刘志敏
- 作品数:79 被引量:579H指数:10
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- 由人血清白蛋白和干扰素组成的融合蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种由人血清白蛋白和干扰素组成的融合蛋白及其编码基因与应用。该融合蛋白,是如下(a)或(b)的蛋白质:(a)由序列表中序列1的氨基酸残基序列组成的蛋白质;(b)将序列表中序列1的氨基酸残基序列经过一个或几个氨...
- 刘志敏赵洪亮薛冲王洋熊向华姚学勤李献玉
- 文献传递
- 人血清白蛋白-睫状神经营养因子突变体融合蛋白基因在毕赤酵母中的表达及表达产物的纯化和活性鉴定被引量:11
- 2005年
- 为了延长人睫状神经营养因子突变体的体内半衰期 ,将人血清白蛋白 (HSA)的C 末端和人睫状神经营养因子突变体AX15 (R13K)的N 末端通过一个 11个氨基酸的连接肽融合在一起 ,构建了融合蛋白HSA AX15 (R13K)。HSA AX15 (R13K)融合蛋白基因在巴斯德毕赤酵母中进行表达后通过阳离子交换层析、反向层析和凝胶过滤对表达产物进行了分离纯化。体外TF 1细胞存活实验表明与HSA融合并未影响AX15 (R13K)的生物学活性。体内动物实验表明HSA AX15 (R13K)融合蛋白的疗效比AX15 (R13K)更为持久 :每 3天注射一次 4 8mg kg的HSA AX15 (R13K)融合蛋白的治疗效果优于每天注射一次 1 6mg kg的AX15 (R13K)的治疗效果。HSA AX15 (R13K)融合蛋白不但可以减少用药次数 ,提高病人的顺应性 ,而且还可以减少用药量和血药浓度的波动 ,从而降低副反应 ,在临床应用上具有一定的优势。
- 赵洪亮薛冲熊向华张伟杨秉芬刘志敏
- 关键词:睫状神经营养因子巴斯德毕赤酵母
- 1,3-丙二醇生产的研究进展被引量:7
- 2008年
- 作为一种重要的化工材料,1,3-丙二醇凭借其自身的优点,在工业生产中具有很高的应用价值。但其传统的生产方法,操作繁琐、技术难度大、设备投资高,已无法满足对1,3-丙二醇的日益增长的需要;而微生物发酵法又面临着产率低、发酵条件难以控制等弊病。相反,基因工程技术在1,3-丙二醇生产过程中扮演着越来越重要的角色。简要综述了1,3-丙二醇研究及生产工艺的进展。
- 孙博刘志敏游松
- 关键词:3-丙二醇基因工程甘油
- 二硫键异构酶被引量:10
- 2005年
- 天然二硫键的形成是许多蛋白正确折叠中的限速步骤,在稳定蛋白质构象和保持蛋白质 活性方面起重要作用。讨论的二硫键异构酶是内质网中一种重要的蛋白折叠催化剂,它催化蛋 白二硫键的形成和错误配对二硫键的重排,并有抑制错误折叠蛋白聚集的分子伴侣活性。PDI 广泛应用于基因工程上提高外源蛋白表达水平。
- 熊向华刘志敏
- 关键词:二硫键异构酶蛋白折叠分子伴侣
- 人胰高血糖素样肽-1与人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的表达被引量:3
- 2008年
- 目的:在巴斯德毕赤酵母中表达有降糖活性的人胰高血糖素样肽-1(hGLP-1)突变体(2Gly-hGLP-1)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白。方法:为将GLP-1氨基酸序列第2位的丙氨酸(Ala)定点突变为甘氨酸(Gly),根据毕赤酵母偏爱密码子合成编码2Gly-hGLP-1的基因;采用重叠PCR法拼接2Gly-hGLP-1和HSA的基因,使得2Gly-hGLP-1的C端与HSA的N端通过甘氨酸五肽接头连接;将该融合基因插入表达载体pPIC9构建为重组载体pPIC9/2Gly-hGLP-1-HSA,电击转化至毕赤酵母GS115细胞,通过表型筛选和诱导表达实验获得高效表达菌株;工程菌在5L发酵罐中培养后,对发酵产物进行分离纯化和生物学活性分析。结果:融合蛋白在5L发酵罐中的表达量约为200mg/L,经纯化后纯度可达95%以上;小鼠糖耐量实验表明该融合蛋白具有明显的控血糖活性。结论:在毕赤酵母中分泌表达的融合蛋白2Gly-hGLP-1-HSA具有降血糖活性。
- 龙娟薛冲赵洪亮杨晓红刘志敏
- 关键词:人血清白蛋白融合蛋白毕赤酵母
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)在毕赤酵母中的高效表达
- 2004年
- 从人胎盘总RNA中通过RT PCR方法获得sTRAIL基因的cDNA ,并通过构建高拷贝表达载体在毕赤酵母中获得了高效表达 ,表达量可达 4 0 1mg L。并对表达产物进行了分离纯化和生物学活性分析 ,获得了纯度大于 90 %的纯品 ,该样品能明显表现出诱导L92 9肿瘤细胞凋亡的作用 ,半数致死量为 0 1 8μg mL 。
- 张伟赵洪亮薛冲刘志敏黎明张士猛
- 关键词:TRAIL毕赤酵母
- 类风湿关节炎发病机制及其治疗方法研究进展被引量:74
- 2005年
- 张义浜刘志敏熊凌霜
- 关键词:类风湿关节炎发病机制
- 一种具有促增长作用的融合蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种具有促进机体增长作用的融合蛋白及其编码基因与应用。其目的是提供一种具有促进机体增长作用的融合蛋白及其编码基因与其在制备儿童及成人生长激素缺乏症治疗性药物中的应用。该融合蛋白的氨基酸残基序列如SEQ ID ...
- 刘志敏王楠赵洪亮薛冲张伟熊向华杨秉芬姚学勤
- 文献传递
- 一种具有抗肿瘤作用的融合蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种具有抗肿瘤作用的融合蛋白及其编码基因与应用。本发明所提供的融合蛋白的氨基酸残基序列如序列表中的SEQ ID NO:5所示。本发明的具有抗肿瘤作用的融合蛋白可作为预防和/或治疗由人乳头瘤病毒感染引起的适应症...
- 刘志敏张士猛赵洪亮薛冲张伟黎明熊向华
- 文献传递
- 一种具有抗肿瘤作用的融合蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种具有抗肿瘤作用的融合蛋白及其编码基因与应用,其目的是提供一种具有抗肿瘤作用的融合蛋白及其编码基因与以该融合蛋白为活性成分的预防和/或治疗由人乳头瘤病毒感染引起的肿瘤疫苗。该融合蛋白是具有序列表中的SEQ ...
- 刘志敏张士猛赵洪亮薛冲张伟黎明熊向华
- 文献传递