠模型。该ＳＣＩＤｈｕ 小鼠模型的构建为在体内研究人造血、免疫系统的病理生理机能及人造血干细胞基因治疗提供了有力的工具。
- 吴瑞琼杨治华董志伟
- 关键词：造血干细胞SCID小鼠
- 单克隆抗体库技术筛选分离食管癌血管内皮功能性膜蛋白
- 背景与目的肿瘤的生长和转移依赖于血管的生成,抑制肿瘤血管生成是一种极具优势的肿瘤治疗新策略。由于内皮细胞是肿瘤新生血管形成的关键环节和“物质基础”,而且其基因组稳定,不易因突变产生耐药性,因此已成为抗肿瘤血管生成治疗肿瘤...
- 胡东周转张遇山冉宇靓胡海遇珑娄晋宁杨治华
- 文献传递
- 细胞质膜表面抗原的单克隆抗体及其用途
- 本发明涉及一种新的可与人食管癌细胞天然膜抗原结合的单克隆抗体，及其生产的杂交瘤细胞系，以及该抗体在制备可用于治疗人食管癌转移的药物中的应用。该单克隆抗体可与具有转移能力的人食管癌细胞系EC-9706细胞膜表面的天然抗原结...
- 杨治华冉宇靓胡海
- 文献传递
- 高转移肺癌细胞株的建立及其肿瘤干细胞生物学特性被引量：1
- 2017年
- 目的研究高转移肺腺癌细胞株的肿瘤干细胞生物学特征。方法肺腺癌细胞系A549接种裸鼠皮下成瘤后,取肺的转移灶,通过机械分离法获取肺转移细胞,体外扩大培养后,再次接种裸鼠。如此反复接种裸鼠,获得稳定肺转移的细胞株A549-V13。采用无血清悬浮培养及PKH26染色确定A549-V13存在肿瘤干细胞。流式细胞术(FACS)检测和分选A549和A549-V13中肿瘤干细胞标志物CD133的表达并进行体内外生物学特征实验。结果建立稳定高转移A549-V13细胞株。无血清悬浮培养A549-V13,7天后形成的球形细胞团中存在单个PKH26阳性细胞。FACS检测显示,与A549中CD133^+细胞相比,高转移A549-V13细胞株中CD133^+细胞的表达比例显著提高4.85倍。A549-V13中CD133^+细胞具有更强的自我更新能力,侵袭能力提高1.42倍,耐药能力也显著增强,其IC50提高1.26倍,A549-V13的CD133^+细胞在裸鼠皮下接种2×10~2个细胞3月致瘤4/6,而接种2×10~2个A549的CD133^+细胞3月才致瘤2/6。结论建立高转移肺癌细胞株A549-V13,伴随CD133^+细胞表达比例的增加,其体内外生物学功能显著增强。
- 遇珑舒雄刘军孙力超杨治华冉宇靓
- 关键词：人肺癌细胞肿瘤干细胞CD133CD90
- 黏附分子αvβ3和αvβ5介导肿瘤细胞与肿瘤内皮细胞的黏附被引量：1
- 2008年
- 目的体外分析黏附分子αvβ3和αvβ5及其配体Dd-1、L1在肿瘤细胞-内皮细胞黏附中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和流式细胞分析比较正常肝窦内皮细胞（LSEC）和肝癌的血管内皮细胞T3A上细胞间黏附分子1（ICAM-1）、αvβ3和αvβ5的表达以及缺氧对其表达的调控。分别用RT—PCR和Western blot方法分析6种肿瘤细胞Del-1和L1的表达及缺氧对其表达的调控。使用连续光谱荧光测定仪定量肿瘤细胞在LSEC和T3A上的黏附，并分析抗不同黏附分子的抗体和siRNA对肿瘤细胞-内皮细胞黏附的阻断作用。结果T3A细胞αvβ3和αvβ5的基础表达高于LSEC，而ICAM-1的基础表达低于LSEC。缺氧上调两种内皮细胞αvβ3和αvβ5的表达，而ICAM-1表达仅在LSEC中升高。在不同肿瘤细胞中，Del-1和L1的基础表达存在明显差异，并且在缺氧条件下受到明显不同的调节。Del-1和L1高表达的肿瘤细胞在T3A细胞的黏附明显高于LSEC，并且在缺氧条件下黏附明显增加，这种黏附可以被抗αvβ3、αvβ5的抗体或沉默p3和p5的小干扰RNA（siRNA）阻断。结论细胞黏附分子αvβ3、αvβ5及其配体在肿瘤细胞-肿瘤内皮细胞的黏附过程中起重要介导作用。
- 牛纪晓张文健叶丽亚吴练秋杨治华朱广瑾娄晋宁
- 关键词：肿瘤细胞内皮细胞ΑVΒ3黏附分子
- 人海绵状血管瘤动物模型的建立和治疗药物的筛选被引量：1
- 2007年
- 目的建立人海绵状血管瘤的动物模型,并用于药物筛选。方法用荆豆凝集素包被的免疫磁珠分离和纯化人海绵状血管瘤内皮细胞(HCAEC)。将HCAEC(2.5×106个)与人肝癌细胞Bel-7402(5×105个)混合接种于裸鼠皮下,建立海绵状血管瘤的动物模型。通过绿色荧光蛋白示踪和组织学检查分析血管瘤中内皮细胞的来源和血管瘤的病理特征。另外,应用血管瘤内皮细胞和血管瘤动物模型筛选血管瘤的治疗药物。结果HCAEC与Bel-7402细胞共移植于裸鼠皮下后7～9d即可见接种局部形成血管瘤样结构。组织学检查显示血管瘤模型的组织学特征与人的海绵状血管瘤非常相似。细胞绿色荧光蛋白示踪显示绿色荧光蛋白存在于血管瘤的管壁,表明这些细胞来源于接种的HCAEC。药物筛选发现876-3,一种从中药中提取的单体,体外明显抑制HCAEC增殖,体内对血管瘤具有良好治疗作用。结论HCAEC与肝癌细胞共移植在裸鼠皮下可以形成人源化血管瘤动物模型,这种血管瘤动物模型可以用于治疗药物的筛选。
- 张文健吴练秋顾锋叶丽亚辛育龄杨治华娄晋宁
- 关键词：内皮细胞动物模型
- 抗人VEGF中和抗体对乳癌生长及转移的影响
- ：用具有中和活性的抗人血管内皮细胞生长因子（Ｖａｓｃｕｌａｒ Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）单抗进行抑瘤动物实验，探讨ＶＥＧＦ在肿瘤生长及转移中的作用。方法：采用杂交瘤技术制备抗ＶＥ...
- 王贵齐杨治华
- 关键词：髓细胞白血病融合基因
- MAGE-3基因的表达检测和重组MAGE抗原的制备及其应用被引量：4
- 2002年
- 目的克隆MAGE-3基因并检测其在人食管癌组织中的表达情况；重组表达MAGE-1和MAGE-3抗原，用于食管癌的治疗性蛋白疫苗的免疫原性研究。方法RT-PCR法检测了MAGE-3在人食管癌组织中的表达情况。采 用DNA重组技术将MAGE-1和MAGE-3全长cDNA 克隆至pET30a(+)载体上，转化大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG诱导表达，经SDS-PAGE 和 wes-tern blot鉴定后，制备其可溶性蛋白，研究其对人T细胞增殖能力的影响。结果MAGE-3基因 在食管癌组织中的表达率为50%（15/30）；在30例相应癌旁正常组织中未见表达。成功获得了MAGE-1和MAGE-3可溶性蛋白；人 T细胞能够对自身抗原递呈细胞加工处理的MAGE-1和MAGE-3蛋白产生应答。结论MAGE-1和MAGE-3蛋白可能是用于食管癌免疫治疗的免疫原性较强的靶抗原。
- 彭良平刘海燕冉宇靓王贵齐杨治华
- 关键词：MAGE-1MAGE-3重组蛋白T淋巴细胞免疫原性研究
- 识别肺癌上调表达的膜蛋白单抗抑制肺癌生长被引量：3
- 2010年
- 目的:分析研究抗肺癌24H7单抗的体内外功能,并初步鉴定其识别的抗原蛋白,为肺癌靶向治疗提供候选抗体药物及靶标。方法:采用活细胞免疫荧光及流式细胞荧光检测单抗与多种肺癌细胞的反应;应用CCK-8法和裸鼠体内成瘤实验鉴定单抗对肺癌细胞体外增殖及体内肿瘤生长的影响;同时采用免疫组化检测该单抗识别抗原在肿瘤及癌旁正常组织中的表达差异;免疫亲和层析纯化抗原。结果:活细胞免疫荧光及流式荧光结果显示24H7单抗识别抗原在12种不同肺癌细胞系膜上均有阳性表达;体外增殖及动物体内治疗实验显示该单抗在体外能抑制肺癌细胞的增殖,并在体内显著抑制肿瘤的生长,其抑制率达73.74%(P<0.01);免疫组化结果表明该单抗的靶抗原在肺腺癌组织中的表达较癌旁正常显著上调;免疫亲和层析显示靶抗原的分子量约为170 KD。结论:抗肺癌单抗24H7能够在体内外抑制肺癌的生长,其靶抗原可表达于肺癌细胞的膜上,且在肺腺癌组织上调表达,可能是一个肺腺癌靶向治疗的新靶标。
- 杨薇薇遇珑孙力超孙立新李江伟杨治华冉宇靓
- 关键词：肺癌膜蛋白功能性单克隆抗体
