张超
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 供职机构：沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁省昆虫资源工程技术研究中心更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省大学生创新创业训练计划项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程医药卫生生物学更多>>
- 表面活性剂脱氧胆酸钠在单增李斯特菌死活细胞EMA-PCR鉴别中的应用被引量：5
- 2013年
- 通过脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,SD)结合染料叠氮溴乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与PCR反应体系相结合,建立纯培养条件下区分单增李斯特菌死活细胞的方法,即SD-EMA-PCR鉴别单增李斯特菌死活细胞检测法。结果表明:向浓度为2.0×108CFU/mL的单增李斯特死菌悬液中加入终浓度为1.5 mg/mL的表面活性剂脱氧胆酸钠后,EMA激活光解最佳曝光时间为25 min。SD-EMA-PCR检测体系中,对死菌细胞DNA的PCR扩增抑制的EMA最小浓度为1.6μg/mL;而对活菌细胞DNA的PCR扩增不抑制的EMA最大浓度为9μg/mL,活菌细胞的最低检出限为20 CFU/mL。SD-EMA-PCR检测法能够减小EMA-PCR漏检死菌细胞给检测结果带来假阳性的可能,降低了检测的成本,为单增李斯特菌的快速检测提供了一种新的有效途径。
- 郝乐友吕淑霞张超于晓丹马镝曹慧颖
- 关键词：表面活性剂单增李斯特菌
- 脱氧胆酸钠在副溶血性弧菌死活细胞叠氮溴乙锭PCR鉴别中的应用被引量：2
- 2013年
- 【目的】通过将表面活性剂脱氧胆酸钠(Sodium deoxycholate,SD)与叠氮溴乙锭(Ethidium bromide monoazide,EMA)-PCR反应体系相结合,建立SD-EMA-PCR鉴别副溶血性弧菌死活细胞的检测方法。【方法】依次对加入检测体系中的脱氧胆酸钠最适浓度、EMA区分死活细胞DNA的浓度范围、EMA激活光解最佳曝光时间进行优化;确定SD-EMA-PCR方法检测副溶血性弧菌死活细胞混合体系中活细胞的最低检出限。【结果】当脱氧胆酸钠浓度≤0.5 g/L,EMA的浓度为3.2?34.0 mg/L,曝光时间为25 min时,SD-EMA-PCR检测体系仅对死细胞DNA扩增产生抑制作用。SD-EMA-PCR检测活菌细胞的最低检出限为10 CFU/mL。【结论】死活细胞混合体系的SD-EMA-PCR检测证明该方法能够明显降低EMA-PCR漏检的死菌对检测结果造成的影响,为完善食源性致病菌检测中死活菌细胞鉴别方法提供了一种有效途径。
- 张超吕淑霞于晓丹马镝郝乐友
- 关键词：副溶血性弧菌
- EMA-LAMP方法快速检测鉴别副溶血性弧菌被引量：6
- 2012年
- 建立将DNA染料EMA(ethidium bromide monoazide)结合环介导等温扩增技术(loop-mediated isother-mal amplification,LAMP)的方法(EMA-LAMP),用于检测鉴别副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)死/活菌细胞。针对副溶血性弧菌不耐热溶血素基因tlh(thermolabile hemolysin)特异性序列的6个位点设计4条引物及2条环引物,进行检测。结果表明,浓度为8.0μg/mL或更高浓度的EMA,至少经25 min的曝光处理,能够有效抑制浓度为1×108cfu/mL的副溶血性弧菌死细胞的扩增,而对用相同浓度EMA处理的副溶血性弧菌活细胞扩增没有影响。经EMA处理,含有不同比例的副溶血弧菌死细胞和活细胞的混合液中,活菌的最小检测限为1.0×102cfu/mL。EMA-LAMP方法比EMA-PCR方法区分死活细胞中的活细胞更为有效,是一种能够快速、灵敏且更为有效鉴别副溶血性弧菌死活细胞的新方法。
- 金雪花吕淑霞张超徐彬于晓丹
- 关键词：副溶血性弧菌
- 柞树单宁的提取及柞树品种间单宁含量的比较被引量：4
- 2014年
- 本试验以辽东栎绿叶样品为材料,采用有机溶剂萃取法及分光光度法探讨了柞树单宁提取工艺,并对5种不同柞树品种的绿叶、落叶及枝条中单宁含量进行了比较。结果表明,选用80%乙醇(含1%盐酸)作提取剂,在料液比1∶15、提取时间2.5h、提取温度75℃条件下,单宁的提取量可达206.74mg/g;麻栎的单宁含量较高,绿叶期可达222.02mg/g,落叶期可达177.30mg/g,枝条单宁含量可达67.92mg/g,辽东栎、蒙古栎、锐齿槲栎及槲各有不同。
- 张娜王斌赫张超姜义仁秦利
- 关键词：柞树
