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徐广峰: 作品数：43 被引量：46H指数：4; 供职机构：中国人民解放军第八二医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金南京市科技发展计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>

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miR-26b过表达对不同时间点人脂肪细胞分泌脂因子的影响: 目的探讨miR-26b过表达对不同时间点脂肪细胞上清各种肥胖及炎症相关蛋白分泌的影响.方法 miR-26b过表达的病毒感染人脂肪前体细胞,并诱导分化、收集不同时间点的细胞培养基上清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测...; 季晨博史春梅陈玲杨蕾庞玲霞徐广峰郭锡熔

microRNA的生物形成参与细胞生长/分化和肿瘤形成被引量：2: 2012年; microRNA(miRNA)作为一类非编码小分子调控RNAs,参与调节多种生理和病理过程。在动物细胞中,miRNA基因的转录初产物pri-miRNA被RNaseⅢ家族酶成员Drosa和DGCR8催化加工成为miRNA前体(pre-miRNA),然后由细胞核转运至细胞质中,经另一种核糖核酸酶ⅢDicer识别剪切为成熟miRNA。在pri-miRNA向成熟miRNA加工转化过程中发生的改变参与细胞生长、分化以及肿瘤形成。; 徐广峰付海龙赵亚萍; 关键词：细胞生长细胞分化肿瘤形成

microRNA与mRNA不同位点结合后的生物学效应研究进展被引量：10: 2017年; microRNA(miRNA)是一类单链非编码小RNA,主要参与功能基因的转录后调控,具有广泛、多样的生物功能,在真核生物体内对基因表达具有重要的调控作用。miRNA既可以抑制编码基因mRNA的表达,又可以激活mRNA的作用;既可以在细胞质中作用于mRNA的不同区域,也可以返回细胞核中发挥重要的生物学功能;同一个miRNA不一定只是一种作用模式,它可以同时作用于3'UTR、5'UTR和ORF区域。在细胞质中,miRNA通过与mRNA 3个区域中存在的识别位点互补配对并结合一些辅助蛋白发挥作用;在细胞核中,miRNA通过与lncRNA的相互作用起到调节基因功能的作用;miRNA还可与DNA的启动子序列相结合,诱导基因转录与翻译。; 伍华东丁颖徐广峰; 关键词：MICRORNA 开放阅读框

Hsa-miR-1在人食管癌细胞株中的表达及生物信息学分析被引量：2: 2012年; 目的探讨Hsa-miR-1在人类食管癌发病中的作用,并对其生物学特征及功能进行预测分析,从而为后续Has-mir-1功能的研究提供线索。方法通过实时荧光定量PCR法,检测人食管癌细胞株KYSE-150和正常食管上皮细胞株Het-1A中Hsa-miR-1的相对表达水平;应用miRBase获取、分析Hsa-miR-1序列特征并比较其同源性大小;应用HGNC、NCBI mapviewer、UCSC Browser工具分析Hsa-miR-1所在基因组特征;应用TargetScan6.1、PicTar及miRanda预测Hsa-miR-1的靶基因,取三者预测结果交集,并结合已证实的靶基因,进行功能注释(Gene Ontolo-gy)和通路富集分析(Pathway enrichment)。结果 KYSE150中Hsa-miR-1表达显著低于Het-1A细胞;Hsa-miR-1在物种进化上具有很强的保守性,其靶基因显著富集在癌症通路、与癌症发生相关的信号通路以及心肌通路中。结论 Hsa-miR-1可能参与了食管癌的发病机制,其预测靶基因集合富集于多个生物学过程并且显著富集于癌症通路;此为后续Hsa-miR-1生物学功能的研究奠定了基础。; 蒋森付海龙徐广峰王秀芳赵亚萍杜云翔; 关键词：细胞株生物信息学

miR-1268重组慢病毒质粒构建及其在人前体脂肪细胞中的表达验证被引量：1: 2018年; 目的构建miR-1268重组慢病毒质粒,观察其在人前体脂肪细胞HPA中的表达情况。方法从NCBI Gen Bank数据库查找miR-1268的DNA序列,用Primer 5.0软件设计PCR引物,以HPA细胞的DNA为模板进行PCR扩增;克隆慢病毒表达载体,进而包装成空载慢病毒和miR-1268过表达慢病毒;HPA细胞分别感染空载慢病毒和miR-1268过表达慢病毒,荧光定量PCR检测miR-1268表达水平。结果测序结果表明,miR-1268前体序列与Gen Bank上的序列完全相同。与空载慢病毒感染的HPA细胞比较,miR-1268过表达慢病毒感染的HPA细胞miR-1268上调2.5倍。结论成功构建miR-1268重组慢病毒质粒,感染的HPA细胞高表达miR-1268。; 周雨森徐广峰赵亚萍汪春晖; 关键词：慢病毒载体

人miR-17-92 cluster慢病毒载体构建及其在人脂肪细胞的表达验证被引量：3: 2012年; 目的构建人miR-17-92cluster慢病毒表达载体,包被病毒并检测其在人脂肪细胞中过表达效果。方法以人脂肪细胞基因组DNA为模板,PCR扩增包含miR-17-92cluster所在区域上下游100bp左右的基因组DNA,克隆入慢病毒表达载体,与Pcgvp、Rev、Vsvg包装质粒共转染HEK-293T细胞包装病毒,收取病毒上清液感染人脂肪细胞。36h开始观察荧光标记,72h收取细胞,抽提RNA,RT-PCR检测miR-17-92cluster各miRNA及miR-103、let-7e的表达。结果成功构建人miR-17-92cluster慢病毒表达载体。包装获得的病毒感染人脂肪细胞的效率可达到75%以上,miR-17-92cluster各miRNA的过表达效率均达到2倍以上,且没有干扰miRNA内源性成熟机制。结论成功构建了人miR-17-92cluster慢病毒表达载体。包被的慢病毒可以在人脂肪细胞中实现了该cluster的过表达效果,为研究人miR-17-92cluster在人脂肪细胞中的功能提供参考。; 史春梅陈玲徐广峰倪毓辉陈小慧朱春傅君芬郭锡熔季晨博; 关键词：CLUSTER 慢病毒载体

The Expression Of Mir-26b,An Obesity-Related Microrna,Regulated By Free Fatty Acids,Glucose,Glucocorticoids And Growth Hormone In Human Adipocytes: MicroRNAs (miRNAs) are short non-coding RNAs that are involved in multiple biological processes including obes...; 徐广峰史春梅季晨博陈玲杨蕾赵亚萍郭锡熔

miR-26b过表达对不同时间点人脂肪细胞分泌脂因子的影响: 目的:探讨miR-26b过表达对不同时间点脂肪细胞上清各种肥胖及炎症相关蛋白分泌的影响.方法:hsa-miR-26b过表达的病毒感染人脂肪前体细胞,并诱导分化;收集不同时间点的细胞培养基上清,采用酶联免疫吸附法(ELIS...; 庞玲霞徐广峰赵亚萍史春梅宋桂仙付海龙朱璐宋雷雷赵超季晨博郭锡熔