郝乐友
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 供职机构：沈阳农业大学生物科学技术学院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省科技厅基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 脱氧胆酸钠在副溶血性弧菌死活细胞叠氮溴乙锭PCR鉴别中的应用被引量：2
- 2013年
- 【目的】通过将表面活性剂脱氧胆酸钠(Sodium deoxycholate,SD)与叠氮溴乙锭(Ethidium bromide monoazide,EMA)-PCR反应体系相结合,建立SD-EMA-PCR鉴别副溶血性弧菌死活细胞的检测方法。【方法】依次对加入检测体系中的脱氧胆酸钠最适浓度、EMA区分死活细胞DNA的浓度范围、EMA激活光解最佳曝光时间进行优化;确定SD-EMA-PCR方法检测副溶血性弧菌死活细胞混合体系中活细胞的最低检出限。【结果】当脱氧胆酸钠浓度≤0.5 g/L,EMA的浓度为3.2?34.0 mg/L,曝光时间为25 min时,SD-EMA-PCR检测体系仅对死细胞DNA扩增产生抑制作用。SD-EMA-PCR检测活菌细胞的最低检出限为10 CFU/mL。【结论】死活细胞混合体系的SD-EMA-PCR检测证明该方法能够明显降低EMA-PCR漏检的死菌对检测结果造成的影响,为完善食源性致病菌检测中死活菌细胞鉴别方法提供了一种有效途径。
- 张超吕淑霞于晓丹马镝郝乐友
- 关键词：副溶血性弧菌
- 表面活性剂脱氧胆酸钠在单增李斯特菌死活细胞EMA-PCR鉴别中的应用被引量：5
- 2013年
- 通过脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,SD)结合染料叠氮溴乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与PCR反应体系相结合,建立纯培养条件下区分单增李斯特菌死活细胞的方法,即SD-EMA-PCR鉴别单增李斯特菌死活细胞检测法。结果表明:向浓度为2.0×108CFU/mL的单增李斯特死菌悬液中加入终浓度为1.5 mg/mL的表面活性剂脱氧胆酸钠后,EMA激活光解最佳曝光时间为25 min。SD-EMA-PCR检测体系中,对死菌细胞DNA的PCR扩增抑制的EMA最小浓度为1.6μg/mL;而对活菌细胞DNA的PCR扩增不抑制的EMA最大浓度为9μg/mL,活菌细胞的最低检出限为20 CFU/mL。SD-EMA-PCR检测法能够减小EMA-PCR漏检死菌细胞给检测结果带来假阳性的可能,降低了检测的成本,为单增李斯特菌的快速检测提供了一种新的有效途径。
- 郝乐友吕淑霞张超于晓丹马镝曹慧颖
- 关键词：表面活性剂单增李斯特菌
