陈玲
- 作品数：28 被引量：41H指数：3
- 供职机构：南京医科大学附属南京妇幼保健院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京市科技发展计划项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教农业科学更多>>
- 涎腺腺样囊性癌p16-pRB-cyclinD1通路的研究被引量：5
- 2006年
- 目的探讨视网膜母细胞瘤蛋白(pRB)、p16蛋白、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)在涎腺腺样囊性癌(ACC)中的表达及相互关系。方法收集5个正常的唾液腺标本,27例≥60岁ACC患者标本,应用S-P免疫组化方法观察RB通路中pRB、p16蛋白和cyclinD1的表达,增殖细胞核抗原(PCNA)用于细胞增殖的评价。结果pRB在正常唾液腺和ACC中表达是一致的。在4例(4/27,14·8%)观察到p16蛋白无表达。6例(22·2%,6/27)病例中观察到cyclinD1的过度表达,其中4例p16蛋白无表达,以实性ACC为主。结论涎腺ACC中p16蛋白缺失,cyclinD1的过度表达与ACC的肿瘤细胞高度增殖、肿瘤高恶性度及病人预后有关。
- 陈玲万飞
- 关键词：涎腺肿瘤
- 盐酸戊乙奎醚对老龄大鼠认知功能的影响被引量：12
- 2008年
- 目的比较盐酸戊乙奎醚与东莨菪碱对老龄大鼠认知功能及大鼠海马乙酰胆碱酯酶(AChE)阳性纤维和基底前脑胆碱乙酰转移酶(ChAT)阳性细胞数量的影响。方法24只老龄SD大鼠,随机均分为盐酸戊乙奎醚组(P组)、东莨菪碱组(S组)及对照组(C组)。P、S组连续3d腹腔给药,剂量分别为0·64、0·29mg·kg-1·d-1,C组给予同等容积的生理盐水2ml。于停药后1d行水迷宫测试,记录潜伏期及游泳距离,连续测试3d。末次水迷宫测试后1h处死大鼠,用组织化学方法测定大鼠海马AChE以及免疫组化方法测定大鼠基底前脑ChAT的表达。结果三组3d潜伏期较1d缩短(P<0·05);S、C组3d游泳距离较1d缩短(P<0·05);S组水迷宫2d及3d潜伏期及游泳距离较C组显著延长(P<0·05)。S组大鼠海马AChE阳性纤维数量较C组显著增加(P<0·05),S组基底前脑ChAT阳性细胞数量较C组显著减少(P<0·05)。结论盐酸戊乙奎醚对老龄大鼠的认知功能无显著影响,东莨菪碱则对认知功能产生一定程度的抑制作用。
- 初春芹桂波陈玲肖明钱燕宁
- 关键词：盐酸戊乙奎醚乙酰胆碱酯酶胆碱乙酰转移酶
- hsa-miR-17-92 cluster及其同源体靶基因的生物信息学分析被引量：1
- 2013年
- 目的对hsa-miR-17-92duster及其同源体进行系统的生物信息学分析，预测其可能参与的生物学过程，为深入研究其在脂肪细胞分化、肥胖发生等过程中的功能与机制奠定基础。方法1．应用PubMed、Google等信息搜索工具查找hsa-miR-17-92cluster及其同源体的所有研究，综述已有研究进展；2．应用miRBase获取hsa-miR-17-92cluster及其同源体的各成员序列，并分析其序列特征及保守性；3．应用美国国家生物技术信息中心（NCBI）blast、NCBImapviewer、基因组生物信息学（UCSC）Browser工具分析hsa-miR-17-92 cluster及其同源体所在基因组的序列特征；4．应用TargetScan5．1，PicTar及miRanda预测hsa-miR-17-92cluster及其同源体靶基因，取三者预测结果的交集，进一步进行功能注释和Pathway富集分析。结果1．现有研究提示hsa-miR-17-92 cluster及其同源体在脂肪细胞分化、肿瘤疾病、心脏及肺发育、免疫系统与血管形成等生物学过程中有重要作用；2．hsa-miR-17-92 cluster及其同源体进化上高度保守，根据种子序列同源性可分为4类，且在多物种问非常保守；3．hsa．miR-17-92 cluster及其同源体预测靶基因的功能与细胞周期、细胞黏附、Wnt、TGF-β信号、p53、丝裂原活化蛋白激酶等信号通路有较大的相关性，可能参与了前列腺癌、胰腺癌、结肠癌等多种疾病通路。结论通过对hsa-miR-17-92 cluster及其同源体系统的生物信息学分析，初步阐明了hsa-miR一17-92 cluster及其同源体的基本生物学特征，并为hsa-miR-17-92 cluster后续研究提供了功能与机制的线索。
- 史春梅徐广峰陈玲赵亚萍倪毓辉杨蕾季晨博郭锡熔
- 关键词：CLUSTER生物信息学脂肪细胞
- 人miR-146b慢病毒载体构建及人脂肪细胞中表达验证
- 2013年
- 目的构建人miR-146b慢病毒表达载体,包被病毒并检测其在人脂肪细胞中过表达效果。方法以人基因组DNA为模板,PCR高保真扩增包含miR-146b区域上下游各100bp左右的基因组DNA,亚克隆入慢病毒表达载体,与包装质粒共转染HEK-293T细胞,包装病毒,收取病毒上清,纯化后感染人脂肪前体细胞,36h开始观察荧光标记,72h收取细胞,抽提RNA,Realtime PCR检测慢病毒感染下miR-146b的相应表达量。结果成功构建人miR-146b慢病毒表达载体,包装获得的病毒感染人脂肪细胞的效率可达到85%以上,miR-146b过表达水平可接近4倍。结论本研究成功构建了人miR-146b慢病毒表达载体,包被的慢病毒可以在人脂肪细胞中实现过表达效果,为后续功能研究奠定了基础。
- 陈玲史春梅杨蕾朱璐徐广峰季晨博郭锡熔张春梅
- 关键词：慢病毒
- hsa-miR-26b表达沉默对不同时间点脂肪细胞蛋白分泌的影响
- 目的:探讨hsa-miR-26b表达沉默对人脂肪前体细胞分化过程中不同时间点培养基上清中各种肥胖及炎症相关蛋白分泌的影响.方法:hsa-miR-26b表达沉默的病毒感染人脂肪前体细胞,在诱导分化过程中收集不同时间点的细胞...
- 杨蕾徐广峰季晨博史春梅陈玲庞玲霞赵亚萍郭锡熔
- miR-26b慢病毒载体构建及其在人前体脂肪细胞中的表达验证被引量：1
- 2014年
- 目的构建人miR-26b慢病毒表达载体,并检测其在人前体脂肪细胞中过表达效果。方法以人脂肪细胞基因组DNA为模板,PCR扩增包含miR-26b所在区域上下游100bp左右的基因组DNA,克隆慢病毒表达载体,进一步包装成慢病毒并感染人脂肪细胞,荧光定量PCR检测miR-26b表达。结果成功构建miR-26b慢病毒载体,病毒感染效率为75%左右,miR-26b过表达效率达2倍以上。结论成功构建了miR-26b慢病毒表达载体,可用于研究miR-26b在人脂肪细胞中的分子机制。
- 徐广峰赵亚萍史春梅陈玲杨蕾宋桂仙宋雷雷赵超季晨博郭锡熔
- 关键词：慢病毒载体前体脂肪细胞
- NYGGF4基因表达沉默对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨NYGGF4(又称PID1)基因沉默对脂肪细胞线粒体代谢的影响。方法以3T3-L1前体脂肪细胞为研究对象,体外培养稳定转染NYGGF4基因沉默载体(pGPU6/GFP/Neo-shRNA,NYGGF4-RNAi)的3T3-L1前体脂肪细胞,以转染空载体(pG-PU6/GFP/Neo-shRNA,NC shRNA)的3T3-L1前体脂肪细胞作为对照,经1-甲基-3异丁基黄嘌呤加地塞米松、胰岛素方案诱导分化为成熟脂肪细胞,采用实时定量RCR技术检测成熟脂肪细胞中线粒体代谢酶指标:己糖激酶、乙酰辅酶A羧化酶柠檬酸合成酶、肉毒碱棕榈酰转移酶1、细胞色素C基因表达水平。结果 NYGGF4表达沉默与NYGGF4基因过表达相比,可以部分逆转3T3-L1脂肪细胞中己糖激酶、乙酰辅酶A羧化酶、柠檬酸合成酶、肉毒碱棕榈酰转移酶1、细胞色素C基因表达水平,差异均有统计学意义。结论NYGGF4基因过表达,下调3T3-L1脂肪细胞中定位于线粒体的代谢关键酶,提示NYGGF4基因的动态平衡对维持3T3-L1脂肪细胞的线粒体代谢具有重要作用。
- 史春梅季晨博张春梅朱金改陈玲郭锡熔
- 关键词：线粒体线粒体代谢3T3-L1脂肪细胞
- hsa-miR-26b沉默载体的构建及验证
- 庞玲霞史春梅徐广峰季晨博杨蕾陈玲郭锡熔
- NYGGF4(PID1)基因过表达对脂肪细胞线粒体代谢的影响被引量：1
- 2012年
- 【目的】观察NYGGF4(PID1)基因过表达对脂肪细胞线粒体代谢的影响。【方法】以3T3-L1前体脂肪细胞为研究对象,体外培养稳定转染NYGGF4(PID1)基因(NYGGF4-pcDNA3.1(+)/myc-His B)的3T3-L1前体脂肪细胞,以转染空载体[pcDNA3.1(+)/myc-His B]的3T3-L1前体脂肪细胞为对照,经1-甲基-3异丁基黄嘌呤(MIX)加地塞米松、胰岛素方案诱导分化为成熟脂肪细胞,采用Real-time PCR检测线粒体代谢酶指标:己糖激酶(Hexokinase,HKI)、乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA,ACC)、柠檬酸合成酶(citrate synthase,CS)、肉毒碱棕榈酰转移酶1(Carnitine palmitoyl-transferase 1,CPT1)、细胞色素C(Cytochrome c,Cyc-c)基因表达水平。【结果】NYGGF4(PID1)过表达显著降低3T3-L1脂肪细胞己糖激酶、乙酰辅酶A羧化酶、柠檬酸合成酶、肉毒碱棕榈酰转移酶1、细胞色素C基因表达水平,差异有统计学意义。【结论】NYGGF4(PID1)基因过表达,下调3T3-L1脂肪细胞中定位于线粒体的代谢关键酶,提示NYGGF4(PID1)基因过表达能影响3T3-L1脂肪细胞的线粒体代谢。
- 史春梅季晨博张春梅朱金改陈玲郭锡熔
- 关键词：线粒体线粒体代谢3T3-L1脂肪细胞
- 脂肪细胞分化相关miRNA-hsa-miR-378生物信息学分析被引量：3
- 2012年
- 【目的】利用各种生物信息学工具分析hsa-miR-378转录调控、靶基因功能,以期为研究hsa-miR-378在人脂肪细胞分化过程中的功能与调控机制提供线索。【方法】应用UCSC Genome Browser、Promoter scan等在线工具,分析hsa-miR-378在基因组上下游10kb以内的CpG岛分布情况、转录起始位置(TSS)、转录因子结合位置(TFBS)等;选择TargetScan、PicTar、MiRanda三种计算方法预测hsa-miR-378的靶基因,取三个预测结果的交集,并合并DIANA LAB-TarBase 6.0数据库的已验证靶标,对所得靶基因集分别进行GO注释描述、GO富集分析和pathway富集分析。【结果】hsa-miR-378可能具有独立的启动子,可能受C/EBPβ转录因子的调控;其预测靶基因集合富集于转录调控、蛋白质修饰、细胞分化等生物学过程和功能(P<0.01);并显著富集于TGF-β信号通路、Wnt信号通路等4个信号通路,以及甲状腺癌、系统性红斑狼疮等8个疾病通路中(P<0.05)。【结论】通过对hsa-miR-378转录调控元件、靶基因的分析,为hsa-miR-378在人脂肪细胞中的功能与调控机制研究提供了线索和理论依据。
- 徐露莲史春梅陈玲季晨博郭锡熔徐美玉
- 关键词：MICRORNA生物信息学脂肪细胞分化
