徐健
- 作品数:23 被引量:51H指数:5
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- 相关领域:医药卫生生物学理学历史地理更多>>
- Smad3促进大鼠卵巢颗粒细胞自噬被引量:7
- 2014年
- 目的探讨Smad3基因对大鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响。方法 21d SD雌性大鼠腹腔注射孕马血清20 IU/只,48h后收集卵巢颗粒细胞进行原代培养。培养细胞分为3组:空白对照组:培养液中不加任何处理因素;敲低实验组:培养液中加入Smad3基因特异性的SiRNA及转染试剂RNAiMAX;过表达实验组:培养液中加入Smad3真核表达质粒及转染试剂Lipo 2000。免疫细胞化学方法鉴定培养细胞纯度;Western blotting方法检测Smad3蛋白表达变化,检测转染效率。Smad3基因敲低及过表达后,Western blotting方法检测自噬体膜形成标志蛋白LC3B及自噬调控相关蛋白Bcl-2的蛋白表达变化。结果 Smad3敲低时,LC3B蛋白Ⅱ型与Ⅰ型的比值(LC3BⅡ/Ⅰ)变化不明显,Bcl-2蛋白表达明显降低;Smad3过表达时,LC3BⅡ/Ⅰ明显增加,Bcl-2蛋白表达明显增加。结论Smad3基因特异的SiRNA及真核表达质粒可以有效地转入大鼠卵巢颗粒细胞中,Smad3基因促进大鼠卵巢颗粒细胞自噬,其机制可能与Bcl-2蛋白相关。
- 申春艳董静霞徐健
- 关键词:SMAD3卵巢颗粒细胞自噬免疫组织化学免疫印迹法
- Survivin在正常睾丸中的表达和定位
- 2012年
- Survivin是1997年由耶鲁大学的Ambrosini等利用效应细胞蛋白酶受体-1(effectorcellproteasereceptor-1,EPR-1)的cDNA在人类基因组库中筛选克隆的一种凋亡抑制基因。Survivin蛋白属于凋亡抑制蛋白(1AP)家族成员,在大多数肿瘤中高表达,在成体已分化的正常组织细胞中几乎检测不到。然而,Survivin不仅仅是一个肿瘤特异性蛋白,有实验证明在鼠胚胎处于分化状态的组织中可以检测到Survivin的表达,而且在成体造血系统中也可表达Survivin。本研究采用免疫组织化学显色方法检测了不同年龄段人的正常睾丸组织中Survivin蛋白的表达定位,以探讨其在正常生精过程中的作用。
- 申春艳董静霞徐健
- 关键词:SURVIVIN蛋白睾丸组织凋亡抑制基因凋亡抑制蛋白人类基因组特异性蛋白
- 卵泡刺激素调节大鼠卵巢颗粒细胞中Smad2/Smad3蛋白的表达及磷酸化被引量:1
- 2008年
- 目的:研究卵泡刺激素(FSH)对大鼠卵巢颗粒细胞中Smad2/Smad3蛋白的调节。方法:21dSD雌鼠,腹腔注射孕马血清20IU,对颗粒细胞进行原代培养,用转化生长因子β受体Ⅱ(TβRⅡ)抗体中和卵巢颗粒细胞表面TβRⅡ,以阻断TGFβ/Smads信号通路,再以不同浓度的FSH对细胞进行不同时间的处理,免疫印迹法检测TGFβ信号通路中TβRⅡ、Smad2/Smad3及P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达。结果:TβRⅡ、Smad2/Smad3、P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达量与FSH的作用呈时间依赖性显著增强;TGFβ/Smads信号通路被阻断后再用FSH处理,Smad2/Smad3、P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达量没有明显变化;细胞表面TβRⅡ恢复后,Smad2/Smad3、P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达量有少量增加。结论:FSH刺激大鼠卵巢颗粒细胞中Smad2/Smad3的表达和磷酸化;FSH对Smad2/Smad3的激活作用在相当程度上依赖于TβRⅡ。
- 卫晓红祁丽花徐健迟晓春董静霞
- 关键词:卵巢颗粒细胞卵泡刺激素转化生长因子ΒSMAD2SMAD3
- SMAD3敲除对雄性小鼠生殖功能的影响
- 2006年
- 目的探讨SMAD3缺失对雄性小鼠生殖功能的影响。方法野生型雌性小鼠分别与基因敲除(实验组)及野生型(对照组)雄性小鼠配对;睾丸常规石蜡包埋、切片并进行HE、TUNEL染色;对附睾精子进行形态、动力学分析等。结果实验组受孕率为92%,对照组受孕率100%;实验组每窝仔鼠数目为(5.45±0.78)只,存活率(87±19)%;对照组每窝仔鼠(6.01±1.03)只,存活率(97±15)%。不同发育阶段(7、18及90 d)基因敲除小鼠的睾丸与同龄野生型相比,组织学结构未见明显异常,生精细胞凋亡未见明显增加。其精子形态正常,数量及活力与野生型相比无显著下降。结论SMAD3敲除对雄性小鼠生殖功能无明显影响,提示SMAD3在睾丸中的功能是可以被替代的。
- 肖泽均徐健Elizabeth McGee
- 关键词:SMAD3基因敲除睾丸精子生殖
- 非线性Dirac方程的多峰孤波及其碰撞研究
- 本文研究了带较一般自相互作用的非线性Dirac方程,这种较一般的自相互作用是整数k+1次标量,赝标量,向量和赝向量自相互作用的线性组合.我们解析地给出了上述非线性Dirac方程的孤波解,并严格证明了其电荷,能量,动量密度...
- 徐健
- 关键词:孤波解有限差分方法
- CBS在小鼠卵泡发育过程中的表达模式及其功能初探
- 2006年
- 目的:研究调节同型半胱氨酸水平的关键酶——胱硫醚β合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)在卵母细胞和卵泡发生过程中的动态表达模式及潜在的生物学作用。方法:以体外培养的卵泡以及去除卵泡中卵母细胞后培养的颗粒细胞为载体系统,利用半定量RT-PCR的方法,研究不同时期卵泡以及颗粒细胞中CBS的动态表达模式。结果:在各级卵泡的颗粒细胞中均有高水平的CBS表达,用完整卵泡进行的表达研究表明,各级卵泡中也都有CBS高水平的表达,同时期的颗粒细胞与完整卵泡相比,前者具有更高水平的CBS表达;而不同发育阶段的卵母细胞中均未见CBS表达。结论:CBS在卵泡和卵母细胞的生长、发育和成熟过程中起着重要的作用,其中CBS在卵泡和卵细胞中不同的表达模式提示CBS对卵母细胞发育的影响可能是通过卵泡细胞与卵母细胞的相互作用而实现的。
- 梁蓉郁卫东杜军保杨丽君尚美杨京京徐健郭静竹
- 关键词:卵泡卵母细胞
- 转化生长因子-β超家族信号转导及其对小鼠早期胚胎发育的影响被引量:1
- 2013年
- 转化生长因子-β(TGF-β)超家族的信号转导是近年来的研究热点之一。TGF-β超家族的信号分子与受体结合后,激活下游的SMAD蛋白,后者进入细胞核调控特定基因的表达。它们的功能十分复杂,不仅与转化、组织纤维化、肿瘤发生等病生理过程直接相关,而且具有一定的免疫调节功能。实际上,TGF-β超家族信号转导在胚胎发育的调控中亦发挥了至关重要的作用。本文我们重点介绍TGF-β超家族信号转导的特点及其在小鼠早期胚胎发育过程中的作用,以期对人类胚胎发育的研究起到一定的提示作用。
- 郭浩徐健
- 关键词:信号转导早期胚胎发育极化小鼠
- Smad3基因敲除小鼠肾Smad2和p-Smad2表达的变化
- 2010年
- 目的:观察Smad3基因敲除小鼠肾Smad2和p-Smad2表达的变化,探讨Smad3基因敲除小鼠肾是否有Smad2和p-Smad2代偿性增加。方法:4只Smad3基因敲除小鼠,10只野生型小鼠,应用免疫组织化学显色技术,检测Smad2和矿Smad2蛋白的定位和表达情况,并用Modc病理图像分析系统对图像进行半定量分析。结果:野生型小鼠肾Smad2蛋白在肾远端小管和肾集合管细胞胞质中有广泛弱表达,p-Smad2蛋白在肾远端小管和肾集合管细胞胞质、胞核中也有弱表达,而Smad3基因敲除小鼠的Smad2和p-Smad2的表达比野生型小鼠有显著升高。结论:Smad3基因敲除能引起小鼠肾Smad2和p-Smad2表达的代偿性增加。
- 吴婧徐健董静霞
- 关键词:SMAD2小鼠
- 组织学与胚胎学英语教学改革探讨
- <正>组织学与胚胎学是十分重要的医学基础课程。随着多年教育改革的深入、社会多元化的发展及素质教育的进行,现在的医学生思路开阔,思维活跃,主观能动性强,主动参与的积极性高,传统的教学模式已远远不能满足他们的要求。为适应21...
- 徐健唐军民
- 文献传递
- 盐酸吉西他滨对乳腺癌小鼠Tusc2、Lats2基因表达的影响被引量:2
- 2010年
- 目的探讨盐酸吉西他滨对乳腺癌小鼠肿瘤抑制因子候选基因2(Tusc2)、大型肿瘤抑制因子2(Lats2)基因mRNA及蛋白水平表达的影响。方法首先建立小鼠乳腺癌模型,盐酸吉西他滨药物处理前(0d)、处理后第5天(5d)、处理后第10天(10d)分别取材,采用RT-PCR和Western blotting方法检测Tusc2、Lats2基因表达量的变化。结果盐酸吉西他滨作用乳腺癌小鼠第10天(10d)后,RT-PCR结果显示,与空白对照组相比,实验组Tusc2与Lats2 mRNA相对表达量分别增加约4.5倍与8倍(P<0.05),其余各组与相应空白对照组相比,相对表达量无统计学差异(P>0.05);同时Western blotting结果显示,实验组与空白对照组相比,TUSC2与LATS2蛋白相对表达量分别上调约10倍与5倍(P<0.05)。其他各组之间相比统计学无显著差异(P>0.05)。结论盐酸吉西他滨能有效上调乳腺癌小鼠体内Tusc2、Lats2基因的表达。
- 李业霞曹进能祁丽花董静霞迟晓春徐健
- 关键词:盐酸吉西他滨乳腺癌免疫印迹法小鼠